1、ImagJ是一款简单的图像处理与分析软件，可以用来进行WB定量分析。一、利用ImagJ对WB条带进行灰度分析1、Fileopen打开WB片子2、把图片转化成灰度图片imagetype8-bit3、消除背景影响processsubtractbackground选择50基本可以4、设置定量参数analyzesetmeasurements，点击面积，平均密度和灰度值及IntegratedDensity5、设置单位analyzesetscale，在"unitoflength”的方框里输入"pixels”6、把图片转换成亮带，Editinvert7、选
2、择FreehandSelection，尽量把条带圈起来，点击键盘m出来IntDen灰度值当测定完所有条带，选结果中的“Edit”的“SelectAII”，然后复制数据“IntDen”至UExcel表即可进行分析8、复制数据IntDen进行分析二、利用ImagJ对WB条带进行密度分析1、Fileopen打开WB片子2、如条带不正，需修正imagetransformrotate调节angle值，直到条带水平为止3、选中矩形选项，圈中第一个条带，然后analyzegelsselectfirstlane（快捷键ctrl+1）,然后移动第一个条带上的矩形到第二个条带上，anal
3、yzegelsselectsecondlane（快捷键ctrl+2）,最后analyzegelsplotlanes4、选中直线工具，将开口的波峰关闭5、选中魔棒工具，点击波峰可以显示波峰下面积，即条带的密度值6、以第一个数值为基数，其他数值与第一个数值的比值为相对密度TheprotocolofimageJforquantitativeanalysisofWesternblotting:-openanimage-transfertheimageto8-bitsimagetype:8bits-Processsubstractbackgr
4、ound50-analyzesetmeasurements:pickarea,meangrayvalue,integrateddensity.-analyzesetscale,fill“unitoflength”with“pixels”-switchtheimagetobrightbandsedittinvert-freehandselection,choosethetargetareaontheimage.aband),typea“m”formeasurement,thenwegettheresu
5、ltfromanewwindow.-aftermeasuringallofthebands,pickthe“edit”oftheresultwindow.“selectall”,copytheintegrateddensityvaluestoexceltoanalyze.Theintegrateddensitymeansthattheareavaluemultipliesthemeangrayvalue.ForWesternblottinganalysistheintegrateddensityisveryimportant,because