首先,我们需要打开ImageJ软件,然后点击File→Open,找到待分析的WB条带图片。接下来,我们点击Image→Type→8-bit,将图片转化为灰度图片。然后,我们使用矩形工具框选所有条带,包括内参图。
接下来,我们点击Analyze→Gels→SelectFirstLane→Gels→PlotLanes,得到峰图。然后,我们使用直线工具闭合每个峰的开口,确保开口完全闭合。最后,我们使用魔棒工具,依次点击每个峰,得到的Area值即为每个条带量化值。
另一种方法是通过去除背景、设定参数、分割单个条带和测量Intden值来进行WB条带量化。首先,我们点击File→Open,打开待分析的WB条带图片。然后,我们点击Image→Type→8-bit,将图片转化为灰度图片。接着,我们使用Process→SubtractBackground,去除背景。然后,我们点击Analyze→Setmeasurement,设定Area、Meangrayvalue、Min&maxgrayvalue、Integrateddensity参数。我们点击Analyze→Setscale,确保unitoflength选项中的单位为pixel。最后,我们点击Edit→Invert,然后使用椭圆形工具分割单个条带,并点击Analyze→Measure,得到Intden值即为WB条带量化值。
通过以上方法,我们可以使用ImageJ软件进行WB条带的量化分析,从而更准确地评估某一蛋白的表达情况。
THE END