光学显微镜(ZEISS公司，德国，型号ImagerA2)；涡旋振荡仪(海门市其林贝尔仪器制造有限公司，中国，型号Vortex-5)；超纯水机(重庆力德高端水处理设备研发有限公司，中国，型号CCT-3320A)；电子天平(上海舜宇恒平科学仪器有限公司，中国，型号YP202N)；恒温水浴箱(江苏金坛市华欧实验仪器厂，中国，型号HH-601)；垂直电泳转移装置(Bio-Rad公司，美国，型号Mini-PROTEANTetra1658001)、Trans-Blot转膜装置(Bio-Rad公司，美国，型号MiniTrans-BlotModule1703935)、凝胶成像系统(Bio-Rad公司，美国，型号CFX96)；水平脱色摇床(海门市麒麟医用仪器厂，中国，型号TS-2000A)；酶标仪(Bio-Tek仪器有限公司，美国，型号ELX800)；高速台式离心机(湖南湘仪实验室仪器开发有限公司，中国，型号TG16-WS)；-80℃低温冰箱(海尔生物医疗股份有限公司，中国，型号DW-86L388J)。
SPF级雄性SD大鼠40只，体质量(200±20)g，由北京华阜康生物科技股份有限公司提供[实验动物生产许可证号SCXK(京)2014-0004]。已通过重庆市中医院医学伦理委员会审查批准使用，符合实验室动物管理与使用准则，实验动物使用许可证号SYXK(渝)2017-0005。实验期间实验环境温度23~26℃，湿度50%~60%。SD大鼠40只，随机分为5组(n=8)：①正常对照组；②模型组；③SSD高剂量(3.00mg/kg)组；④SSD中剂量(1.50mg/kg)组；⑤SSD低剂量(0.75mg/kg)组。模型组和SSD组大鼠予以无菌猪血清0.5mL/只腹腔注射，每周2次，连续8周。SSD组从第5周开始每天2次腹腔注射各组剂量的SSD，共4周。对照组和模型组腹腔注射等体积的0.9%氯化钠注射液。观察各组大鼠的状态，记录死亡数。样本采集前大鼠禁食不禁水12h，称量并记录。将大鼠按0.7mL/100g注射5%水合氯醛，腹主动脉采血10mL左右置于无菌抗凝管中，3000×g离心10min，吸取血清，-80℃分装保存待用。将大鼠剖腹取肝脏组织，4%多聚甲醛固定用于病理学检测；-80℃保存用于蛋白的检测。
ELISA试剂盒测量大鼠血清ALT、AST表达水平。全血标本于室温放置2h后以1000×g离心20min，取上清检测。BCA法测定蛋白浓度，采用ELISA试剂盒检测大鼠血清中TNF-α、IL-1β和IL-18的含量。
4%多聚甲醛固定大鼠肝脏组织，经脱水、石蜡包埋、切片后行HE染色，光学显微镜镜检，图像采集分析，观察大鼠肝脏组织的形态学变化。
研钵中加入液氮研磨组织至微末，收集50~80mg至1.5mLEP管中，每管加适量(约100μL/10mg)蛋白裂解液(用前需提前加入蛋白酶抑制剂)；冰上裂解30min，超声处理。4℃、12000×g离心10min。离心后取上清装入干净的1.5mLEP管中，取一部分通过BCA法测定蛋白浓度，-80℃分装保存。取适量蛋白加入样品缓冲液于95℃煮沸10min。上样后经SDS-PAGE凝胶电泳分离，将蛋白条带电转至PVDF膜上，5%脱脂奶粉室温封闭2h，加入1∶500稀释的一抗(NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD、TLR4、p65、p-p65)和1∶1000稀释的一抗(β-actin)4℃孵育过夜，洗膜后加入1∶1000稀释的二抗室温孵育2h，洗膜后采用ECL发光法检测蛋白条带，凝胶成像仪记录条带灰度值。以β-actin为内参，以目的蛋白/内参蛋白表示目的蛋白的相对表达水平。
应用SPSS21.0统计软件处理数据，计量资料用x±s表示，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD-t检验，以P<0.05为有统计学意义。
综上所述，本研究通过网络药理学研究方法初步发现了SSD治疗自身免疫性肝病的可能作用机制。在免疫性大鼠肝纤维化动物模型中，SSD可抑制TLR4/Myd88/NF-κB信号通路和NLRP3炎症小体的启动和激活，减轻下游炎症因子的释放，减轻肝脏炎症反应，起到保护性的作用。因此，本研究为SSD的进一步开发和临床利用提供了研究基础。