实验步骤1.古兹菲德-雅各氏病(CJD)病人的尸解脑组织,4%中性甲醛固定,石蜡包埋,连续切片,厚5μm(贴片前的载玻片应预涂不含有荧光色素的黏合剂)。2.常规脱蜡,水化。3.抗原修复(柠槺酸盐缓冲液pH6.0中,高压灭菌器加热100℃,20min)及96%甲酸孵育2m
免疫荧光标记技术(immunofluorescencetechnique)是将已知的抗体或抗原分子标记上荧光素,当与其相对应的抗原或抗体起反应时,在形成的复合物上就带有一定量的荧光素,在荧光显微镜下就可以看见发出荧光的抗原抗体结合部位,检测出抗原或抗体。实验方法基本方案实验材料悬浮细胞试剂、试剂盒
实验方法原理活细胞表面保留有较完整的抗原或受体,先用特异性鼠源性单克隆抗体与细胞表面相应抗原结合,再用荧光标记的第二抗体结合,根据所测定的荧光强度和阳性百分率即可知相应抗原的密度和分布。实验材料抗体血清试剂、试剂盒RPMI1640DPBS洗涤液固定液仪器、耗材玻璃管塑料管离心机显微镜实验步骤1.
实验方法原理取一定量的细胞悬液,先加入特异的第一抗体,待反应完全后洗去未结合抗体,在加入荧光标记的第二抗体,生成抗原-抗体复合物,以流式细胞仪检测其上标记的荧光素被激发后发出的荧光。实
荧光显微镜(Fluorescencemicroscope):荧光显微镜是以紫外线为光源,用以照射被检物体,使之发出荧光,然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置。荧光显微镜用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等。细胞中有些物质,如叶绿素等,受紫外线照射后可发荧光;另有一些物质本
实验方法原理活细胞表面保留有较完整的抗原或受体,先用特异性鼠源性单克隆抗体与细胞表面相应抗原结合,再用荧光标记的第二抗体结合,根据所测定的荧光强度和阳性百分率即可知相应抗原的密度和分布。实验材料细胞样品试剂、试剂盒兔血清第二抗体单克隆抗体FCS-RPMI1640DPBS仪器、耗材玻璃管塑料管离心机荧
荧光显微镜(Fluorescencemicroscope):荧光显微镜是以紫外线为光源,用以照射被检物体,使之发出荧光,然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置。荧光显微镜用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等。细胞中有些物质,如叶绿素等,受紫外线照射后可发荧光;另有一些物质
1该仪器必须要与试纸配套使用,对试纸有专用性,必须要与试纸厂家合作开发2以上涉及功能若需要改变,都可以定制设计3荧光检测功能:必须要试纸厂家提供荧光染料的激发波长,发射波长,荧光寿命等参数4OEM合作可多样性,外壳和logo都可以客户自主设计
用于免疫荧光染色的染料需具备以下几个条件:荧光染料应有较高的量子产额和消光系数;荧光染料对488nm的激发光波长有较强的吸收;发射光波长与激发光波长之间应有较大的波长差;容易与被标记的单克隆抗体结合而不影响抗体自身的特异性。1.异硫氰酸荧光素(FITC):可产生亮绿色荧光。F
大量C3在肾小球毛细血管壁基底膜呈线状或带状沉积,C3呈不连续的线状类型,可以显示出毛细血管壁、肾小球囊和肾小管的轮廓。系膜的沉积物呈分散的针状或环状,环状是由于仅沉积物的外侧被染色的结果。另外,许多毛细血管壁可有颗粒状C3沉积物,线状毛细血管壁荧光呈双轨状,是由于C3沉积于基底膜的两侧。其他补
LC3合成之后是前提LC3pro-LC3;然后立刻C末端被ATG4水解切割掉一段多肽,暴露甘氨酸,这个是LC3-I,胞浆分布。自噬过程中,LC3-I在ATG7和ATG12-ATG5-ATG16L作用下(和泛素修饰过程很像),与磷脂酰乙醇胺共价结合,这个才是LC3-II,结合在自噬体膜上。LC-II由
是最早建立的免疫组织化学技术。它利用抗原抗体特异性结合的原理,先将已知抗体标上荧光素,以此作为探针检查细胞或组织内的相应抗原,在荧光显微镜下观察。当抗原抗体复合物中的荧光素受激发光的照射后即会发出一定波长的荧光,从而可确定组织中某种抗原的定位,进而还可进行定量分析。由于免疫荧光技术特异性强、灵敏度高
⑴基本原理染色程序分为两步,第一步,用未知未标记的抗体(待检标本)加到已知抗原标本上,在湿盒中37℃保温30min,使抗原抗体充分结合,然后洗涤,除去未结合的抗体。第二步,加上荧光标记的抗球蛋白抗体或抗IgG、IgM抗体。如果第一步发生了抗原抗体反应,标记的抗球蛋白抗体就会和已结合抗原的抗体
1)滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于已知抗原标本片,10min后弃去,使标本片保持一定湿度。2)滴加以0.01mol/L,pH7.4的PBS适当稀释的待检抗体标本,覆盖已知抗原标本片。将玻片置于有盖搪瓷盒内,37℃保温30min。3)取出玻片,置于玻片架上,先用0.01mol
选择一组同一批次不同浓度标准浓度样品,依据式1对样品浓度进行测量,分析系统的检测误差。由实测结果可以看出,对于标准浓度样品的测量误差在±8%以内,满足实际的使用要求。下面选取一组医院的病人血液样品,以进口的锐普智能荧光干式定量分析仪作为标准仪器进行对比测量。每个病例取75L病人血液样本加到
光源发射光路由LED光源、凸透镜1、滤光片1和凸透镜2组成。LED光源的光轴与凸透镜1、滤光片1以及凸透镜2的光轴在一条线上。光源为绿色(中心波长为580nm)高亮度LED光源,LED位于发射光路凸透镜1的焦点,这样光源发出的光经凸透镜1后变为平行光,滤光片1采用中心波长580nm带宽为30
测试结果及分析本文设计的免疫荧光定量分析仪可以测量血液和尿液中多种物质的浓度,本文以NT-proBNP(N末端脑钠肽前体)的浓度测量为例对仪器的运行效果进行分析。NT-proBNP是由心脏分泌的一种神经内分泌激素,已被证明是临床上诊断、治疗及判断心力衰竭患者预后的重要指标。荧光信号的采
1.漂洗血清蛋白H7.2-7.437度PBS2小时.2.-20度甲醇固定20分钟后,自然、干燥10分钟3.PBS洗净:3min*34.1%Triton:25min-30min.配成50ultriton+5mlpBS5.PBS洗净:2*5min6.羊血清封闭:37度,20分钟7.一抗,4度过夜
高。宠物荧光定量分析仪是实时检测反应的仪器,主要由基因扩增热循环组件、微量荧光检测光学系统,准确率在90%左右,是比较高的。宠物指人们为了精神目的,而不是为了经济目的而豢养的生物。
免疫荧光标记是微生物学、免疫学、病理学及免疫组织化学中常用的一种免疫学实验方法,在临床上得到了广泛的应用。实验方法原理免疫荧光标记技术(immunofluorescencetechnique)是将已知的抗体或抗原分子标记上荧光素,当与其相对应的抗原或抗体起反应时,在形成的复合物上就带有一定量的荧光
实验材料组织样品试剂、试剂盒生物素荧光染料链亲和素仪器、耗材离心机摇床实验步骤1.将湿纸巾铺于载玻片盒底部做成加湿盒,由冰冻切片仪中取出载有切片的载玻片,放入玻片盒中(每边放6片),或故湿盒中(载玻片勿相互接触)。2.待载玻片达室湿且未干时,铺加PBS于切片上(勿溢出玻片)。3.
方法:应用间接免疫荧光法(indirectimmunofluorescence,IIF)检测77份肺癌以及140份不同年龄段正常人血清中自身抗体。提取人喉癌上皮细胞(Hep-2)蛋白抗原,采用蛋白质印迹法对81份肺癌患者及52份正常人血清进行分析。结果:肺癌组和对照组的...
直接免疫荧光法是将特异的衣原体单克隆抗体用荧光素标记后来检查标本中衣原体,如标本中有衣原体抗原(包涵体或原体),则和抗体结合,在荧光显微镜下可见苹果绿色的荧光。一张涂片中衣原体原体数在10个以上时,结果判断为阳性。本试验的敏感性和特异性可分别达到80%^-95%。
(一)标本的类型:1.涂片和印片:血液、细菌培养物、脑脊液、体腔渗出液和细胞悬液等均可简单地涂抹在玻片上,干燥固定后就可用于荧光抗体染色。脑脊液、脏器(肝、脾、淋巴结等)、细菌菌落或尸体病变组织可把新鲜切面压印于玻片上做成印片,经固定后再染色。2.组织切片:最常用。包括:①冷冻切片: