3种宠物龟“灰白甲”病组织病理学研究

鲍晓颖1,庞溦1,潘连德1、2*,张晓雨1

(1.上海海洋大学省部共建水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室,水产科学国家级实验教学示范中心,上海201306;2.上海海洋大学国家水生动物病原库,上海201306)

摘要:为研究宠物龟“灰白甲”病的临床症状、病理变化等,对巴西龟Trachemysscriptaelegans、中华草龟Mauremysreevesii和黄头侧颈龟Podocnemiscayennensis3种水生宠物龟的6个病例,进行了肉眼观察及暗室伍德灯下观察等临床诊断,制作石蜡切片、H.E染色、Masson三色染色及Perlsblue染色等组织病理学观察。结果表明:患“灰白甲”病龟临床症状主要表现为在干露状态下肉眼观察到龟的背甲或腹甲有灰白色斑块,严重病龟整个龟甲呈灰白色等,用伍德灯照射有荧光现象;组织病理学观察显示,背甲病变处出现角蛋白纤维的坏死和碎裂,骨髓腔和脾组织大量嗜酸性粒细胞浸润,各组织大量黑色素沉积等。研究表明,对宠物龟龟甲人工打孔创伤,建立牙科树脂(甲基丙烯酸甲酯)密封修复,结合肌肉注射庆大霉素等抗生素的方法,可治疗甲壳疾病及其创伤。

关键词:巴西龟;中华草龟;黄头侧颈龟;“灰白甲”病;病理学诊断

龟类作为观赏宠物历史悠久,饲养的宠物龟患有“灰白甲”病症较为常见,虽然病龟活动及摄食基本正常,但因病因和病理不清,目前尚无根治办法,病龟背甲或腹甲的灰白色病变严重时就会危及生命,且降低了宠物龟的观赏价值,一些名贵品种还会因此造成严重的经济损失。

2017年9月,收集家庭饲养的具有灰白甲症状的各种宠物龟若干只于上海海洋大学大学水族宠物医学实验室,从中选择症状典型的2只巴西龟(1号,背甲长为7.7cm,体质量为0.09kg,雌性;2号,背甲长为9.7cm,体质量为0.15kg,雄性),2只中华草龟(3号,背甲长为6cm,体质量为0.048kg,雄性;4号,背甲长为15cm,体质量为0.626kg,雌性),2只黄头侧颈龟(5号,背甲长为14cm,体质量为0.402kg,雌性;6号,背甲长为13.2cm,体质量为0.346kg,雌性)。集中饲养在长×宽为120cm×40cm、深度为8~10cm的带有过滤装置的室内龟缸中,稳定水温为27~29℃,用龟粮(Hikari)和鲜虾肉饲喂。正式试验时禁食。试验龟编号(1~6号)通过留下与托盘上数字代码的合照影像识别,并进行临床体检以确定性别和健康状况,排除患有其他疾病的试验龟。将其中3只龟(1号、4号、5号)作为组织病理试验用龟,将另外3只龟(2号、3号、6号)作为活体龟背甲采样试验用龟。

1.2.13种病龟的临床症状与病理解剖观察试验开始时评估每只病龟背甲和腹甲病变的范围,通过肉眼观察和暗室伍德灯(七外光品牌,008号,5颗灯珠)下观察,加以验证,取巴西龟1号、中华草龟4号和黄头侧颈龟5号进行临床症状观察和病理解剖,记录龟体表和脏器的病理变化,以确定病变部位或器官。试验龟干露湿身和干身状态时,分别采集图片,做出3种病龟临床症状和病理解剖特征描述和诊断。

1.2.23种病龟组织病理制片和观察将巴西龟1号、中华草龟4号、黄头侧颈龟5号肌肉注射舒泰25mg/kg进行麻醉[13],用冲击电钻(欧莱德)进行直径1cm的龟甲全厚度取样,在EDTA脱钙液中脱钙20d。取龟甲样品后解剖,取病龟的心、肝、脾、肺、肾、肠道和胰腺等重要脏器,切成约5mm组织块,置于10%中性甲醛中固定24h后,冲水5h。用体积分数为50%~100%的乙醇溶液对试验龟甲和组织块逐级脱水,透明。于56~58℃下用石蜡包埋,切片厚度为5~7μm,并于60℃下烘片1h,用Masson三色法和Perlsblue法对试验龟甲染色,用H.E法对试验龟甲及其重要脏器组织染色,中性树胶封片,于徕卡DM3000显微镜下观察、拍照。

1.2.3活体龟背甲可恢复采样方法将巴西龟2号、中华草龟3号、黄头侧颈龟6号肌肉注射舒泰25mg/kg进行麻醉[13],在病龟背甲病灶确定采样位置,用酒精消毒,使用冲击电钻(欧莱德)环形直径1cm的钻头,进行龟甲全厚度取样(图1-A)。取得样品后的创伤空洞,用牙科树脂(靓雅)密封[3,9,14],用0.9%无菌生理盐水冲洗,将EDTA溶液涂抹创面,涂上酸蚀剂(杭州西湖巴尔)15s后用生理盐水清洗,再将黏结剂(杭州西湖巴尔)涂抹于整个洞壁(图1-B),直接涂抹第二层黏结剂,15s后轻吹约2s,用标准光固化灯(靓雅)光照20s使牙科树脂固化,进行空洞填充(图1-C)。采样完毕的试验龟干养24h后,将其移至室内龟缸中,后腿基部肌肉注射硫酸庆大霉素注射液(山西省芮城科龙兽药),剂量为40mg/kg体质量,每隔24h注射一次,共注射7次。

2.1.13种病龟的临床症状及其比较3种病龟患病后活动、摄食情况未见异常,除背腹面甲壳表面产生部分或全部“灰白甲”病变的临床症状外,体表、四肢和头颈均未见其他异常(图2)。3种病龟早期症状为背甲上出现零星灰白色点状病灶,随着病情的发展,背甲零星白点病灶连成大的白斑病灶(图2-B),继续发展背甲小部分或一半(图2-C)变成灰白色病灶,最终达到整个背甲或腹甲形成灰白色病灶(图2-A)。背甲灰白色病灶质地粗糙,角质片易剥落(图2-A)。在黑暗环境中,用伍德灯照射3种病龟背部和腹部,灰白色病灶产生明显的荧光现象(图3),未病变部分未出现荧光现象(图3-C),巴西龟(图3-A)和黄头侧颈龟(图3-C)的甲片接缝间(生长纹)都未产生病变,而中华草龟病变明显(图3-B)。伍德灯检验与肉眼观察一致且更加清晰准确,适合临床检查诊断。3种病龟的背甲皆比腹甲病变早且更为明显。

2.1.23种病龟的病理解剖特征及其比较临床解剖观察可见,1号和4号病龟脂肪块呈黑色(图4-A、B),4号和5号病龟肝呈黑褐色颜色异常、体积肿大(图4-B、C、E、F),1号病龟肝呈黄褐色颜色异常(图4-A、D),4号病龟肝脏上有白色结节、脾肿大(图4-E),其他器官未见明显异常。

2.2.13种病龟背甲全厚度横切面的基本结构龟背甲由角质层、密质层和松质层构成(图5-A、D),Masson三色染色的2号巴西(图5-A)、3号中华草龟(图5-B)和6号黄头侧颈龟(图5-C)背甲分层比H.E染色(图5-D、E、F)更清晰。可见,水生龟类的背甲结构独特,由外向内分别为角质层、表皮层、真皮层、骨髓腔、骨小梁、骨内膜、骨外膜等层状结构(图5-B、E、C、F)。

注:A使用冲击钻进行病变处背甲的全厚度采样;B使用牙科树脂进行空洞填充封闭;C使用标准光固化灯固化填充牙科树脂

Note:A,afullthicknessshellbiopsysampledfromthedorsalcarapacelesionareawithatrephine;B,thecavityiscoveredandsealedwithmethylmethacrylate;C,polymerizationofthemethylmethacrylatewasperformedwithawirelesscuringlightof1000nmwavelength

图1麻醉后对2号巴西龟背甲采样及封闭操作

Fig.1SamplingandsealingoperationofdorsalcarapaceofsampleNo.2turtleTrachemysscriptaelegansafteranesthesia

注:A为1号巴西龟背甲,小图示灰白色病灶剥落区域(←);B为4号中华草龟背甲;C为5号黄头侧颈龟背甲,小图示灰白甲与未病变区域(←);D为1号巴西龟腹甲;E为4号中华草龟腹甲;F为5号黄头侧颈龟腹甲

Note:A,thedorsalcarapaceofthesampleNo.1Trachemysscriptaelegans,insertshowsareapeeledoffingray-whitelesion(←);B,thedorsalcarapaceofthesampleNo.4Mauremysreevesii;C,thedorsalcarapaceofthesampleNo.5Podocnemiscayennensis,insertshowsthejunctionofthegray-whitelesionareaandthenon-lesionarea(←);D,theventralplastronofthesampleNo.1Trachemysscriptaelegans;E,theventralplastronofthesampleNo.4Mauremysreevesii;F,theventralplastronofthesampleNo.5Podocnemiscayennensis

图23种病龟背腹甲在自然光下的“灰白甲”临床症状

Fig.2Clinicalsymptomsofdorsalcarapaceandventralplastroninthreemorbidturtlesindaylight

注:A为1号巴西龟背甲,小图示未产生荧光现象甲片接缝间新生长角蛋白(←);B为4号中华草龟背甲;C为5号黄头侧颈龟背甲,小图示灰白甲与未病变区域(←);D为1号巴西龟腹甲;E为4号中华草龟腹甲;F为5号黄头侧颈龟腹甲

Note:A,thedorsalcarapaceofthesampleNo.1Trachemysscriptaelegans,insertshowsnewgrowthkeratinbetweenseamsofscutesthatdonotproducefluorescence(←);B,thedorsalcarapaceofthesampleNo.4Mauremysreevesii;C,thedorsalcarapaceofthesampleNo.5Podocnemiscayennensis,insertshowsthejunctionofthegray-whitelesionareaandthenon-lesionarea(←);D,theventralplastronofthesampleNo.1Trachemysscriptaelegans;E,theventralplastronofthesampleNo.4Mauremysreevesii;F,theventralplastronofthesampleNo.5Podocnemiscayennensis

图33种病龟背腹甲在伍德灯下的荧光现象

Fig.3ClinicalsymptomsofdorsalcarapaceandventralplastroninthreemorbidturtlesundertheWoodlamp

2.2.23种病龟背甲全厚度横切面病理变化病龟背甲全厚度横切面角质层的胶原纤维结构稀疏、变形、坏死碎裂和脱落,在2号巴西龟(图6-A)、3号中华草龟(图6-B)、6号黄头侧颈龟(图6-C)中均有表现,其中,2号巴西龟(图6-D)、3号中华草龟(图6-E)和6号黄头侧颈龟(图6-F)背甲各层中均分布大量黑色素,为“灰白甲”症状提供了组织病理佐证。背甲松质骨层骨髓腔浸润大量的嗜酸性粒细胞及大量黑色素沉积(图6-G、H、I),松质骨层骨髓腔浸润的嗜酸性粒细胞明显(图6-J、K、L),为灰白甲症状提供了组织炎症的病理佐证。

注:A为1号巴西龟,异常脂肪块(←);B为4号中华草龟,异常脂肪块(↑);C为5号黄头侧颈龟;D为1号巴西龟的内脏团,HE为心,LI为肝,PA为胰腺,LU为肺,SP为脾,KI为肾,IN为肠道;E为4号中华草龟的内脏团,脾脏红肿(△),肝呈黄褐色颜色异常(▲);F为5号黄头侧颈龟的内脏团,肝呈黄褐色颜色异常(▲)

Note:A,thesampleNo.1Trachemysscriptaelegans,denaturedfat(←);B,thesampleNo.4Mauremysreevesii,denaturedfat(↑);C,thesampleNo.5Podocnemiscayennensis;D,internalorgansfromthesampleNo.1Trachemysscriptaelegans;HE,heart;LI,liver;PA,pancreas;LU,lung;SP,spleen;KI,kidney;IN,intestine;E,internalorgansfromthesampleNo.4Mauremysreevesii,thespleenisredandswollen(△),withyellow-browncolorabnormalliver(▲);F,internalorgansfromthesampleNo.5Podocnemiscayennensi,withyellow-browncolorabnormalliver(▲)

图43种病龟的内脏器官病理解剖特征

Fig.4Pathologicalanatomicalfeaturesofinternalorgansofthreemorbidturtles

注:A、B、C分别为2号巴西龟、3号中华草龟和6号黄头侧颈龟,Masson三色染色;D、E、F分别为2号巴西龟、3号中华草龟和6号黄头侧颈龟,H.E染色。CU为角质层;COB为密质骨层;CAB为松质骨层;EP为表皮层;DE为真皮层;BM为骨外膜;MS为骨髓腔;TB为骨小梁;EN为骨内膜

Note:A,BandC,thesampleNo.2Trachemysscriptaelegans,No.3Mauremysreevesii,andNo.6Podocnemiscayennensis,Massonstain,respectively;D,EandF,thesampleNo.2Trachemysscriptaelegans,No.3Mauremysreevesii,andNo.6Podocnemiscayennensis,H.Estain,respectively.CU,cuticle;COB,compactbone;CAB,cancellousbone;EP,epidermis;DE,dermis;BM,bonemembrane;MS,marrowspace;TB,trabecularbone;EN,endosteal

图53种病龟病变处背甲全厚度横切面的基本结构

Fig.5Physiologicalstructureofthefullthicknessofdorsalcarapacelesionontransversalsectioninthreemorbidturtles

注:A、B、C分别为2号巴西龟、3号中华草龟和6号黄头侧颈龟碎裂的角蛋白纤维(←)表皮层、真皮层和密质骨层;D、E、F分别为2号巴西龟、3号中华草龟和6号黄头侧颈龟角质层;G、H、I分别为2号巴西龟、3号中华草龟和6号黄头侧颈龟松质骨层;J、K、L分别为2号巴西龟、3号中华草龟和6号黄头侧颈龟松质骨层骨髓腔;△示嗜酸性粒细胞;▲示黑色素

Note:A,BandC,thesampleNo.2Trachemysscriptaelegans,No.3Mauremysreevesii,andNo.6Podocnemiscayennensis,showingepidermal,dermisanddensebonelayersofbrokenfibrillarkeratin(←),respectively;D,EandF,cuticleofthesampleNo.2Trachemysscriptaelegans,No.3Mauremysreevesii,andNo.6Podocnemiscayennensis;G,HandI,cancellousboneofthesampleNo.2Trachemysscriptaelegans,No.3Mauremysreevesii,andNo.6Podocnemiscayennensis,respectively;J,KandL,thesampleNo.2Trachemysscriptaelegans,No.3Mauremysreevesii,andNo.6Podocnemiscayennensis,showingcancellousboneofmarrowspace,respectively;△,eosinophils;▲,melanin

图63种病龟背甲全厚度横切面的病理变化(H.E染色)

Fig.6Pathologicalchangesonthefullthicknesstransversesectionofdorsalcarapacelesioninthreemorbidturtles(H.Estain)

2.2.33种病龟背甲全厚度纵切面H.E染色病理结果3种病龟背甲松质骨层骨髓腔浸润存在大量的嗜酸性粒细胞及黑色素沉积(图7-A、B、C)。背甲表皮层、真皮层和密质骨层中存在黑色素,6号黄头侧颈龟分布最多(图7-I),其次是2号巴西龟(图7-D、G)和3号中华草龟(图7-H、K)。

2.2.43种病龟背甲全厚度纵切面Perlsblue染色结果2号巴西龟松质骨层骨髓腔中存在大量黑色素细胞(图7-J),3号中华草龟真皮层中存在大量黑色素细胞(图7-K),6号黄头侧颈龟松质骨层骨髓腔中也存在大量黑色素细胞(图7-L),但均未见含铁血黄素。

注:A、B分别为2号巴西龟、3号中华草龟松质骨层,H.E染色;C为6号黄头侧颈龟密质层和松质骨层交汇处破骨细胞(←),H.E染色;D、E分别为2号巴西龟、3号中华草龟松质骨层骨髓腔,H.E染色;F为6号黄头侧颈龟密质层和松质骨层交汇处骨髓腔,H.E染色;G、H、I分别为2号巴西龟、3号中华草龟和6号黄头侧颈龟真皮层,H.E染色;J为2号巴西龟松质骨层骨髓腔,Perlsblue染色;K为3号中华草龟真皮层,Perlsblue染色;L为6号黄头侧颈龟松质骨层骨髓腔,Perlsblue染色;△示嗜酸性粒细胞;▲示黑色素

Note:AandB,cancellousboneofthesampleNo.2TrachemysscriptaelegansandNo.3Mauremysreevesii,H.Estain,respectively;C,osteoclastsatconnectionofdenselayerandcancellousbonelayerofthesampleNo.6Podocnemiscayennensis(←),H.Estain;DandE,thesampleNo.2TrachemysscriptaelegansandNo.3Mauremysreevesii,showingcancellousboneofmarrowspaceinatconnectionofdenselayerandcancellousbonelayer,H.Estain,respectively;F,thesampleNo.6Podocnemiscayennensis,showingthemarrowspaces,H.Estain;G,HandI,dermisofthesampleNo.2Trachemysscriptaelegans,No.3Mauremysreevesii,andNo.6Podocnemiscayennensis,H.Estain;J,dermisofthesampleNo.2Trachemysscriptaelegans,showingcancellousboneofmarrowspace,Perlsbluestain;K,dermisofthesampleNo.3Mauremysreevesii,Perlsbluestain;L,thesampleNo.6Podocnemiscayennensis,showingthecancellousboneofmarrowspace,Perlsbluestain;△,eosinophils;▲,melanin

图73种病龟背甲全厚度纵切面的病理变化(H.E染色和Perlsblue染色)

Fig.7Pathologicalchangesonthefullthicknesslongitudinalsectionofdorsalcarapacelesioninthreemorbidturtles(H.EstainandPerlsbluestain)

3种病龟的脾组织都出现了嗜酸性粒细胞浸润的明显炎症(图8-A、B、C)。1号巴西龟的胰腺出现管壁增厚病变(图8-D),其他无异常(图8-E、F)。1号巴西龟的肾组织出现颗粒变性(图8-G),4号中华草龟的肾小管空泡化(图8-H),5号黄头侧颈龟肾小管扩张病变,局部有嗜酸性粒细胞浸润(图8-I)。3种病龟的肝组织都出现了大量黑色素(图8-J、L),4号中华草龟的肝组织出现肉芽肿和嗜酸性粒细胞浸润(图8-K)。3种病龟的心、肺、肠组织组织结构一致,均未见异常。

注:A、B、C分别为1号巴西龟、4号中华草龟和5号黄头侧颈龟脾组织炎症病灶(←↑),小图示浸润的嗜酸性粒细胞;D、E、F分别为1号巴西龟、4号中华草龟和5号黄头侧颈龟胰腺组织,管壁增厚(△);G为1号巴西龟肾脏组织;H为4号中华草龟坏死肾脏组织,空泡化肾小管(>);I为5号黄头侧颈龟肾脏组织局部炎症病灶(←),肾小管扩张病灶(▲),小图示浸润的嗜酸性粒细胞;J为1号巴西龟肝小叶;K为4号中华草龟肝组织肉芽肿(←),小图示浸润的嗜酸性粒细胞;L为5号黄头侧颈龟肝组织(肝小叶)

Note:A,BandC,theinflammatorylesionofthespleenofsampleNo.1Trachemysscriptaelegans,No.4Mauremysreevesii,andNo.5Podocnemiscayennensis(←↑),insertshowinginfiltratingeosinophils,respectively;D,EandF,thepancreasofthesampleNo.1Trachemysscriptaelegans,No.4Mauremysreevesii,andNo.5Podocnemiscayennensis,showingwallthickening(△),respectively;G,therenaltissueofthesampleNo.1Trachemysscriptaelegans;H,thenecrosisrenaltissueandvacuolizationtubularofthesampleNo.4Mauremysreevesii(>);I,thelocalinflammatorylesionsinrenaltissueofthesampleNo.5Podocnemiscayennensis(←),showingrenaltubulardilatation(▲),insertshowinginfiltratingeosinophils;J,theliverlobuleofthesampleNo.1Trachemysscriptaelegans;K,thelivertissuegranulomalesionsinflammationofthesampleNo.4Mauremysreevesii,insertshowinginfiltratingeosinophils(←);L,theliverlobuleofthesampleNo.5Podocnemiscayennensis

图83种病龟脾、胰腺、肾、肝、心脏、肺、肠道组织病理变化(H.E染色)

Fig.8Pathologicalchangesofspleen,pancreas,kidney,liver,heart,lungandintestineofthreemorbidturtles(H.Estain)

2号巴西龟、3号中华草龟、6号黄头侧颈龟用冲击钻取样后的创口处置和结果相同,如2号巴西龟的创口(图9-A),经牙科树脂封闭(图9-B)和后腿基部肌肉注射硫酸庆大霉素治疗后,历经两个月恢复期,试验龟背甲创口长出新生组织且完全愈合(图9-C),封闭物脱落。3只病龟创口均康复,摄食和活动均正常。

注:A为用冲击钻取样后的创口;B为用牙科树脂封闭后的创口;C为创口长出新生组织愈合完整

Note:A,woundaftersamplingwithtrephine;B,woundiscoveredandsealedusingmethylmethacrylate;C,healingintactfromdevelopmentofnewtissues

图92号巴西龟背甲采样后康复

Fig.9RestoreofthedorsalcarapaceofthesampleNo.2Trachemysscriptaelegansexposedtosampling

水生宠物龟“灰白甲”病的病例十分常见,在干露状态下肉眼观察到龟的背甲或腹甲有灰白色斑块,或整个龟甲灰白色明显而一致的临床症状,再用伍德灯照射有荧光现象,可以做出初步诊断。依据“灰白甲”病的宠龟背甲病变处出现角蛋白纤维的坏死和碎裂,以及骨髓腔内和脾组织出现嗜酸性粒细胞浸润等组织病理特征,就可以做出准确诊断。

由此可见,病龟龟甲呈灰白色为角蛋白纤维的坏死和碎裂造成的表面粗糙。观察比较干露湿身和干身状态下灰白甲症状,干露干身状态比湿身状态灰白色更为明显,亦可佐证这一点,故临床症状结果全部采用干露干身图片。

患“灰白甲”病的3种水生宠物龟的临床症状和甲壳病理变化与美国加利福尼亚州的莫哈韦沙漠、科罗拉多沙漠中的沙漠陆龟的甲壳角化不良症[4],以及美国德克萨斯州南部的德州地鼠龟的甲壳镰刀菌感染症[10]相似,因上述文献缺乏器官组织病理研究结果,而无法比较。“灰白甲”病与巴西龟[1-2]、火焰龟[1]、甜甜圈龟[2]、地图龟[3]的壳病,黄喉拟水龟的腐壳病[5]与体表溃疡[6],平背麝香龟[7]及亚达伯拉龟中拟青霉引起的肥厚菌病[8],真空辅助闭合治疗乌龟深部脓肿和骨髓炎[9],以及加拉帕戈斯龟甲壳病[10]的临床症状和组织病理特征不同。内脏组织嗜酸性粒细胞浸润的组织病理特征在养殖菱斑龟代谢性肝病[15]和中华草龟恩诺沙星中毒症[16]中均有提到。脾是龟重要的免疫器官,脾中不正常的高嗜酸性粒细胞数量与寄生虫感染(如原生动物、蠕虫)或其他的抗原刺激有关[17]。

本研究中还采集了患“灰白甲”病的巴西龟、中华草龟、黄头侧颈龟的病灶组织和附着物,制作水浸片、棉兰染色、碘酊染色,光学显微镜检查均未发现致病性藻类、寄生虫、真菌等病原;病灶分离了若干优势菌株,以继续进行病原学研究。养殖环境(水硬度、pH和水质指标的变化)及其微生物也可能是发病原因。该病的病原(病因)有待进一步研究。

伍德灯是人类和宠物皮肤科临床检查的一种辅助诊断工具[18],本研究中用于宠物龟“灰白甲”病的临床检验能够实现无创、简便、快速、准确的临床效果,并弥补肉眼难以确定的宠物龟“灰白甲”病症状及其他一些皮肤病。

3种龟龟甲皆由骨质板及覆盖于骨质板外的角质盾所构成[19],龟壳骨质板与动物骨骼结构相似,分为密质层和松质层两部分[20-21]。宠物龟使用冲击电钻进行的龟甲全厚度取样,取得样品后的创伤空洞,用牙科树脂(甲基丙烯酸甲酯)密封,这种活体龟背甲可恢复采样方法非常适用,可用于甲壳疾病和创伤的临床治疗[3,9,14]。

本试验中的巴西龟、中华草龟、黄头侧颈龟等3种水生宠物龟6只患“灰白甲”病的病龟,具有共同临床症状和组织病理特征,3种龟脾、肾组织和背甲骨髓腔均浸润大量嗜酸性粒细胞炎症及呈现大量黑色素沉积的特征,说明3种龟患“灰白甲”病的病因和病理机制相同。“灰白甲”病的发展慢、病程长,逐渐蔓延到整个背甲和腹甲后,降低或失去了宠物龟的观赏价值,从病龟重要组织的大量嗜酸性粒细胞浸润和黑色素沉积的病理结果也揭示了对龟的健康危害。

参考文献:

[1]GarnerMM,HerringtonR,HowerthEW,etal.Shelldiseaseinrivercooters(Pseudemysconcinna)andyellow-belliedturtles(Trachemysscripta)inaGeorgia(USA)lake[J].JournalofWildlifeDiseases,1997,33(1):78-86.

[2]LovichJE,GotteSW,ErnstCH,etal.PrevalenceandhistopathologyofshelldiseaseinturtlesfromLakeBlackshear,Georgia[J].JournalofWildlifeDiseases,1996,32(2):259-265.

[3]Hernandez-DiversSJ,HenselP,GladdenJ,etal.Investigationofshelldiseaseinmapturtles(Graptemysspp.)[J].JournalofWildlifeDiseases,2009,45(3):637-652.

[4]HomerBL,BerryKH,RownMB,etal.PathologyofdiseasesinwilddeserttortoisesfromCalifornia[J].JournalofWildlifeDiseases,1998,34(3):508-523.

[5]何成伟,江其杏,宋旭权,等.黄喉拟水龟“腐壳病”的病原分离与鉴定[J].广西畜牧兽医,2006,22(4):167-168.

[6]谭爱萍,邹为民,姜兰,等.黄喉拟水龟体表溃疡病原菌SG24的分类鉴定[J].广东海洋大学学报,2007,27(3):64-68.

[7]DoddJrCK.DiseaseandpopulationdeclinesintheflattenedmuskturtleSternotherusdepressus[J].TheAmericanMidlandNaturalist,1988,119(2):394-401.

[8]HeardDJ,CantorGH,JacobsonER,etal.HyalohyphomycosiscausedbyPaecilomyceslilacinusinanAldabratortoise[J].JournaloftheAmericanVeterinaryMedicalAssociation,1986,189(9):1143-1145.

[9]AdkessonMJ,TravisEK,WeberMA,etal.Vacuum-assistedclosurefortreatmentofadeepshellabscessandosteomyelitisinatortoise[J].JournaloftheAmericanVeterinaryMedicalAssociation,2007,231(8):1249-1254.

[10]SuttonDA,MarínY,ThompsonEH,etal.Isolationandcharacterizationofanewfungalgenusandspecies,Aphanoascellagalapagosensis,fromcarapacekeratitisofaGalapagostortoise(Chelonoidisnigramicrophyes)[J].MedicalMycology,2013,51(2):113-120.

[11]RoseFL,KokeJ,KoehnR,etal.IdentificationoftheetiologicalagentfornecrotizingscutediseaseintheTexastortoise[J].JournalofWildlifeDiseases,2001,37(2):223-228.

[12]白杰,周美红,胡秀彩,等.龟源弗氏柠檬酸杆菌的分离鉴定及药敏特性研究[J].大连海洋大学学报,2019,34(6):798-803.

[13]马艳,潘连德,徐建平,等.唑拉西泮和替来他明对中华草龟的麻醉效果及药物代谢动力学[J].水产学报,2019,43(5):1397-1406.

[14]SpadolaF,MoriciM.Treatmentofturtleshellulcerationsusingphotopolymerizablenano-hybriddentalcomposite[J].JournalofExoticPetMedicine,2016,25(4):288-294.

[15]雷洁,王伟喆,潘连德.养殖菱斑龟肝病组织病理研究[J].上海海洋大学学报,2012,21(6):989-995.

[16]章宇思,潘连德,洪滨.连续肌注恩诺沙星对中华草龟的急性和慢性毒理研究[J].大连海洋大学学报,2017,32(6):643-650.

[17]MeadKF,BorysenkoM.Surfaceimmunoglobulinongranularandagranularleukocytesinthethymusandspleenofthesnappingturtle,Chelydraserpentina[J].Developmental&ComparativeImmunology,1984,8(1):109-120.

[18]吕婷,王博,王宏伟.伍德灯在色素性和感染性皮肤病的应用[J].皮肤科学通报,2018,35(2):210-215.

[19]罗默AS,帕尔森TS.脊椎动物身体[M].杨白仑,译.北京:科学出版社,1985:120-122.

[20]谷翠云.巴西龟壳结构与性能[D].长春:吉林大学,2009.

[21]BalaniK,PatelRR,KeshriAK,etal.Multi-scalehierarchyofChelydraserpentina:microstructureandmechanicalpropertiesofturtleshell[J].JournaloftheMechanicalBehaviorofBiomedicalMaterials,2011,4(7):1440-1451.

BAOXiaoying1,PANGWei1,PANLiande1,2*,ZHANGXiaoyu1

(1.KeyLaboratoryofExplorationandUtilizationofAquaticGeneticResources,MinistryofEducation,NationalDemonstrationCenterforExperimentalFisheriesScienceEducation,ShanghaiOceanUniversity,Shanghai201306,China;2.NationalPathogenLibraryofAquaticAnimals,ShanghaiOceanUniversity,Shanghai201306,China)

Keywords:Trachemysscriptaelegans;Mauremysreevesii;Podocnemiscayennensis;‘grey-whiteclinicalsymptomofthecarapace’disease;pathologicaldiagnosis

中图分类号:S947.9

文献标志码:A

收稿日期:2019-03-19

基金项目:上海海洋大学水产动物遗传育种协同创新中心(ZF1206)

作者简介:鲍晓颖(1993—),女,硕士研究生。E-mail:1327142910@qq.com

通信作者:潘连德(1960—),男,教授。E-mail:156887886@qq.com

THE END
1.饲养小乌龟的正确办法—多美宠物幼龟如果钙质摄取不足,龟壳容易变得柔软不堪;维生素 a摄取不足,眼睛可能变白。当出现上述现象时,除了维生素 a与钙质不足的问题外,可能还牵涉到长期喂食低营养的食物,紫外线不足等问题,可能是在饲养方法上出现错误。必须用心提供营养均衡的食物,利用太阳灯施行日光浴等,彻底改变饲养环境。(图片来源:)...https://www.dm97.com/hotcw/article/12308.html
2.乌龟的饲养方式及注意事项养殖乌龟,宠主需要了解的知识有很多,如乌龟的养殖环境、饲养用水的水质及水位、喂食方法、乌龟常见疾病预防方法等,以上都是养殖乌龟需要了解的知识。今天氧宠博士就主要为你介绍一下乌龟的饲养方式及注意事项。 一、乌龟的养殖方法概括 1、养殖环境方面 不管是在水箱亦或是水池中养殖乌龟,均需要保持乌龟的饲养环境干净...https://www.isdpp.com/xq-11045.html
3.极品宠物龟的饲养方案,你梳理好了吗?龟极品宠物龟的饲养方案,你梳理好了吗? 极品是什么意思?一开始指的是最高的官位,又来就引申为最好的或者最高级别的物品了。我们平时在饲养龟的过程中,从和龟友的交流中,还是从龟的描述中,我们都可以看到“极品”一词。也就是说这个龟的品相是非常完美 ......https://www.pachongapp.com/article-5095-1.html
4.个人如何合法饲养黄缘闭壳龟做宠物答复内容:您好,如果用于宠物饲养从合法养殖场合法流程入手人工繁育的黄缘闭壳龟,根据相关法律条款规定,是不违法的,但要有购买企业所开具的活体销售合同,该企业必须具备合法繁育和经营利用黄缘闭壳龟的资质。因为虽然作为宠物饲养黄缘闭壳龟不犯法,但是黄缘闭壳龟是不允许私自繁育和出售的,所以购买的时候也需要有活体销售的...https://agri.hunan.gov.cn/agri/zxts/cjwt/202211/t20221102_29113993.html
1.家有宠物之宠物乌龟的饲养方法详细介绍:1.乌龟的饲料及喂食家有宠物之宠物乌龟的饲养方法详细介绍 人工饲养乌龟有池养、缸养、木盆养和水库池塘养等多种方式,各有利弊,可以因地制宜地自行选择。对一般专业户和小规模的养殖场,以建池养殖较好,因为此方式管理方便,经济效益也较大。 养殖池的建造:幼龟池和繁殖池可参照金钱龟的幼龟池和繁殖池的规格和方法建造。成龟池的...https://info.xcar.com.cn/200802/news_25879_1.html
2.宠物龟正确饲养方法(怎样让你的龟龟降成长)最近很多玩家可能都在关注宠物龟正确饲养方法(怎样让你的龟龟健康成长)相关的话题,作为一个资深的游戏攻略相关人员,今天就给大家详细地讲解和介绍一下宠物龟正确饲养方法(怎样让你的龟龟健康成长)。 宠物龟是一种非常可爱的小动物,它们经常被人们当作宠物饲养。但是,要想让你的宠物龟健康成长,你需要了解一些正确的...https://www.58gui.com/cwgbk/12644.html
3.各类宠物乌龟的饲养方法.pdf宠物各类宠物乌龟的饲养方法.pdf 18页内容提供方:LF20190802 大小:900.6 KB 字数:约2.18千字 发布时间:2020-05-12发布于中国 浏览人气:85 下载次数:仅上传者可见 收藏次数:0 需要金币:*** 金币 (10金币=人民币1元)各类宠物乌龟的饲养方法.pdf 关闭预览 想预览更多内容,点击免费在线预览全文 免费...https://max.book118.com/html/2020/0511/6023152150002201.shtm
4.小乌龟的饲养方法8.加拉帕戈斯象龟的饲养方法 饲养乌龟的各种小知识 中华草龟也可特指乌龟 饲养乌龟其实很简单,但是想要养好乌龟还是要用心的,如果没有照顾好小龟,小龟也会生病导致死亡,其实,龟与很多动物一样,也有自己喜爱的食物、环境,只要主人可以掌握好,就可以养好小龟。 http://m.boqii.com/article/250009.html
5.家庭养乌龟怎么养(宠物龟饲养指南)三、饲养方法 1、容器:家里养龟首先要准备一个容器,可以用专业的饲养缸,也可以用盆,只要保证爬不出来即可,里面要设计成半边浅水、半边沙土,具体情况要根据龟的栖息环境来设定。 2、喂食:家里养龟要根据龟的摄食习性投喂食物,例如肉食性龟可投喂小鱼、小虾、肉类等,植食性龟可投喂蔬菜、瓜果、青草、嫩叶等,杂...https://www.hunzishuo.com/pcsy/2790.html
6.宠物巴西龟养殖技巧和方法(巴西龟饲养教程)宠物巴西龟的饲养技巧 _周志成 西班牙龟(学名:Trachemysscripta),又名巴西红耳龟、巴西彩龟,原产于美国和墨西哥。90年代,随着改革开放的深入,人民生活水平和餐饮需求不断提高,甲鱼消费市场逐渐扩大。常规散养甲鱼产量不能满足需求,不允许野生捕捞,于是南方甲鱼养殖业异军突起。巴西龟因为进口不限,繁殖容易的优势,在南...https://m.chongwuqu.com/a/93.html
7.家养巴西龟的养殖方法和注意事项,家里怎么养宠物巴西龟大家好,今天小编关注到一个比较有意思的话题,就是关于家里怎么养宠物巴西龟的问题,于是小编就整理了3个相关介绍家里怎么养宠物巴西龟的解答,让我们一起看看吧。 家养巴西龟的养殖方法和注意事项? 步骤1 饲养环境 想要养好巴西龟,一个好的环境尤为重要。为了让它能够活动,需要准备稍大的龟缸,这样它才会感到安心...https://www.jydogs.com/post/111486.html
8.小乌龟怎么养饲养方法以及注意事项小乌龟怎么养 饲养方法以及注意事项 简要回答 要选择合适的场所,最好用龟粮搭配鱼虾饲喂每天一次,适当晒太阳补钙,水温保持在25-28度;要投入时间和精力、创造良好的环境,且不能与其他宠物混养。这是非常可爱的宠物,小巧玲珑、活泼可爱深受孩子和成年人的喜爱,饲养不仅能让我们感受到宠物带来的乐趣,同时还能平衡心理状态...https://www.coozhi.com/kepu/shenghuobaike/199619.html
9.养小乌龟的方法和技巧农技学堂小乌龟可是一种非常可爱又容易养活的宠物。但想要小乌龟健康成长还需掌握几点关键的方法和技巧才行。那么具体是什么?下面一起来了解下吧。 1、饲养容器 选择一个适当大小的容器,如收纳箱、物流箱或鱼缸,确保容器经过消毒处理且内壁不粗糙,避免小乌龟逃出或受伤。 https://www.cnhnb.com/xt/article-125902.html
10.饲养小乌龟的技巧有哪些?小乌龟的生活习性分享!养殖知识7、防护措施:如果有其他宠物,如猫狗,要确保小乌龟的栖息环境免受干扰,避免它们被捕食或受惊。 结语:饲养小乌龟需要细心和耐心,了解它们的生活习性和提供适宜的环境对于保持它们的健康至关重要。通过正确的饲养方法,您将能够欣赏到小乌龟的可爱和独特之处,与它们一同度过愉快的时光。https://www.tuliu.com/read-144483.html
11.乌龟怎么养养龟有方小乌龟怎么饲养喂食→MAIGOO知识【乌龟怎么养 】养龟有方 小乌龟怎么饲养喂食 摘要:想要自己养的乌龟健康又长寿,一定要仔细了解乌龟的习性,根据乌龟的生长特点,运用恰当的饲料和正确的喂食方法,以及做好一般的疾病预防措施。另外,众所周知,乌龟有夏眠跟冬眠的生理习性。在这两个敏感时期,一定要做好采取适当的照料方法。只有这样三管齐下,悉心照料...https://m.maigoo.com/goomai/181673.html
12.冬天饲养乌龟的方法冬天怎么养乌龟,对于养乌龟的人来说,冬天是最需要饲养者关心的时候,大家别看冬天好像乌龟都进入了冬眠期,看起来没有什么事情一样,但实际上这个时候需要饲养者更加贴心的护理,这关系到乌龟能否顺利度过冬眠和健康成长的重要保障。下面是小编为大家收集的冬天饲养乌龟的方法,希望能够帮助到大家。 https://www.unjs.com/w/99583.html
13.河里的乌龟怎么养养龟注意事项 刚开始买回家的乌龟由于需要适应环境身体健康状态都会比较差一些,各种腐皮、腐甲都是正常的现象。不要因此就认为是水质不好而过于频繁的换水。这种养殖方法最重要的是日照,整理箱要放到通风向阳的地方。 宠物乌龟怎么养 想养一只宠物乌龟陪自己?其实大家知道宠物乌龟应该怎么养吗? https://www.ruiwen.com/w/175794.html
14.新手如何养乌龟新手如何养乌龟,许多新手选择宠物时,都会选择容易饲养的乌龟,下面我们就来看看怎么养龟吧! 新手如何养龟 1、笼子 水栖型的乌龟,可用水槽等能装水的容器来饲养。乌龟的实际体积比看起来大,运动量也很大,所以需要较大的笼子。 平均而言,边长60厘米的水槽仍然太小,最好利用装衣服的储物箱来饲养,龟需要阳光,建议放...https://www.wenshubang.com/xuexijihua/328112.html