本发明属于活性肽，具体涉及一种湖羊体内羊胎素多肽及其在免疫功能调节中的用途。
背景技术：
1、自古以来，胎盘以其药用价值为历代名医重视，并被视为中药珍品。与其它动物胎盘相比，羊胎盘与人胎盘的结构和成分最为相似，具有良好的营养价值。现代医学研究发现，羊胎盘中含有大量的表皮细胞生长因子、透明质酸刺激因子等生物活性因子，多种促进、改善组织新陈代谢的酶，17种氨基酸和14种矿物元素。而利用科学方法从羊胎盘中提取、纯化的活性物质，其主要成分为小分子多肽，具有提高机体免疫力、抗衰老、抗癌等作用，应用领域广泛。
2、近年来，在国内外又相继出现了动物胎盘水解液和胎盘浸提液二种新型羊胎盘生物制品，因其独特的效能，已引起人们的注目。由于化学法采用酸碱水解制备活性肽，对氨基酸会产生破坏作用，并且水解产物分子组成差异大、生产费用高。而酶法水解蛋白质的生产条件温和、安全性高、易于控制。因此本发明将水解液和浸提液相结合，既保留胎盘中的天然活性物质，又增加其多肽及氨基酸含量，在羊胎及羊胎盘生物制品开发研究中是一个新的突破。
技术实现思路
1、本发明的目的在于提供一种湖羊体内羊胎素多肽及其在免疫功能调节中的用途，该羊胎素多肽具有良好的除糖效果及脱色效果。
2、本发明为实现上述目的所采取的技术方案为：
3、一种湖羊体内羊胎素多肽的制备方法，包括：
4、步骤一、将原料清洗除杂；
5、步骤二、对原料进行粉碎及细胞破壁；
6、步骤三、浸提和酶解；
7、步骤四、大孔吸附树脂提纯，超滤，凝胶色谱分离，干燥，制得羊胎素多肽。
8、对本发明而言，上述凝胶包含改性葡聚糖凝胶；上述改性葡聚糖凝胶由改性葡聚糖制备获得。
9、对本发明而言，上述改性葡聚糖由2-嘧啶硫代乙酸改性葡聚糖制备获得。
10、具体地，上述湖羊体内羊胎素多肽的制备方法，包括以下步骤：
11、步骤一、将羊胚胎及羊胎盘进行清洗除杂，然后在-3℃至3℃粉碎至粒度350-400μm，然后置于-45℃至-50℃条件下2-3.5h；
12、步骤二、在-15℃至-20℃条件下进行超微粉碎，再进行细胞破壁处理至粒度达到1-5μm；
13、步骤三、在破壁处理后的羊胚胎及羊胎盘中加入蒸馏水，在35-40℃浸提2-5h，过滤，在沉淀中加入酶，43-48℃酶解2.5-3.5h，抽滤，将抽滤后的滤液与上述过滤后的滤液合并；
14、步骤四、采用去离子水洗脱层析柱将合并的滤液通过大孔吸附树脂，然后采用浓度为30-45wt%的乙醇水溶液为洗脱液洗脱处理；将洗脱液富集，然后进行浓缩，再采用超滤膜超滤处理；然后经过改性葡聚糖凝胶分离，以去离子水为洗脱液，洗脱速度为0.3-0.5ml/min，冷冻干燥，获得羊胎素多肽。
15、对本发明而言，上述步骤三中，破壁处理后的羊胚胎及羊胎盘与蒸馏水的质量体积比为：1g:5-10ml；沉淀与酶的质量比为：1:0.005-0.015。
16、对本发明而言，上述酶解过程中用到的酶包含胰蛋白酶或者中性蛋白酶中的至少一种。
17、本发明还公开了上述制备方法制得的羊胎素多肽在免疫功能调节中的用途。
18、本发明还公开了一种改性葡聚糖凝胶的制备方法，包括：
19、在改性葡聚糖中加入蒸馏水，在90-95℃搅拌3-5h，搅拌过程中保持改性葡聚糖与蒸馏水的比例不变，然后加入氯化钾，恒温继续搅拌25-40min，自然冷却，获得改性葡聚糖凝胶。
20、对本发明而言，上述改性葡聚糖与蒸馏水的质量体积比为：1g:3-6ml；改性葡聚糖与氯化钾的质量比为：1:1-2.3。
21、本发明将上述改性葡聚糖凝胶采用湿法装柱后再应用于步骤四中的分离操作。
22、本发明还公开了一种改性葡聚糖的制备方法，包括：将2-嘧啶硫代乙酸酰氯化处理，然后再与葡聚糖发生酯化反应，制备改性葡聚糖。
23、本发明提供了一种改性葡聚糖的制备方法，采用2-嘧啶硫代乙酸作为改性剂，制得的改性葡聚糖进行凝胶化，然后再将改性葡聚糖凝胶用于湖羊体内羊胎素多肽的制备过程，使制得的湖羊体内羊胎素多肽具有良好的除糖效果及脱色效果。
24、具体地，上述改性葡聚糖的制备方法，包括：
25、在三氯甲烷中加入2-嘧啶硫代乙酸（两者的质量体积比为：1g:100-150ml），然后缓慢加入浓度为0.03-0.04%（v/v）的氯化亚砜的三氯甲烷溶液，在55-65℃反应3.5-5h，旋蒸，获得2-嘧啶硫代乙酰氯；在二甲基亚砜中加入葡聚糖，然后加入三乙胺，在氮气氛围下，缓慢加入2-嘧啶硫代乙酰氯，在75-85℃反应6-8h，室温放置10-13h，三氯甲烷洗涤3-5次，乙醇洗涤3-5次，去离子水洗涤3-5次，干燥，获得改性葡聚糖。
26、对本发明而言，上述2-嘧啶硫代乙酸与氯化亚砜的质量体积比为：1g:4-6ml；葡聚糖与二甲基亚砜的质量体积比为：1g:150-220ml；葡聚糖与三乙胺的质量体积比为：1g:1.5-1.8ml；葡聚糖与2-嘧啶硫代乙酸的质量比为：1:2-3。
27、本发明还公开了上述制备方法制得的改性葡聚糖在制备湖羊体内羊胎素多肽中的用途。
28、本发明还公开了上述制备方法制得的改性葡聚糖在纯化过程中的用途。
29、本发明还提供了一种组合物，包含上述羊胎素多肽、蝙蝠蛾拟青霉菌粉和丙酸四氢糠醇酯。
30、本发明公开了一种组合物，将羊胎素多肽、蝙蝠蛾拟青霉菌粉和丙酸四氢糠醇酯混合复配使用，制得的组合物具有良好的免疫功能及抗辐射性能。
31、对本发明而言，上述组合物中，羊胎素多肽与蝙蝠蛾拟青霉菌粉的质量比为：1:0.1-0.5。
32、对本发明而言，上述组合物中，丙酸四氢糠醇酯用量为15-20g/吨。
33、本发明还公开了上述组合物在免疫功能调节中的用途。
34、本发明的有益效果包括：
35、本发明获得了一种湖羊体内羊胎素多肽及其在免疫功能调节中的用途，采用羊胚胎及羊胎盘为原料，除杂后进行超微粉碎及细胞破壁处理，然后进行浸提和酶解，大孔吸附树脂提纯，超滤，再采用2-嘧啶硫代乙酸改性制得的改性葡聚糖凝胶色谱分离，获得的羊胎素多肽具有良好的除糖效果及脱色效果；另外，本发明还将制得的羊胎素多肽与蝙蝠蛾拟青霉菌粉、丙酸四氢糠醇酯复配使用，获得的组合物具有良好的免疫功能及抗辐射性能。
36、因此，本发明提供了一种湖羊体内羊胎素多肽及其在免疫功能调节中的用途，该羊胎素多肽具有良好的除糖效果及脱色效果。
1.一种湖羊体内羊胎素多肽的制备方法，包括：
2.根据权利要求1所述的一种湖羊体内羊胎素多肽的制备方法，其特征在于：所述原料包含羊胚胎及羊胎盘。
3.根据权利要求1所述的一种湖羊体内羊胎素多肽的制备方法，其特征在于：所述酶解过程中用到的酶包含胰蛋白酶或者中性蛋白酶中的至少一种。
5.权利要求1中所述的改性葡聚糖的制备方法，包括：将2-嘧啶硫代乙酸酰氯化处理，然后再与葡聚糖发生酯化反应，制备改性葡聚糖。
6.根据权利要求5所述的改性葡聚糖的制备方法，其特征在于：所述葡聚糖与2-嘧啶硫代乙酸的质量比为：1:2-3。
7.权利要求5-6任一项所述制备方法制得的改性葡聚糖在制备湖羊体内羊胎素多肽中的用途。
8.权利要求5-6任一项所述制备方法制得的改性葡聚糖在纯化过程中的用途。
9.权利要求1-4任一项所述制备方法制得的羊胎素多肽在免疫功能调节中的用途。