华支睾吸虫成虫寄生于人或哺乳动物体内肝胆管,引起肝肿大、肝硬化、腹水、胆管癌甚至死亡,是一种严重危害人类健康的人畜共患病[1,2]。据估计,目前我国华支睾吸虫感染人数约为598万;中国是全球华支睾吸虫危害最严重的国家之一[3]。广西华支睾吸虫感染率、感染度居全国首位[3,4,5],主要分布在北纬24°以南。广西全州县位于北纬24°以北,为汉族地区,当地群众没有“食鱼生”习俗,既往人群调查华支睾吸虫感染率为0.00%,为华支睾吸虫病狭义非流行区[6];但全州县尚未开展过动物华支睾吸虫感染情况的调查。华支睾吸虫病是人畜共患疾病,其传染源除人外,还有以猫、狗、鼠为主的30余种肉食哺乳动物[2,5]。猫和狗活动性较大,易食用被华支睾吸虫囊蚴感染的生鱼虾而受感染,其粪便污染水源,进一步增加螺类、鱼类等中间宿主感染的机会,进而增加人感染华支睾吸虫的风险[7]。本研究旨在了解全州县市售猫、狗华支睾吸虫感染现状,进一步探明华支睾吸虫病狭义非流行区是否存在流行,为华支睾吸虫病综合防控提供依据。
1、材料和方法
1.1样本量计算
1.3虫体收集和处理
分别称量、记录猫、狗肝脏的重量,观察并记录肝脏表面黄染情况,胆管壁增厚、胆管扩张情况,分别解剖肝脏和胆囊收集虫体并记录。顺着胆管,在0.9%生理盐水中纵向依次剪开肝总管、次级胆管,不断挤压并洗涤直至上清液澄清,收集沉积物中可疑虫体。在显微镜下进行初步形态学鉴定、测量和分类[5],记录每只猫、狗个体肝脏、胆囊中虫体数量,统计虫体数量中位数。感染度按照每只猫、狗的华支睾吸虫体数量分为5个等级[8]:阴性(0条)、轻度(1~10条)、中度(11~50条)、重度(51~100条)、超重度(>100条)。
1.4分子生物学鉴定
用Qiagen公司组织基因DNA提取试剂盒提取不同形态虫体DNA。参照文献[9]方法,应用华支睾吸虫COX1基因序列FC1/RC1引物(FC1:5′-GCCTATAGTGAAAAGCACCA-3′;RC1:5′-GTTAATATTGCCGGGGTTTG-3′)进行PCR扩增。扩增产物送生工生物工程(上海)股份有限公司进行测序,获得的序列进行BLAST比对。
1.5统计学分析
所有调查数据采用WPSOfficeExcel2023软件建立数据库,使用SPSS25.0软件进行数据的处理及分析。采用χ2检验、t检验对华支睾吸虫感染情况进行单因素分析;检验水准α=0.05。
2、结果
2.1猫、狗市场销售基本情况
2.2猫、狗感染情况
共检查了107只猫的肝脏、胆囊,猫华支睾吸虫感染率为61.68%(66/107)。单只猫华支睾吸虫虫体数量最多达1070条,1~10条有24只,11~50条有22只,51~100条有13只,>100条有7只,感染度中度及以上的占比为63.64%。单只猫感染虫体中位数为23条。本地猫感染率为54.55%(24/44),外地(湖北)猫感染率为66.67%(42/63)。共检查了84只狗的肝脏、胆囊,狗华支睾吸虫感染率为2.38%(2/84),均为本地感染,本地感染率为4.17%(2/48)。单只狗虫体感染度分别为6条和11条。猫与狗华支睾吸虫感染率的差异有统计学意义(χ2=72.179,P<0.001)。
2.3虫体分布
感染猫、狗中,虫体主要分布在肝脏,占比高达89.71%,仅有少部分感染度重度及以上的猫、狗在肝脏和胆囊均发现虫体,虫体的分布位置在不同感染度猫、狗之间的差异有统计学意义(χ2=47.353,P<0.001);随着感染度增加,虫体异位寄生在胆囊的概率也增加。
2.5虫体、虫卵形态学
图1华支睾吸虫成虫、虫卵与感染猫体肝脏
2.6分子生物学鉴定
3、讨论
综上,广西全州县虽为华支睾吸虫病狭义非流行区,但市售猫、狗均可检出华支睾吸虫,尤其是猫的感染率较高,今后应进一步加强非流行区动物华支睾吸虫病的调查和防控。
参考文献:
[3]陈颖丹,周长海,朱慧慧,等.2015年全国人体重点寄生虫病现状调查分析[J].中国寄生虫学与寄生虫病杂志,2020,38(1):5-16.
[5]汤林华,许隆祺,陈颖丹,等.中国寄生虫病防治与研究[M].北京:人民卫生出版社,2012.375-408.
[6]蒋智华,杨益超,万孝玲,等.广西华支睾吸虫病地理和流域分布特点的初步分析[J].中国热带医学,2015,15(9):1057-1061.
[7]区方奇,王子玥,韦海艳,等.南宁市市售猫华支睾吸虫感染调查[J].中国血吸虫病防治杂志,2019,31(3):299-300,314.
[9]蒋智华,杨庆利,杨益超.基于线粒体细胞色素C氧化酶亚单位1基因鉴别华支睾吸虫和扇棘单睾吸虫的双重PCR法的建立[J].中国寄生虫学与寄生虫病杂志,2018,36(2):187-189.
[10]吴鹤松,杨光荣,陶开会,等.3种鼠类的肝重与体重关系研究[J].中国媒介生物学及控制杂志,1999(4):21-23.
[12]眭玉珍,陈桂珍,左守军,等.河南省宠物猫华支睾吸虫和其他肠道寄生虫感染状况分析[J].畜牧兽医学报,2023,54(7):3022-3030.
[13]王真瑜,张耀光,欧海凤,等.上海市1例输入性华支睾吸虫病例的检测与溯源[J].热带医学杂志,2022,22(5):706-710,744.
基金资助:广西自然科学基金项目(2023GXNSFAA026255);
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