导语：如何才能写好一篇基因工程论文，这就需要搜集整理更多的资料和文献，欢迎阅读由公务员之家整理的十篇范文，供你借鉴。
基因工程论文参考文献：
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关键词：市政工程；质量因素；文明施工
中图分类号：TU99文献标识码：A
一、影响市政工程质量的五要素
1.“人”的因素对市政工程质量的影响
2.“机械”的因素对市政工程质量的影响
随着社会的飞速发展，科学技术的不断提高，市政工程机械化程度也相应增加。机械化程度是好还是坏，是否有效地利用，对工程质量的影响是不可忽视的。所以，在工程施工方案的确定中，选用先进，可靠，适用，符合技术标准要求的设备，对提高工程质量有着重要的作用，同时也要保证各种机械设备进行定期的维护保养和检修，使其保证稳定的性能，达到施工工程质量的需要。
3.“材料”的因素对市政工程质量的影响
工程材料属于机械和材料对市政工程施工质量的影响。工程材料泛指构成工程实体的各类建筑材料、构件配件、半成品等它是工程建设的物质条件，没有材料就无法施工，是施工质量的基础。特别是对于市政工程，材料种类少、用量大，一种材料出现问题，就会对整个工程产生重大的影响。
4.“方法”因素对市政工程质量的影响
“方法”是项目建设中，在整个施工期间采取的技术，施工方案，施工工艺和组织设计等。影响建设工程质量和进度取决于施工方案正确与否，也是工程施工能否顺利进行的关键。所以，工程施工方案的制定，要进行全面的分析和考量，争取做到提高质量，技术可行，经济合理，技术先进。加快施工进度，把施工成本降到合理的最低水平，在工程施工方法上所遇到的问题，同样需要预先制定好防御措施，不要到出现问题时才去找解决方案，要防患于未然。
5.“环境”因素对市政工程质量的影响
影响市政工程质量的因素是多方面的，如地质，气候，环境。这里的环境因素可细分为工程管理环境，劳动环境和人文环境。环境因素复杂多变，因此，要根据具体的工程特点和施工条件，制定相应的措施，紧密结合施工技术和方案。对影响质量的环境因素，采取有效的措施，以确保建设工程的施工质量。
二、市政工程文明施工的具体措施分析
1.完善建立质量管理体系
任何事情没有一整套行之有效的制度作保障，都会出现管理不到位的现象，市政工程的施工质量管理工作也是如此。施工单位要明确建立科学的规章制度，对工程项目的质量形成全过程的管理控制，不断加深工程质量管理法规和质量管理的力度，落实岗位责任制，细化内部管理流程，从而保证工程质量。
2.加强对施工材料的管理
3.确保安全生产责任制的切实落实
对于安全生产责任制的实施问题，虽然面临着许多不确定因素的影响，但是要想将制度切实落实也并非是不可能的。首先，施工部门要结合当前市政工程施工的所处环境，在原有安全生产责任制的基础上，对制度内容进行适当调整，使其符合工程安全文明施工的要求。其次，要尽可能将制度中的内容和操作流程细化到每一个操作人员的身上，对操作人员的权利和义务进行明确规定，并利用科学技术对制度的落实情况进行追踪和动态分析，及时将数据反馈给安全施工管理人员，以此来给管理部门人员提供对制度进行完善的重要依据。
4.加大安全文明施工的监督力度
5.结合工程实际情况，采用合格的工程材料
工程材料对于工程质量的达标具有重要意义，若材料的质量无法过关，那么势必会影响到工程的整体质量。同时，选用不合格的材料进行施工，还有可能给施工人员的人身安全造成威胁。因此，在建筑施工过程中应当对施工所采用的材料进行严格的筛选，加强对材料质量的选择，材料符合国家安全使用标准的同时也应考虑是否在建筑工程预算范围内。只有这样，才能够在确保工程质量的同时，实现工程的安全文明施工。
6.加强监理的监管力度和监管能力
扩大对施工质量的监督工作范围，进一步完善有关监理工作的法律法规，增强市政质量监督部门执法力度，为监理单位做工作打好基础，同时监理单位应认识到监理的职责，保证市政工程的施工质量。监理部门要着眼于工程工期进展和质量，采用法律的手段控制工程进度、质量、工程造价和合同管理，协调生产过程中各有关单位的关系。一方面监理公司要对市政工程监理人员进行特殊培训，使其一人多能，为公司增添技术实力；另一方面监理单位要有适应市政工程质量监理的仪器设备，使优秀的人才和先进的器械结合起来，使检测手段逐步实现现代化，从而增强监理公司的质检实力。
7.明确目标并细化，加强基本工序的质量管理
施工环节应有规划，把工程总质量目标分成若干小目标，划分成若干工序，把每道工序看成是实现项目质量控制总目标的一个具体步骤。工程项目的质量是在施工过程中逐渐形成的，施工过程中项目质量受影响的因素最多，因此，施工过程中的工序质量控制是施工阶段工程质量控制的重点，必须做到每道具体工序的质量控制到位。市政工程建设项目的质量管理必须严格按照预定的计划和技术标准实施。管理的实质是对事先制定的质量标准与施工过程中的实际标准之间两相对照，对比之下是否存有偏差，分析影响质量的制约因素并消除，使其控制在一定的范围内，如果偏差处在允许的范围之外，就必须采取整改措施。另外市政工程施工中施工人员交叉施工的情况非常多，要控制好工程质量，就要求监理人员对每道工序都严格执行检查制度，使每一道工序都在合理的控制之下进行。
8.实施项目过程管理，推行目标管理
项目质量主要形成于施工过程，施工过程同时也是质量控制的根本环节。施工过程质量控制的基本任务有两个：一是项目质量保证；二是建立一个科学管理系统，稳定地生产合格的、优质的工程。施工过程中应重点抓好原材料、成品、半成品的质量检验工作，严格监督每一道工序的质量控制。除了施工过程，项目交付后的使用也是考验工程实际质量的过程，作为项目质量管理的出发点和终点使用过程是企业内部质量管理的延续，使用过程中质量管理的基本任务是提高服务质量，包括交付前和交付后的服务，促使施工单位不断地研究和改进施工方法，确保工程质量，保证竣工工程的实际使用效果。
综上所述，市政工程的质量控制是各级市政工程项目管理中最为重要的任务。市政工程的自身特点决定了市政工程的质量控制任务既繁又杂，应当牢牢抓住市政施工质量管理中存在的问题，认真对待、谨慎分析、小心控制、严格把关，以保证市政工程管理再上一个台阶。
参考文献：
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关键词：大亚湾引水工程设计监理
1、工程概况
惠州大亚湾引水工程是大亚湾中海壳牌石化项目的配套工程之一。工程位于广东省惠州市境内，从东江、西枝江取水，输水到大亚湾石化区交水点，为中海壳牌石化厂及大亚湾经济开发区提供生产、生活用原水。引水工程主要建筑物可概括为“四站、三洞、两段、一库”组成，即由东江下源泵站、西枝江新湖泵站、永湖彩塘加压泵站、风田加压泵站、永湖隧洞、羊公坑隧洞、双流溪隧洞、风田调节水库及两段输水管道等建筑物组成，引水线路总长约56km，采用混凝土预应力管有压管道输水，风田水库以上47.74km为DN2000单管道输水，风田水库以下8.24km为两条DN1600管道输水。工程设计引水流量4.8m3/s，日供水量33万吨，工程总投资4.57亿元。
该项目由广东省水利水电勘测设计研究院设计，2002年5月开始初步设计工作，2003年9月开工建设，目前工程已基本完工。为保证工程的设计质量、设计工作进度和工程投资等进行有效的监督和管理，从初步设计开始，大亚湾中海壳牌石化项目配套工程建设指挥部委托了黄河勘测规划设计公司对项目设计过程实施跟踪监理，适时监控，对设计成果进行审核。本文简要介绍惠州大亚湾引水工程设计监理工作实施情况，并对设计监理工作的有关问题进行讨论。
2、设计监理的主要工作任务和工作内容
2.1设计监理的主要工作任务
设计监理单位受业主委托进行工程设计监理，工作任务主要有三项；一是对设计成果质量进行控制，依据国家和行业的有关规范、规程、法规，减少设计中的错误和遗漏，提高设计质量；二是对设计工作进度进行控制。督促设计单位按设计合同规定提供有关设计文件和图纸，满足工程进度要求；三是协调业主与设计单位的关系。按照公平、公正、独立、自主的原则，以事实为依据，以法律、法规及设计合同文件为准绳，协调、处理好双方发生的矛盾和纠纷。其中最主要的任务是设计成果质量控制和设计工作进度控制。
2.2设计监理的主要工作内容
2.2.1工程勘察监理
（3）进度控制：监督勘察单位人员、设备是否按计划进场；根据实际勘察速度预测勘察进度，必要时应及时通知勘察单位予以调整。
（4）质量控制：监督是否按勘察纲要实施勘察工作。督查勘察项目是否完全；勘察点线有无偏、错、漏；钻探深度、取样位置及样品保护是否得当；检查试验条件是否具备，试验项目是否齐全，试验操作是否规范等。
（5）审查勘察报告。检查勘察报告的完整性、合理性、可靠性和实用性，以及对设计施工要求的满足程度。
（6）审核勘察费的结算。根据勘察进度，按合同规定签发支付费用通知。
（7）签发补勘通知书。
（8）协调勘察工作与设计、施工的配合。
2.2.2初步设计阶段
（1）结合工程项目特点，收集设计监理所需要的技术资料；
（2）协助业主拟订设计委托合同或设计任务书；
（3）审查设计单位提交的设计大纲，专业大纲和项目计划；
（4）配合设计单位开展技术经济分析，参与设计方案的比选工作，促进方案优化设计；
（5）参与主要设备、材料的选型，审核主要设备材料清单；
（6）设计进度控制。核查设计力量是否切实保障，项目工作计划是否切实执行；
（7）审核工程概算，控制工程投资。工程初设概算投资一般应控制在可研阶段投资估算范围之内，如果突破概算投资，最多不超出可研阶段投资估算10％；
（8）设计质量控制，审核工程项目设计图纸，审查设计成果文件，必要时抽查设计计算书，提出设计监理审查报告；
（9）根据合同规定，签发支付勘察设计费通知；
2.2.3招标设计阶段
大亚湾引水工程招标阶段业主聘请了招标机构，负责施工招标管理工作。由招标编写招标文件商务部分内容，由设计单位编写招标文件技术规范内容。设计监理主要工作是帮助业主审查招标文件。
（1）配合业主和设计单位，拟订工程项目施工招标方案；
（2）协助业主准备工程项目施工招标条件；
（3）协助业主审查招标委托合同文件；
（4）审查施工招标文件及招标图纸，审查设备采购标书文件，提出审查意见；
（5）协助业主组织现场勘察与答疑会。
2.2.4施工图设计阶段
（1）审核施工图阶段设计大纲，施工图设计的内容和范围是否符合设计合同要求；
（2）主持编制供图计划，协调设计出图与工程施工用图的矛盾，设计单位有计划供图，满足工程施工需要；
（3）审核施工图纸质量。审核施工图是否符合相应规程规范要求，审查设计计算方法及采用参数是否正确，图面表达是否准确、清楚，各专业施工图是否协调一致，对设计图纸提出设计监理审核意见；
（4）审查主要设备、材料性能及数量清单；
（5）审核设计变更，对重大的设计变更提出变更设计的审查意见和建议；
（6）督促设计单位按照合同要求提供施工图纸，按计划供图，保证施工用图；
（7）检查设计单位人员投入情况，包括人员素质、数量等；
（8）检查设计单位质量保证体系、质量保证措施落实情况；
（9）协调设计单位、业主、施工单位的关系；
（10）根据合同规定，签发支付设计费通知。
3、设计监理工作实施
3.1建立精简高效的现场设计监理机构
高素质的监理人员是搞好设计监理工作的根本。按照设计监理合同要求，黄河设计公司在现场组建了大亚湾引水工程设计监理部，抽调了各专业技术骨干和公司部分退休专家，进驻现场开展设计监理工作，参与设计监理的人员都具有教授级或高级工程师技术职称，专业负责人一般具有从事大型水电工程设计的丰富经验，大多都曾担任过公司专业总工或专业室主任职务，具有专业技术成果审查把关的能力和水平。根据监理机构设置及人员组成情况，明确了各级监理人员的工作任务和职责责任。
3.2编写设计监理工作计划书和监理工作细则
设计监理单位在接受业主委托后应编制设计监理工作计划书，一般由项目总监组织编写，报送业主批准并由业主转发给设计单位。大亚湾引水工程设计监理工作计划书主要包括以下几个方面内容：工程概况；监理服务的阶段、范围和目标；监理的工作内容；监理的组织机构和职责分工；设计监理控制措施和管理制度；监理人员进场计划以及各种监理工作用表格式等。设计监理工作计划书是全面开展设计监理工作的纲领性文件，经业主批准后，业主、设计单位和设计监理单位三方都要共同遵守执行。
监理部还组织编制了设计监理细则，根据设计阶段、工作内容、专业特点等，分阶段、分专业进行编写，使各专业设计监理工作实施和操作更详细、更具体。设计监理细则由设计监理专业负责人负责编写。
3.3实现设计监理工作制度化、程序化、规范化管理
设计监理工作计划书中明确规定了设计监理管理制度、控制措施及监理人员工作任务和职责权限，制定了设计监理工作用表。设计监理工作细则规定了各专业工作的具体内容和要求，工作程序和流程，明确其管理点和控制点。监理过程中严格按照规定的职责和责任分工负责，按照规定的工作程序和要求开展工作，按照规定的工作流程和时序传递文件和信息，按照规定的工作用表提交资料和成果文件。使得各级设计监理人员职责分明、目标确定、工作有序、成果规范，实现设计监理工作制度化、程序化、规范化管理。
3.4实施全过程跟追检查与阶段性成果全面审查相结合的控制措施
水电工程项目一般周期长，需要分阶段设计、逐步深化、不断优化、连续渐进的设计过程，相应设计监理也需要全过程的监控，跟踪检查，分阶段审查，对设计质量和设计工作进度进行全过程的控制。
设计监理通过设计方案技术讨论会，中间成果汇报会、监理工作例会等多种形式，检查设计工作进展情况、工作进度计划落实情况、设计方案及中间成果质量情况，发现问题，及时与设计项目组沟通解决。对阶段性设计成果进行全面的审查，提出设计监理书面审查意见和建议。施工图审查结论分为：“通过”、“复核”和修改三种，并填写图纸审核意见单、签盖设计监理审核章，未经设计监理审核通过的图纸不能用于工程施工。
3.5增强服务意识，坚持独立、公正、科学原则，处理好与建设各方的关系
现场设计监理机构开展监理工作过程中，与参与工程建设的各方，不管有无直接的合同关系，都有一定的工作关系，必然要发生联系。设计监理必须坚持服务宗旨，增强服务意识，坚持以独立、科学、客观、公正的原则，对待和处理好各种矛盾，协调好各种关系，建立和创造团结和谐的氛围环境，设计监理工作才能顺利开展。
3.6编制设计监理工作月报和工作总报告书
设计监理部每月提交设计监理工作月报，月报的主要内容包括：设计单位当月完成的工程勘测设计任务情况、设计质量与工作进度控制情况，合同执行情况，重要事件、现场会议及来往信函文件情况，设计监理当月主要工作情况以及工程设计、设计监理、建设管理等方面存在的问题及工作建议。重大问题必要时可提出专题报告报送业主。通过工作月报，业主可以全面了解掌握项目勘测设计工作进展情况和设计监理工作情况。
设计监理工作全部完成后，编制设计监理工作报告书提交给业主，对各设计阶段的设计监理内容、设计监理结果以及设计监理建议进行汇总，对设计监理工作进行全面总结。
重视设计监理文件、档案管理工作，及时进行文档的整理、编制工作，设计监理工作完成后，及时按规定进行文档移交和归档。
4、结语
论文关键词：会计信息失真，成因，对策
所谓会计信息失真是指会计信息未能客观真实地反映会计经济主体的经营成果和财务状况。会计信息是经济决策的重要依据，会计信息可靠与否，是会计信息使用人能否作出正确决策的关键。经济活动越复杂，会计信息在经济决策中的作用越大。然而，由于受复杂的社会环境与会计信息生成系统自身因素的影响，已使会计信息失真成为一种社会痼疾与国际性现象。
一、会计信息失真成因分析（一）经济利益和政治利益的驱使现阶段，多种经济成分、多种经营方式和分配方式并存，经济利益多元化。企业领导从个人或企业的利益出发，为了获取贷款，减少纳税，吸收投资等，指使会计人员弄虚作假，甚至一个单位设立几套账。如给合作伙伴的是“如意表”；给贷款银行的是“放心表”；给税务部门的是“叫苦表”；给企业主管的是“业绩表”，这使财务报表成为无所不能的“万能表”。从另一个方面考虑，目前对企业领导的考核往往以实现的利润等指标为主要依据，某些领导为了捞取政治资本、骗取经济指标等，置会计准则和会计法规于不顾，指使会计人员采用非法手段对会计信息进行“技术加工”，这是导致会计信息失真的重要原因。
（三）内部控制制度不够健全内部控制制度是企业事业单位为维护资产的完整性，确保会计信息的真实可靠性以及对经济活动进行综合计划、考核和评价而制订的制度、方法和措施的总称。然而一些单位没有完善有效的内部控制制度，致使会计资料在传递过程中，因相互脱节而发生错误或因两个不相容职务缺乏相互制约而发生舞弊；还有一些单位，虽然内控制度一应俱全，但在实际工作中，得不到有效执行，形同虚设，流于形式；不少企事业单位以及管理人员对这方面认识不足，致使内部控制制度的制订过于马虎、简单，各种错账不能即使被察觉和抑制，其反映的会计信息自然不可能真实可靠。
（四）会计人员综合素质不高会计人员是会计活动的主体，对要发生的经济业务进行核算和监督。但目前有些会计人员素质较低，有些没有经过专门的培训，平时又不加强学习，在处理会计业务过程中由于对会计核算规范掌握不透，对新的理论和刚出台的经济法规研究应用较少，跟不上时代的步伐，从而日常核算工作不符合规范，对一些不确定的因素判断不准确，直接影响会计核算的水平；有些会计人员缺乏职业道德，为了个人的私利，知法犯法。会计人员素质的高低，直接影响会计信息的质量。
二、会计信息失真的对策探讨要治理会计信息失真，也要采取综合治理对策。除了完善会计准则和会计核算制度外，对于会计工作失误的主要对策是建立和健全内部的控制，加强内部检查；对会计舞弊的主要对策是强化外部检查和监督及其处罚力度。此外，完善会计人员从业资格制度，加强会计人员的后续教育，提高会计人员素质也是防止会计信息失真的关键因素。
（二）健全以审计监督为主，财政、税务、人民银行、证券监管、保险监管等部门监督检查及社会监督相结合的综合外部监督体系。审计组织是进行经济监督的专职部门，它们在提高会计信息的可信性方面具有其他经济监督管理部门不可替代的优势。国家审计机关重点作好财政、税收、国有金融机构、重点基本建设项目、专项资金、主要行政机关和事业单位及审计，其他单位交由民间审计组织进行审计；发展和完善注册会计制度，注册会计师作为市场经济的“经济警察”，应充分体现其职能和作用；提高审计覆盖率，逐渐做到有关单位的年度会计报表均经过审计。同时，也充分利用和发挥财政、税务、人民银行、证券监管、保险监管等部门和社会力量对会计信息进行监督，相互配合，相互协作，做到齐抓共管，形成综合的会计信息监督体系。
（三）依法处置会计舞弊者。在我国现行法律法规中，有《会计法》、《证券法》、《公司法》、《刑法》等规定了提供虚假会计资料的处理处罚规定。只要坚持有法必依、执法必严、违法必究，会计舞弊行为就会越来越少，会计信息质量将会越来越高。
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关键词:港口工程；大体积混凝土；温度裂缝；防治措施
Abstract:massconcreteconstructionmaincharacteristicisbigvolume,generalentityminimalsizeisequaltoorgreaterthan1m;Itssurfacecoefficientaresmall,cementhydrationheatreleasemoreconcentrated,internaltemperaturerisefaster.Concreteinsideandoutsidewhenlargetemperaturedifference,canmakeconcreteproducetemperaturecrack,affectingthestructureandnormaluse.Somustfundamentallyanalysisit,toensuretheconstructionquality.Thispaperanalyzestheportengineeringmassconcretestructureinlargetemperaturecrackreasons,andtheportofmassconcreteusedintheconstructionofthemeasuresandthequalityrequirementsfortherawmaterialsarediscussed.
Keywords:portengineering;Massconcrete;Temperaturecrack;Preventionandcontrolmeasures
0.前言
随着我国交通设施建设发展,大体积混凝土在港口建设中的运用越来越多,主要是用在大中型的基础建设工程及桩基承台上。其特点主要是结构厚实，混凝土量大，工程条件复杂（一般都是地下现浇钢筋混凝土结构），施工技术要求高，水泥水化热较大（预计超过25度），易使结构物产生温度变形。大体积混凝土除了最小断面和内外温度有一定的规定外，对平面尺寸也有一定限制。因为平面尺寸过大，约束作用所产生的温度力也愈大，如采取控制温度措施不当，温度应力超过混凝土所能承受的拉力极限值时，则易产生裂缝。下文主要对港口工程中大体积混凝土结构导致温度裂缝的原因,并对港口大体积混凝土施工中采用的措施以及原材料质量要求等方面进行了探讨。
1港口工程中大体积水泥混凝土温度裂缝产生的原因
大体积混凝土温度裂缝产生的主要原因是由于混凝土的导热性能差，其外部的水化热量散失较快，而积聚在结构内部的水化热则不易散失，造成混凝土各部位之间的温度差和温度应力，当表面拉应力超过混凝土的抗拉强度时，就会产生温度裂缝，给工程带来不同程度的裂缝。能够深刻了解大体积混凝土中温度变化所引起的应力状态对结构的影响，认识温度应力的一系列特点，掌握温度应力的变化规律，了解大体积混凝土温度裂缝产生的机理，对于制定有效的施工方案，保证施工质量能起到至关重要的作用。这就要求施工单位在原材料的选用、配合比的确定、混凝土的测温、降温和保养等几个方面严格把好质量关。
（1）影响混凝土内外温差的主要因素有混凝土厚度泥用量、水泥品种、浇筑入模温度及环境温度等。混凝土越厚,水泥用量越大；水化热越高的水泥,其内部变形越大,形成的温度应力越大,产生裂缝的可能性越大。因此,防止大体积凝土出现裂缝最根本的措施是控制混凝土内部和表面的温度差,降温速率要比升温速率高,裂缝的产生可能发生在升温阶段,也可能出现在冷却阶段,升温阶段多为混凝土表层出现不规则裂缝,而在冷却阶段,则常由于外界条件的约束致使混凝土内部出现贯穿性的长裂缝。
2港口工程中大体积水泥混凝土温度裂缝的主要应对质量控制措施
3结语
关键词：基因工程；教学改革；探索
中图分类号：G42文献标识码：A
一、教学内容改革
（二）调整教材体系
（三）紧跟学科发展前沿，更新教学内容
基因工程技术的发展日新月异，不断有新技术出现，教材内容的更新远远跟不上技术的更新。为了使学生能够全方位的了解基因工程领域的最新技术，我们不能仅仅局限于教材内容，而是在教材教学的同时将最前沿的基因工程技术穿来，开阔学生视野，扩大其知识面，塑造他们的批判精神的创新能力。
二、教学手段改革
基因工程是一门基础性很强的学科，课程内容信息量大、更新速度快、抽象复杂，要求教师在教学过程中必须具有前瞻性和开创精神，努力使教学跟上学科的发展进程，向学生传授教材以外的新知识、新技术、新方法，培养学生的独立思考和勇于探索精神，为学生继续深造打下良好的基础。传统的教学手段，照本宣科，只能使学生得到一些感性认识，无法得到直接的体验，不能激发学习兴趣，加以内容晦涩难懂，久之学生就容易对本课程产生厌倦心理，学生学着很累，老师教起来更累。这就需要教师在基因工程教学过程中勇于开拓创新，不拘泥于传统的教学手段，善于采用新型的教学方式，以激发学生的学习兴趣、较好地掌握整个知识体系为最终目的。
多媒体教学是弥补传统板书教学呆板、灵活性差的利器。运用形象、直观的多媒体技术可以创设出一个生动有趣的教学情境，以其独特的形、声、景扣动学生的心弦，化无声为有声，化静为动，使学生进入一种喜闻乐见的、生动活泼的学习氛围，从而使学生产生极大的学习兴趣。此外，多媒体教学还具（下转第110页）（上接第108页）有增加教学容量，提高教学效率、提高教学质量、培养学生抽象思维能力等优点。多媒体教学是对传统教学方式的一种颠覆，其本身也不可避免的存在一些缺点，比如容易产生华而不实，不能紧扣教学内容，过于轻视学生的主体和教师的主导作用等。我们在基因工程教学过程中，将传统的板书教学和多媒体教学有机结合，相互穿插，有效的激发学生的学习动力，同时又将学生的主要精力放在课程内容的学习上，取得了良好的教学效果。
三、教学方法改革
（一）启发式教学
单纯的老师在台上讲，学生在下面听，加之基因工程内容难以理解，很容易使学生产生厌倦心理。我们借鉴前人经验，在课堂教学中穿插启发性的问题。从学生的实际出发，采用多种方式，以启发学生的思维为核心，调动学生的学习主动性和积极性，促使他们生动活泼地学习。
（二）研讨式教学
（三）开放阅读式教学
结合基因工程课程更新速度快的特点，引导学生通过网上浏览、图书馆借阅等方式了解本课程最新研究动态，不但激发他们的学习兴趣，同时培养他们查阅资料的能力，为将来的深造和工作打下良好的基础。
四、改革考核方式
为了引导学生树立正确的学习态度，建立良好的学习习惯，在《基因工程》课程考核中，我们采用了平时成绩和卷面成绩相结合的方式，平时作业、考勤、发言等成绩占40%，期末卷面成绩占60%，充分调动了学生的学习积极性。这种多元考核法注重过程型学习能力的培养，克服了学生突击复习应对考试带来的弊端，真实客观地反映出学生的学习效果，使考核方法具有科学性、合理性。
\[1\]杨宜,赵睿.加强实验室建设培养应用性金融人才\[J\].北京联合大学学报,自然科学版,2005,(12):88-91.
（二）文献数据库
二、网络资源在“基因工程”课程教学中的应用
（一）利用网络资源，提高备课效率和质量
（二）利用网络资源，追踪科学前沿，更新教学内容
（三）利用网络资源，丰富教学手段，提高教学效果
网络资源内容具有多样性，不仅可以利用文字和图片，做到图文并茂，而且还可以利用动画、视频等多媒体资源，使抽象、难懂、枯燥的内容变得生动、直观、形象，便于学生理解和记忆，这样不仅能够激发学生的学习兴趣，还能提高学生的学习效率。例如，教师在介绍PCR、qPCR技术原理时，可通过Flas将在PCR管中的一个生化反应以形象可视的方式进行展示，使抽象的原理变得直观易懂，学生很容易理解且印象深刻，同时教师的教学效率也得到了提高。另外，教师在进行RNAi内容教学时，通过一个视频短片对RNAi的作用机制进行了生动展示和讲解，使复杂的调控机制化繁为简，再加上短片配有背景音乐，使教学成为一种享受。
三、网络资源在“基因工程”课程教学中的应用效果
笔者在“基因工程”课程教学中，充分利用网络资源，实时补充和更新生命科学前沿的理论与技术成果，利用Flash、Movie等声像资料开展动态直观的教学活动，不仅使学生拓宽了知识面，而且极大地激发了学生的学习兴趣。按照北京林业大学教务处设计的学生对教师教学质量评价的标准，对生物技术专业135名学生的调查发现，92．7％的学生认为“基因工程”这门课程合理地运用了网络、多媒体等现代教育手段；93．2％的学生认为教学内容丰富充实、信息量大，而且还补充了新知识；93．0％的学生通过“基因工程”课程的教学活动激发了学习兴趣，学习成绩得到了提高。笔者综合分析了11个评价项目，发现各项累计得分为93．45分，取得了较好的教学效果。
四、总结
论文关键词花色；基因工程；花色苷；植物色素
论文摘要基因工程在植物花色改良中正发挥着越来越来重要的作用，综述了植物花色苷基因工程所采用的方法和策略，包括花色苷生物合成基因的分离克隆、基因的遗传转化和基因工程改良的基本策略。
利用基因工程改良花色是花卉分子育种的重要手段，不再受植物亲缘关系的限制，花色改良的效果通过目测和少量辅助手段即可判断[1]。花色苷是植物次生代谢过程中产生的黄酮类物质，它是花色素与糖以糖苷键结合而成的一类化合物，广泛存在于植物各组织细胞的细胞液中，使植物呈现从红、紫到蓝等的不同颜色[2]。花色苷的生物合成途径是被最为广泛而深入研究的植物次生代谢途径，特别在主要模式植物中，已经有了清楚的认识[3]。许多花色苷生物合成途径中的关键酶基因和调节基因均已经从不同植物中克隆到[3，4]。转基因花卉主要用于观赏，易被公众接受，具有传统育种手段难以比拟的优越性，必将给花色改良带来革命性的影响，已成为当前花卉育种研究的热点。
1花色苷生物合成基因的分离和克隆
2基因遗传转化的方法
基因转化的主要方法有农杆菌介导法[9]、基因枪法[10]、花粉管导入法[11]、化学试剂诱导法[12]和电穿孔法[13]等。
农杆菌介导的基因转化方法是迄今最可靠、最有效的转化方法。现在的转基因再生植物中，80%以上是用这种方法获得的，主要有叶盘转化法、整株感染法和原生质体转化法[14]。
基因枪法又称微弹轰击法，是由康乃尔大学Sanford等[10]建立的基因导入方法，其基本原理是利用亚精胺、聚乙二醇的粘附作用将外源DNA包被在微小的金粒或钨粒表面，然后在高压的作用下微粒被高速射入受体细胞或组织。
花粉管通道法最早由周光宇提出[11]，其基本原则是利用开花植物授粉后形成的花粉管通道使外源DNA沿着花粉管进入胚囊，转化尚不具备正常细胞壁的卵、合子或早期胚胎细胞的方法。
化学诱导法[12]的主要原理就是聚乙二醇、多聚-L-鸟氨酸、磷酸钙在pH值较高的条件下诱导原生质体摄取外源DNA分子。
电穿孔法又称电激法，首先由Neumann提出[13]，是在高压电脉冲作用下，在新鲜分离的原生质体的质膜上形成可逆性的瞬间通道，从而发生外源DNA的摄取。
此外，还有脂质体转化法、低能离子束法、病毒载体转化法、转座子介导法和浸泡法等。
3花色苷基因工程改良的基本策略
花色苷合成由多个代谢步骤、多基因决定，所以利用基因工程改造花色苷一个重要策略就是还原法，即欲修饰某个性状时，先要明确决定该性状的特异生化物质，然后对形成该生化物质的代谢途径进行基因工程操作。具体就是分析催化各反应步骤的酶、编码这些酶的基因及其表达调控[15]。多步骤的代谢途径有限速步骤，而限速步骤对整个代谢途径起着决定性作用，所以对限速步骤的遗传操作往往是还原法的重要突破口。增强某种关键酶的表达，往往可使花色苷合成途径朝生成其催化产物的方向进行；而抑制该酶的表达，则会使反应朝合成途径的另一分支进行，导致另一种产物的积累[16]。
3.1反义抑制法
利用基因工程技术进行花色苷修饰的常用方法是反义抑制法，首先明确决定花色苷的特异生化物质，然后分析该生化物质代谢途径中催化各反应步骤的酶，克隆编码这些酶的基因，反向转入到目的植株中，外源DNA转录产物与内源的互补mRNA结合，而抑制目的植株中这些生化物质的合成[17]。利用该技术已在矮牵牛[17，18]、[19-21]等几种观赏植物中进行成功了花色修饰。
3.2共抑制法
共抑制法，又称正义抑制法，即正向导入1个或几个内源基因的额外拷贝，反而抑制该内源基因转录产物mRNA的积累，进而抑制该内源基因的表达[22，23]。该技术在矮牵牛[24]、[19]、蓝猪耳[25]等花卉的花色修饰方面已取得成功。
3.3导入调节基因
如果植物已具色素合成结构基因，只是因为组织特异性或缺乏调节基因表达产物的激活而不表达时，导入调节基因并使之适当表达可活化特定的结构基因，改变花色。如Quattrocchio等[26]将系列花色苷合成的调节基因转入矮牵牛，获得红色的愈伤组织和粉红色花色的转化株。Kim[27]将玉米C1基因通过农杆菌介导转入烟草，使株花瓣变狭长，颜色显著变浅。
3.4导入新的外源基因
Meyer等[28]首次将源自玉米的编码DQR的A1基因导入矮牵牛白花突变体中，产生了开砖红色花的矮牵牛。1992年澳大利亚CalgenePacific公司与日本Sundory公司合作向蔷薇中导入F3′5′H基因获得成功，同年该公司在矮牵牛中导入该基因获得蓝色矮牵牛[29]。此外，在花色基因工程操作中，也可以导入调节基因以增强或减弱原有代谢产物表达，或导入其他与花成色作用有关的基因，如pH基因、辅助色素基因、细胞形状基因等，也可以同时导入与某种花色有关的多种基因。
转贴于
4植物花色苷基因工程改良的安全性
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关键词：基因工程；四步教学法；建议
一、《基因工程》的重要性
二、《基因工程》“四步教学法”
“四步教学法”过程：第一步、课堂讲授环节，先在课堂上讲授全面知识，使学生对于基本知识有个大概了解；第二步、实验环节，在上实验时将主要内容再讲述一遍，使学生加深对重点知识的了解，同时回顾课堂上所学知识、增加对知识的理解深度；加强学生在实验中的动手能力，使学生将课堂上所学知识运用到实践中去；第三步、复习阶段环节，在考试前，将全部知识点给学生写出来，让学生按照知识点将《基因工程》知识再复习一遍，学生为了考试，将所有知识进行通盘学习和掌握；对所学知识进行又一遍的理解，很类似“反刍”过程，可以增进对《基因工程》知识的消化吸收；第四步、考试环节，考试中将主要知识出在试卷中，使学生将所学的知识再系统学习一遍。学生在放假期间对掌握不全面的知识进行深入了解，有针对性地进行研究生入学考试的复习。
第一步，课堂讲解环节，这个环节重点在老师的讲解，其实也是教学过程的重要环节，采用下面几个方法增加学生对知识的理解和掌握。
1.增加课堂教学趣味性：①讲述《基因工程》中的发现故事，使学生了解PCR的发明过程：对PCR的发明过程作了绘声绘色的描述：KerryMullis开车飞驰在101国道上，窗外树影婆娑，橡树花的芬芳扑面而来。他思考着基因工程操作实验，在脑海中看到DNA分子双链缠绕在一起，又看到DNA聚合酶连接到双链上，开始复制……接着又有一对DNA分子合成……忽然间，想到面临着巨大的发现，他停下车把这个思想记录下来……经过推广应用，在1993年获得了诺贝尔奖金。②对操作中用到的物质性质进行夸张以加深学生印象：EB作为强诱变剂，对它的诱变性进行夸张，如“有可能产生巨大的突变，从而使人退化变成猴子”的故事。③让学生体会科学的魅力、认识科学的美妙，在讲解M13噬菌体时，它的特性是以+DNA链为模板复制得到-DNA，成为复制双链DNA；而到200个拷贝时，+DNA链被特异蛋白质所连接，只能以-DNA链为模板合成+DNA链，而后组装M13噬菌体，并释放到菌体外。可以用离心方法分离得到上清中的+DNA链，沉淀中的复制双链DNA。④在学习λ-DNA体外包装时，获取体外包装蛋白，选取D-、E-突变体时，用42℃筛选不能生长者为D-、E-突变体，是因为这些噬菌体不能生长，可以让学生认识科学的魅力和美丽。
2.将科研过程中遇到的问题加入课堂内容，以增加学生学习知识的兴趣，并加强所学知识的亲近感。学生们见到书本上的东西，觉得离他们太遥远，所以将科研中的内容结合课本知识讲解，使他们觉得所学知识就是他们工作中用到的知识：热激诱导过程、定点诱变问题。在PCR扩增时，从同事那里取来扩增基因的模板，人家说稀释200倍再作为模板，这样扩增了二周也没有扩增出来基因。后来发现，由于模板不足，而不能扩增出基因，到后来将所有模板加入进行PCR扩增，得到了基因。
3.加强知识与实际工作相结合，加强学生学习的真实性。在讲解Taq酶时，讲解它所产生的巨大的产值，与学校和企业的产值相比，让学生对此有深刻了解。利用实际生活中的例子，如两个酶制剂厂，所用酶菌种全部来自日本，说“生命”完全控制在别人手中，别人不给就不能生产，可以加强学生的责任感，加强学习的动力。另外，在广州一家工厂生产酱油，是我国科学家利用《基因工程》方法提高产量而占领市场，让学生增加自豪感，提高学习动力。讲解pUC18/19名称的来历是，plasmidofUniversityofCaliforniaI（加利福尼亚大学），希望学生能够刻苦学习而有所成就，能够发明相同的东西而命名。
三、考试后分析
在考试后，积极分析学生成绩，发现学习中的问题，让学生感觉到老师的关心。从成绩中可以看出，生物科学两个班学生学习效果不同。一个班的成绩出现两极分化现象，而另一个班的成绩则比较平均，这与两个班学生的学习氛围不同有关，前一个班学习气氛比较活跃、爱玩，所以爱学习的学生成绩更好，而不爱学习的学生见到别的学生玩，他们也跟着玩，所以成绩只会更差。后一个班的学生学习氛比较死，全班都在学，没有人玩，所以大家都在学，学习差的学生也跟着学好了，只是没有前一个班里的学习尖子多。前面那个班平均成绩只比后面班里学生的平均成绩少5分。总体上生物科学专业的学生成绩比较好，在上课过程中，常见到生物科学专业的学生到课率比较高，而生物技术专业学生的到课率则较低。在教学方式上，内容比较有针对性，不能面面俱到，因为在学习过程中要掌握重点知识，在教学中必须突出重点。
四、基因工程教学建议
2.加强教书育人并重性，老师不仅仅是教书，同时还有育人的责任。在学生面对困难时给他们信心，比如学生在做感受态细胞制备的实验时，好多学生不能用肉眼看到所提取的感受态细胞，便失去了信心。可以给学生讲“有志者，事竞成，破釜沉舟，百二秦关终属楚；苦心人，天不负，卧心尝胆，三千越甲可吞吴”的故事，鼓励学生在任何情况下都不要失去信心，坚强意志。学生学到的不仅仅是自然科学知识，同时还有做人的道理。使他们在遇到挫折时有百折不回的意志，当然这也不是一朝一夕的工夫，但是作为教师，应该抓住所有的时机对学生进行教育。
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关键词：生物技术;生物信息学;教学;实践
生物信息学（Bioinformatics）是在生命科学的研究中，以计算机为工具对生物信息进行储存、检索和分析的科学，是一门新兴的交叉学科。生物信息学针对生物学问题，发展各种算法及软件，对迅速增长的浩如烟海的核酸和蛋白质序列进行收集、整理、储存、、加工等，目的在于通过生物信息学手段及分析，逐步认识生命的起源、进化、遗传和发育的本质，破译隐藏在DNA序列中的遗传语言，揭示生物体生理和病理过程的分子基础，为探索生命的奥秘提供合理和最有效的方法或途径[1]。作为当今生命科学和自然科学领域发展最为迅速的学科之一，生物信息学已成为介于生物学和计算机科学前沿的重要学科。实验室的每一项技术，从简单的克隆、PCR到基因数据分析都需要在计算机上应用生物信息学的方法进行处理。因此，对生物技术专业的学生而言，具备一定程度的理解和应用生物信息学方法和技术的能力是十分必要的。
目前，国内外许多高等院校相继开设了生物信息学课程，我校也于2007年针对生物技术专业学生开设了此门课程。该课程不仅是一门新兴的学科，而且学习难度大，理论课内容相对枯燥，如何让学生更好地掌握本门课程的内容，是教师在教学过程中值得深思的问题。实验教学是帮助学生理解抽象理论知识的有力手段，在教学中显得尤为重要，但由于开设专业的特殊性，生物信息学实验教学一直比较薄弱。本文对过去实验教学中存在的问题进行了分析，并针对问题结合《基因工程原理》课程以及自己的科研对教学内容进行了优化和教学方法上的改进，取得了一定的成效。
一、过去教学中存在的问题
（一）实验课教学学时偏少
（二）与其他课程联系较少
生物信息学课程开设在生物技术专业教学进程的第6学期，此时学生已具备普通生物学、细胞生物学、分子生物学、生物化学、医学免疫学、遗传学、基因组学、基因工程原理等生命科学的基础知识。但是，在生物信息学理论课和实践课学习的内容，如查阅的文献、分析的目的则由授课教师自行指定，忽略了与其他课程的联系，不利于学生系统地学习专业课的知识。
二、教学体系的改革和完善
（一）增加实验课教学学时
（二）将基因工程原理实验课程与生物信息学实践相联系
在基因工程原理的实验中，我们把家蝇防御素基因作为目的基因，主要设计的实验内容包括：（1）目的基因的获得：利用PCR技术扩增已经克隆到pMD-18T载体上的家蝇防御素基因;（2）pSK质粒载体的小量制备;（3）目的基因与载体的酶切;（4）目的基因与载体的连接;（5）大肠杆菌感受态细胞的制备;（6）重组质粒的转化;（7）重组子的蓝白斑筛选;（8）菌落PCR鉴定重组子[2]。
在学生对基因工程实验内容熟悉的基础上，我们在生物信息学的教学过程中对学生提出问题：家蝇防御素基因现有的研究现状是怎样的？PCR扩增目的基因的过程中引物该如何设计？获得阳性重组子后我们如何判断获得的插入序列就是目的基因呢？
针对这样的疑问，我们结合基因工程实验对教学内容进行适当的调整：（1）PUBMED获取文献信息：由学生通过PUBMED查找近五年发表的有关家蝇防御素基因研究的文献;（2）核酸序列分析：以家蝇防御素基因为对象，分核酸序列的检索、搜索开放阅读框（ORF）、限制性酶切分析、引物设计、载体序列识别、核酸序列的比对、分子质量/碱基组成/碱基分布分析和序列转换共8大部分内容进行讲解和学生实践操作;（3）蛋白质序列分析：同样以家蝇防御素蛋白为对象，分蛋白质序列检索、蛋白质序列比对、蛋白质基本性质分析（蛋白质的氨基酸组成、分子量、等电点、亲疏水性分析、跨膜区分析、信号肽分析）、蛋白质功能预测、蛋白质结构预测（蛋白质二级结构和三级结构预测）共5大部分内容进行讲解和指导学生进行实践操作。
（三）以科研促进生物信息学的教学改革
笔者所在课程组主要集中于功能基因组学的研究，涉及了功能基因的获取、生物信息学分析、功能验证等方面的内容。学生在课程学习中，参与到教师的科研课题中，学会运用生物信息学所学知识实际解决科研问题。学生可自行完成从文献的查阅、目的序列的获取（由公共数据库获得或实验室测序获得）、基因序列的分析、理论推导氨基酸序列基本性质的分析及结构和功能的预测、系统发育分析，如有可能，学生可通过实验的方法验证生物信息学分析的结果，同时鼓励学生自主选择感兴趣的基因、蛋白进行课程设计研究，实践结束后学生将结果以论文形式提交给教师。
三、教学探索的成效
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