木聚糖酶(EC3.2.1.8)主要由微生物产生，能催化水解木聚糖，也被称为戊聚糖酶或半纤维素酶，可分解酿造或饲料工业中的原料细胞壁以及β-葡聚糖，降低酿造中物料的粘度，促进有效物质的释放，以及降低饲料中的非淀粉多糖，促进营养物质的吸收利用，因而广泛的应用于酿造和饲料工业中，NEX一般分离自最适生长pH为6-8的微生物。
在中性环境中，NEX催化木聚糖降解成还原性寡糖和单糖，在沸水浴条件下进一步与3,5-二硝基水杨酸发生显色反应，在540nm处有特征吸收峰，反应液颜色的深浅与酶解产生的还原糖量成正比，通过测定反应液在540nm吸光值增加速率，可计算S-NEX活性。
二、试剂盒组分与配制：
试剂名称
规格
保存要求
备注
试剂一
自备
4℃保存
甲苯
试剂二
液体15mL×1瓶
试剂三
液体5mL×1瓶
4℃避光保存
试剂四
液体9mL×1支
标准品
粉剂×1支
临用前加入1mL试剂二，充分溶解（即10μmol/mL标准品母液）
三、需自备的仪器和用品：
酶标仪、96孔板、台式离心机、恒温水浴锅/培养箱、研钵、天平、可调式移液器、30~50目筛、甲苯和蒸馏水。
四、操作步骤：
建议正式实验前选取2个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验样本和试剂浪费！
1、预实验样本制备
新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干，过30-50目筛。
【注】：土壤风干，减少土壤中水分对于实验的干扰；
2、标准溶液的配制：把10μmol/mL标准品母液用试剂二稀释成5、4、3、2、1、0.5μmol/mL的标准溶液备用。
编号
稀释前浓度（μmol/mL）
稀释液体积（μL）
标准液体积（μL）
稀释后浓度
（μmol/mL）
S1
10
100
5
S2
240
160
4
S3
140
60
3
S4
200
2
S5
1
S6
0.5
3、预实验上机操作：
①酶标仪预热30min以上，调节波长至540nm。
②操作表：
试剂名称（μL）
测定管
对照管
标准管
空白管
土样(g)
0.02
-
20
充分混匀，放入50℃水浴锅或恒温培养箱中孵育30min后，立即于95℃水浴10min（可用封口膜缠紧，防止水分散失），流水/冰浴冷却至室温，12000rpm，25℃离心10min，取上清液。
上清液
80
标准溶液
充分混匀，95℃水浴5min（可用封口膜缠紧，防止水分散失），流水冷却至室温。
蒸馏水
充分混匀，于540nm处读取吸光值A，分别记为A测定、A对照、A标准、A空白。计算ΔA测定=A测定-A对照，A标准=A标准-A空白。（注：每个样本需做一个自身对照，空白管只需做1-2次）
4、正式实验：
②确定好最适实验条件后，正式实验样本制备同预实验样本制备；
③正式实验按照预实验上机操作步骤进行（标准管和空白管预实验已做，正式实验可选做）。
五、结果计算：
1、以各个标准溶液的浓度为x轴，其对应的ΔA标准为y轴，绘制标准曲线，得到标准方程y=kx+b，将ΔA测定带入方程得到x（μmol/mL）。
2、S-NEX活力计算：
单位定义：50℃、中性条件下，每g土壤每天分解木聚糖产生1μmol木糖定义为一个酶活力单位(U)。