医学影像技术技能(精选5篇)

（曲阜师范大学生命科学学院，山东曲阜273165）

关键词急性应激；学习记忆；神经营养因子-3；海马；前脑皮层

EffectsofAcuteStressonAbilityofSpatialLearning-MemoryandExpressionofNT-3inMiceBrain

CHENQianDUNaXIAOJing-shanLIYangHUOPanLIYa

（CollegeofLifesciences,QufunormalUniversity,QufuShandong273165,China）

【Abstract】Objective:Tostudytheeffectsofacutestressonthespatiallearning-memoryfunctionofmiceanditsmechanism.Methods:Usingacutestressmodelmiceinducedbyfootshock.Theabilityofspatiallearning-memoryofmiceweredeterminedbyMorrisWatermazetask,andtheexpressionofnerveneurotrophicfactor3(NT-3)inthehippocampus(HP)andprefrontalcortex(PFC)weredetectedbyimmunohistochemicalmethod.Results:Theabilityofspatiallearningandmemoryinstressgroupmiceweresignificantlyenhanced(P<0.01),comparedwiththecontrolgroupmice.TheNT-3expressioninCA1,CA3,DGofHPandPFCweresignificantlyincreasedinstressgroupmice(P<0.05,P<0.01).Conclusion:Theacutestresscausestheimprovementofspatialandmemoryfunctioninmicewhichmaybecloselyrelatedtotheup-regulationofNT-3expressioninbrain.

【Keywords】Acutestress;Learningandmemory;NT-3;HP;PFC

应激（stress）是指机体受到内外环境多种不利因素刺激时，为适应环境所出现的非特异性综合应答反应[1]。机体在应激时产生适应性反应，免疫、神经、内分泌等系统共同参与调节，来应对应激的损害。研究表明，应激对机体的影响是双重的，适度应激提高机体抵抗力和适应力，对机体有利，过强的应激则产生负面效应。中枢神经系统中，海马、前额叶皮层、下丘脑、纹状体及杏仁体等脑区与应激关系密切[2]。应激可引起中枢神经元的形态和功能改变，进而影响学习记忆功能[3]。神经营养因子-3（neurtrophin-3,NT-3）是神经营养因子家族成员，在中枢神经系统广泛分布，其功能涉及神经系统分化及发育方面，参与损伤后修复，可维持神经元的存活和正常功能[4]。本实验研究急性应激模型小鼠空间学习记忆功能的变化以及海马和前额叶皮层NT-3表达的变化，探讨急性应激对小鼠空间学习记忆的影响及其机制。

1材料与方法

1.1实验动物与分组

2月龄昆明品系小鼠（清洁级），雌雄各半，体重20±2g，购自山东鲁抗医药动物实验中心。自然昼夜节律光照下，自由饮水，进食，实验人员每日抓捉小鼠使之适应操作。小鼠随机分为对照组和急性应激组，每组12只。

1.2建立急性应激模型

急性应激组采用足底电击作为单一应激源（电压36V，15s/次，每次持续30s，共30次）。对照组不接受电击，正常状态饲养。

1.3Morris水迷宫检测学习记忆能力

1.4小鼠海马和前额叶皮层NT-3的表达

在完成水迷宫空间试验后，戊巴比妥钠注射麻醉小鼠，开胸腔暴露出心脏，快速经心先后灌注37℃生理盐水50ml及4℃的4%多聚甲醛溶液50ml，开颅取脑，然后再固定2h，经梯度酒精脱水、二甲苯透明、石蜡包埋后进行冠状切片（厚约5μm）。然后进行免疫组化实验，一抗及试剂盒均购自武汉博士德生物公司，按照试剂盒的要求操作。阴性对照选择PBS（磷酸缓冲液）代替一抗。选择每只小鼠相应海马部位和前脑皮层（PFC）切片3张，每张随机选取两个不相重叠的视野，用MoticImagesAdvanced3.2图像处理系统对海马和前脑皮层的NT-3阳性细胞平均目标灰度值进行分析。

1.5统计学处理

2结果

2.1各组小鼠空间学习记忆功能的变化

统计数据显示，两天的定位航行试验中，对照组和应激组小鼠的逃避潜伏期迅速下降（表1）；有统计学显著性差异（F=6.172，P<0.01）；与对照组相比，应激组在第2、3、4训练周期的逃避潜伏期明显缩短，有显著性差异（P<0.05，P<0.01，P<0.01）。结果表明，急性应激能明显增强小鼠的空间学习能力。

*P<0.05，**P<0.01：与对照组比较(ANOVA,N-K检验)；n=12.

*P<0.05，与对照组比较(ANOVA，N-K检验)；n=12.

2.2各组小鼠海马和前脑皮层NT-3蛋白的表达

免疫组织化学染色表明，急性应激后，与对照组小鼠比较，应激组小鼠海马CA1、CA3区、DG区及前额叶皮层NT-3的表达显著增强。与对照组比较（表3），应激组小鼠在各脑区的NT-3阳性神经元平均目标灰度值显著减少（P<0.05）。

*P<0.05,与对照组比较（非配对t检验）；n=12.

3讨论

参考文献

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【摘要】目的探究枸杞多糖对正常小鼠学习记忆能力的影响，为枸杞多糖在提高学习记忆能力方面的应用提供理论依据。方法选用SPF级昆明小鼠50只，雌雄各半，分为5组，分别为空白对照组、生理盐水对照组、LBP高、中、低剂量组，每组10只。LBP高、中、低剂量组给予LBP2g/kg、1g/kg、0.5g/kg灌胃，分别配制为0.12g/ml、0.06g/ml、0.03g/ml的混悬液；生理盐水对照组则给予等量的生理盐水灌胃，空白对照组不作处理。第5周开始用Morris水迷宫对小鼠进行学习记忆测试。结果在定位航行试验中，前3天各组平均逃避潜伏期差异无统计学意义（p>0.05），第4～5天LBP中、高剂量组学习能力较其他组有显著提高（p

【关键词】枸杞多糖，水迷宫，学习，记忆

材料与方法

1动物昆明小鼠50只，FPS级，体重25～30g，雌性各半，由广西医科大学动物实验中心提供，采取随机化原则将小鼠分为5组，即空白对照组，生理盐水阴性对照组，LBP高、中、低剂量组，每组10只。

2试剂枸杞多糖（L.barbarumpolysaccharides，LBP）：购于上海康舟真菌多糖有限公司；

3给药方法LBP高、中、低剂量组给予LBP高、中、低剂量组给予LBP2g/kg、1g/kg、0.5g/kg灌胃，分别配制为O.12g/ml、O.06g/ml、O.03g/ml的混悬液；空白对照组与AD模型组则给予等量的生理盐水灌胃。昼夜交替环境下饲养，由取食及饮水，连续灌胃4周。

4进行Morris水迷宫实验于第5周开始进行水迷宫实验，包括定位航行试验及空间探索试验两个阶段。

5数据统计学处理：实验数据以（均数±标准差）表示，使用SPSS19.0统计软件进行单因素方差分析（One.WayANOVA）。

结果

1各组空间学习能力比较前3天各组平均逃避潜伏期差异无统计学意义（p>0.05），第4～5天LBP中、高剂量组学习能力较其他组有显著提高（p>0.01）〖XC53.JPG；%60%60〗

2各组空间探索能力比较在空间探索试验中，对照组小鼠穿越平台所在区域的平均次数为5.20±0.32LBP高、中、低剂量组平均穿环次数分别为10.09±0.33、11.70±0.44，5.10±0.54，LBP高、中剂量组与其他各组相比差异显著（p0.05）。〖XC54.JPG；%60%60〗

讨论

结论

本研究使用正常动物模型，以其学习记忆的提高为切入点，给予LBP灌胃处理，对LBP与学习记忆能力之间的关系进行初步究，结果如下：LBP中、剂量高可提高正常小鼠的学习记忆能力。至于LBP通过哪些机制来提高正常小鼠的学习记忆能力，需要进行进一步形态学研究来证实。

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【关键词】肺癌根治性手术

1对象和方法

1.1对象选择200502/200708宁波大学医学院附属医院收治肺癌根治性手术患者74（男61，女13）例，年龄28~72（57±9）岁.按围手术期输血与否分为输血组（19例）和非输血组（55例）；以同期开胸探查并被证实为肺部良性病变行手术的患者16例作为对照组.两组间在年龄，性别，病理分型，临床分期等方面差异无统计学意义(P>0.05).

1.2方法输血组术前1d至术后5d期间，给予红细胞悬液或全血.所有患者均于术前和术后14d，抽取静脉血，采用流式细胞仪测定T淋巴细胞亚群CD3+，CD4+，CD8+和自然杀伤细胞，并计算CD4+/CD8+比值.

统计学处理：采用SPSS11.50统计软件进行统计学分析，数据以x±s表示，组内比较采用方差分析，组间比较采用t检验.P

2结果结果显示，患者T淋巴细胞亚群CD3+，CD4+，CD8+，自然杀伤细胞含量和CD4+/CD8+比值术前：输血组分别为：58.34±9.25，34.87±8.47，28.86±6.72，26.12±7.92和1.21±0.24；非输血组分别为：59.14±9.44，33.75±6.27，27.04±5.23，28.25±8.21和1.25±0.17，两组相比较，差异无统计学意义(P>0.05).术后14d，输血组分别为：52.28±8.54，29.64±7.10，29.34±7.15，25.01±5.82和1.01±0.28；非输血组分别为：58.40±7.43，32.85±5.20，26.69±7.62，28.34±6.25和1.23±0.30.术后14d输血组CD3+，CD4+与术前相比较有所下降，差异具有统计学意义(P0.05).术后14d输血组与非输血组相比较CD3+，CD4+，CD4+/CD8+比值和自然杀伤细胞均明显下降，差异具有统计学意义(P

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【摘要】目的探讨鹿皮胶对60Coγ照射小鼠造血功能及免疫功能的改善作用。方法小鼠60Coγ照射前、照射后，分别对空白组、模型组及鹿皮胶不同剂量干预组测定外周血象，并观察对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响。结果对60Coγ照射后引起的白细胞、红细胞数量的减少，鹿皮胶高剂量有明显促进恢复作用，与模型组比较有显著性差异（P

【关键词】鹿皮胶；60Coγ辐射；小鼠；造血功能；免疫功能

鹿皮胶是以梅花鹿或马鹿的皮为主料配制而成的，具有补肾阳、益精血之功效〔1〕。本实验通过60Coγ射线照射小鼠复制血虚动物模型，以白细胞（WBC）计数、红细胞（RBC）计数、血小板（PLT）以及吞噬指数K、吞噬活性α为指标，观察鹿皮胶对60Coγ射线所致血虚动物模型的影响。

1.1动物昆明小鼠，60只，雌雄各半。体重18～22g。由长春高新医学实验动物研究中心提供。合格证号：SCXK（吉）20030004。

1.2药品及试剂鹿皮胶：烊化配制成浓度为45%、30%、15%备用，长春中医药大学附属医院新药中心提供。阿胶：烊化配制成浓度为15%备用，山东东阿阿胶股份有限公司，批号：070170。

1.3仪器血液分析仪：MEK6318K型（日本光电公司）。紫外可见光分光光度计：7550型（上海分析仪器厂）。

1.4方法

1.5统计学处理数据以x±s表示，组间差异采用t检验。

2.1鹿皮胶对小鼠60Coγ照射前后外周血象的影响模型组小鼠经60Coγ照射后2w，测定外周血各项指标均有所改变；给药组给予不同剂量鹿皮胶2w后再测定外周血象，各项指标均有不同程度的恢复，对60Coγ照射后引起的WBC、RBC的减少，鹿皮胶高剂量组具有明显促进恢复作用，与模型组比较有显著性差异（P

2.2鹿皮胶对单核吞噬细胞吞噬功能的影响鹿皮胶给药组动物吞噬细胞吞噬指数与模型组比较有显著性差异（P＜0.05，P＜0.01），吞噬活性也明显提高（P＜0.05，P＜0.01）。见表2。

表1鹿皮胶对60Coγ照射小鼠外周血象的影响（略）

与空白组比较：1）P＜0.05，2）P＜0.01；与模型组比较：3）P＜0.05

表2鹿皮胶对小鼠非特异性免疫功能的影响（略）

与模型组比较：1）P

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[关键词]腹腔镜胆总管切开取石术；肝功能；血黏度；免疫球蛋白

腹腔镜胆总管切开取石术（LCHTD）逐渐取代传统的开腹胆总管探查术，成为治疗胆总管结石的常用方法之一。研究证实，腹腔镜胆总管切开取石术取石效果好，具有创伤小、出血少、术后恢复快等优点。但作为一种创伤性手术，仍然会使机体遭受到手术性创伤，如腹壁的切口及CO2气腹的建立、术后腹压的迅速下降等创伤性操作，可能造成患者出现缺血再灌注样改变，甚至可能引起患者肝功能的损害，对患者的血黏度及免疫功能产生一定的影响[1]。本研究旨在对比研究腹腔镜胆总管切开取石术与传统开腹取石术对患者肝功能、血黏度及免疫功能的影响，现报道如下：

1资料与方法

1.1一般资料

选择2012年7月～2014年1月在高州市人民医院行LCHTD患者50例为腹腔镜组，其中男28例，女22例，年龄32～78岁，平均（43.3±7.1）岁，术前伴黄疸12例、单发性结石21例、多发性结石26例。另选择同期行传统开腹取石术患者50例为对照组，其中男29例，女21例，年龄29～76岁，平均（45.2±7.3）岁，其中术前伴黄疸14例、单发性结石24例、多发性结石29例。两组患者性别、年龄、临床表现等一般资料比较，差异均无统计学意义（P>0.05），具有可比性。本研究获医院伦理委员会批准，入组前均签署知情同意书。

1.2手术方法

对照组行开腹胆总管切开取石术。腹腔镜组行LCHTD，一期缝合治疗胆总管结石。气管插管全麻，建立CO2气腹，应用腹腔镜切除胆囊，显露胆总管，在胆总管前壁开一小口再以弯剪刀延长0.6～0.8cm，将胆石收集袋置入腹腔，扩大肋缘下锁骨中线处操作孔，置入纤维胆道镜，中段结石挤压至切口处以取石钳取出，下段结石以套石篮伸至结石远端后张开、收缩，结石可进入套石篮后连同胆道镜一起退出至温氏孔处，将结石放入胆石收集袋内，镜检至Oddis括约肌处无明显结石后，置导尿管与胆总管内探通下段后冲洗出絮状物及细小结石；持针器钳夹自带线针“8”字缝合胆总管上下端后，再适当间断缝合1～2针，一期缝合关闭胆总管。

1.3检测指标与方法

术前及术后第1、3、7天晨8：00取空腹静脉血3～5mL，应用全自动生化分析仪测定谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）、血清总胆红素（TBIL）、血清白蛋白（ALB）。采用美国贝克曼库尔特流式细胞分析仪检测全血黏度、全血还原黏度及血浆黏度检测（毛细管式测量方法），并计算血细胞比容（HCT）。采用免疫速率散射比浊法检测血清免疫球蛋白IgA、IgG、IgM。采用流式细胞术测定后外周血淋巴细胞CD3+、CD4+、CD8+的变化。

1.4统计学方法

采用统计软件SPSS12.0对数据进行分析，计量资料以均数±标准差（x±s）表示，重复测量的计量资料比较采用方差分析，两两比较采用LSD-t检验。计数资料以率表示，采用χ2检验。以P<0.05为差异有统计学意义。

2.1两组患者术前、术后各项肝功能指标比较

术后1d，两组患者ALT、AST、TBIL均较术前显著升高且达顶峰，而ALB较术前明显降低，差异均有统计学意义（P<0.05），但腹腔镜组术后1d上述指标与对照组比较差异无统计学意义（P>0.05）。术后3d腹腔镜组患者ALT、AST水平明显低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。而两组患者TBIL较术后1d降低，而ALB较术后1d升高，但分别与术前比较，差异无统计学意义（P>0.05），且两组患者术后3d的TBIL、ALB组间比较，差异无统计学意义（P>0.05）。术后7d腹腔镜组患者ALT、AST、TBIL、ALB分别低于术前，但组内、组间比较差异无统计学意义（P>0.05）。见表1。

2.2两组患者术前、术后各项血黏度指标比较

两组患者血浆黏度术后1d均较术前明显升高，而术后3d较术后1d明显降低，但腹腔镜组患者术后1d的血浆黏度明显低于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。腹腔镜组术后3d全血黏度高切、低切分别明显低于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05），而其余未见明显变化。见表2。

2.3两组患者术前、术后免疫球蛋白变化情况

术后1d，两组患者IgA、IgG、IgM水平均较术前明显降低（P<0.05），且腹腔镜组患者IgA、IgG、IgM水平降低程度较小；术后1d腹腔镜组患者IgA、IgG、IgM分别明显高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。见表3。

2.4两组患者术前、术后T细胞亚群动态变化情况比较

术后1d，两组患者CD4+及CD4+/CD8+均明显低于术前（P<0.05），且腹腔镜组患者术后1d的CD4+/CD8+水平明显低于对照组（P<0.05）。术后3d，腹腔镜组患者CD3+、CD4+与对照组比较，差异有统计学意义（P<0.05）。术后7d，两组患者CD3+、CD4+及CD4+/CD8+较术后3d明显升高，但组间及组内比较差异无统计学意义（P>0.05）。见表4。

本研究表1结果显示，术后1d，两组患者的ALT、AST、TBIL均显著升高且达顶峰，均分别明显高于术前，而ALB均较术前明显降低（P<0.05）。以上数据显示，LCHTD术后患者出现短暂的、轻度的血转氨酶和TBIL的升高，其原因考虑可能与以下因素有关：腹腔镜建立的CO2气腹，其压力对内脏产生影响，术中牵拉胆囊造成对肝脏的直接挤压或导致肝外胆管扭曲而致肝内胆管压力升高，过度使用电刀烧灼胆囊床造成对肝组织的直接损伤，术中操作促使微小结石跌入胆总管等[2-5]。但LCHTD避免了胆汁胆盐大量丢失造成的水电解质及内环境紊乱，有助于恢复受损的肝功能。本研究表1结果显示，术后3d，腹腔镜和对照组患者的ALT、AST水平均较术后1d明显降低，也仍明显高于术前（P<0.05），且腹腔镜组患者术后3d的ALT、AST水平明显低于对照组（P<0.05）。与索运生等[6]报道的观点相符。

研究发现，手术创伤和疼痛应激使患者术后机体纤维蛋白溶解能力减弱，纤维蛋白浓度增加，导致血浆黏度升高，红细胞和血小板的聚集性增加，导致全血黏度增加[7-10]。近来腹腔镜手术与血液流变学的研究较为广泛，腹腔镜手术在气腹条件下完成，本研究着重对比观察腹腔镜CO2气腹下及开腹取石术手术前后血液流变学的变化情况。表2结果显示，两组患者的血浆黏度术后1d均较术前明显升高，与上述观点是相符的，但腹腔镜组患者术后1d的血浆黏度明显低于对照组、腹腔镜组术后3d全血黏度高切、低切也分别明显低于对照组（P<0.05），与王建江等[11]报道的观点是一致的，说明LCHTD对患者血黏度影响较小。

综上所述，LCHTD较传统开腹取石术对患者肝功能损害小，能明显降低血黏度，保护机体免疫功能。

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