《饲料中泰拉霉素的测定液相色谱-串联质谱法》
国家标准制定的编制说明
一、工作简况
根据国家标准化管理委员会下达的《国家标准化管理委员会关于下达2021
测有限公司、宁波市农产品质量检测中心承担了《饲料中泰拉霉素的测定液相
色谱-串联质谱法》国家标准制定工作（计划号：20214590-T-469），该标准
由全国饲料工业标准化技术委员会归口。
（二）标准制定背景
泰拉霉素(Tulathromycin),又称泰拉菌素、土拉霉素、托拉霉素，是由美
国辉瑞公司开发的动物专用半合成的大环内酯类抗生素，商品名瑞可新
(Draxxin)，2004年该药在美国和欧盟上市。2008年该药被我国农业部允许在
动物生产中使用，使用时以泰拉霉素计，皮下注射一次量每1kg体重牛2.5
mg(相当于1mL/40kg体重)。泰拉霉素的分子式为C41H79N3O12，相对分子质
量为806.23，由13元氮杂内酯环和15元氮杂内酯环两种同分异构体以1：9的
比例组成的混合物（结构式如图1所示)，且两者之间可以相互转化；其结构特点
为具有3个碱性氨基基团，在溶液中呈强负电性，pKa值分别为8.6，9.6和9.9，
这有利于穿透革兰氏阴性菌的外膜，当氨基未离子化时，呈亲脂性，代谢稳定。
泰拉霉素主要用于防治由胸膜肺炎放线杆菌、支原体、巴氏杆菌、副嗜血杆菌、
支气管败血性博德特菌等引起的猪、牛呼吸系统疾病。泰拉霉素具有药物吸收速
度快、药效持久、生物利用度高等优点。
近年来，由于抗生素滥用所导致的细菌耐药性、耐药基因、生态环境污染，
以及食品安全等问题，已经严重影响到畜牧行业健康发展，2019年7月9日农业
农村部第194号公告的正式发布，标志着我国饲料中全面禁止添加抗生素，但畜
禽治疗使用抗生素不受影响。虽然目前泰拉霉素国内外只有注射剂上市，通常只
司，专利名称：一种泰拉霉素肠溶颗粒的制备方法与流程）表明，该药能制成肠
溶颗粒，能保证有效成分在胃酸中不被破坏，安全到达肠道吸收，显著提高饲料
报酬，因此在此背景下，因此为保障人类用药和食品安全，有必要建立饲料中泰
拉霉素的分析方法标准。
图1泰拉霉素A和泰拉霉素B的化学结构式
目前，包括泰拉霉素在内的大环内酯类药物残留检测方法有ELISA筛选
法、薄层色谱法、气质联用法、高效液相色谱和高效液相色谱串联质谱法等。但
对于泰拉霉素最常见的检测方法是使用高效液相色谱串联质谱法对其进行检测
分析。涉及的生物组织主要有鸡肉、猪肉以及牛肉等动物组织，但对于饲料中泰
拉霉素的分析检测研究较少。鉴于目前的饲料和畜产品质量安全形势，有必要通
过研究建立能确证分析的饲料中液相色谱串联质谱分析泰拉霉素的分析方法。
2
（三）主要工作过程
1成立标准编制小组
2022年1月，浙江正明检测有限公司、宁波市农产品质量检测中心接到《饲
料中泰拉霉素的测定液相色谱-串联质谱法》国家标准修订任务后，对该标准的
具体工作进行了认真研究，确定了总体工作方案，并成立了标准修订工作组，制
定工作计划，落实人员与分工（具体见表1）。
表1标准编制组成员与分工
姓名职称承担任务
吴银良正高级工程师项目主持人，负责项目的全面工作
付岩副研究员样品收集和测定
徐峰工程师前处理方法研究，文本和编制说明修改完善
朱勇高级农艺师方法验证
马艳工程师样品收集和测定
应永飞高级畜牧师样品收集
王全胜工程师前处理方法研究、文本和编制说明修改完善
吴市学工程师样品测定和数据汇总
黄玲工程师方法验证
史西志教授试验方法研究指导
标准和文献资料，确立了标准制定的指导思想，形成了开题报告和标准草案，并
制定了初步的实验方案。
3确定标准制定技术路线，制定原则
2022年3月～2022年4月，召开了标准开题论证会，会上标准编制组介
3
展的主要工作等内容。
4进行论证实验，确定方法主要试验技术内容制定的合理性
前的实际情况，初步确定了标准的制定和相应的试验方法，形成了标准草案。之
后，2022年5月～2022年8月，工作组对标准草案进行了多次讨论研究，同
时对标准中采用的试验方法进行了研究与方法验证工作，积累了研究数据。
5编写标准征求意见稿
2022年8月～2022年9月，对方法研究过程中出现的问题和困难，标准
工作组进行了认真研究和分析，并得以解决。完善了方法的准确性和可靠性，在
此基础上完成了标准文本及编制说明的征求意见稿。
6征求意见
2022年9月～2022年10月，9月中旬形成征求意见稿后，发函20个
单位（共25份）对标准征求意见，其中回函单位20个（24份），未回函单位
0个；提出意见单位20个（24份），无意见单位0个，共提出意见38条；其
中采纳34条，部分采纳或不采纳4条。根据征求的意见对标准文本和编制说明
进行了修改完善，形成了标准文本及编制说明的预审稿。
7组织方法验证
2022年12月～2023年3月，标准制定单位在对征求意见修改后委托河
南省兽药饲料监察所、农业农村部农产品及加工品质量监督检验测试中心（北京)
和农业农村部农产品及加工品质量监督检验测试中心（杭州)3家单位进行了验
证复核，复核结果显示液相色谱串联质谱法分析饲料中泰拉霉素A定量限能达
到0.02mg/kg，不同饲料中泰拉霉素A的回收率在70.0%~110%范围内，
4
批内和批间相对标准偏差均小于15%。
8预审
2023年5月25日，召开专家预审会，专家组就标准文本和编制说明进行
了讨论，并提出修改意见，标准通过预审。提出以下修改意见：（1）范围中明
确饲料中泰拉霉素以泰拉霉素A计，并在编制说明中补充说明；（2）进一步核
实精密度要求，并在编制说明中说明；（3）进一步考察不同厂家“增强型脂质
去除固相萃取柱”的适用性；（4）按照GB/T1.1－2020、GB/T20001.4－
2015的要求规范标准文本。
审查意见处理情况：
意见1：范围中明确饲料中泰拉霉素以泰拉霉素A计，并在编制说明中补
充说明。
处理：在标准文本中第1章范围中条文的第二段更改为“本文件适用于配合
饲料、浓缩饲料、精料补充料和添加剂预混合饲料中泰拉霉素（以泰拉霉素A
计）的测定。”，并在编制说明“1.4泰拉霉素分析对象的最终选择”中说明。
意见2：进一步核实精密度要求，并在编制说明中说明。
处理：已进一步核实精密度要求，并在编制说明“（二）综述结论”中说明
最终确定精密度为：在重复性条件下，两次独立测定结果与其算术平均值的绝对
差值不大于该算术平均值的15%。
意见3：进一步考察不同厂家“增强型脂质去除固相萃取柱”的适用性。
处理：通过对于国内外各固相萃取柱商家的咨询，目前未有同类型功能的增
强型脂肪去除固相萃取柱，因此本标准最终选择了AgilentEMR-lipid柱。并在
标准文本5.11中增加脚注。
意见4：按照GB/T1.1－2020、GB/T20001.4－2015的要求规范标准
文本。
处理：已按照GB/T1.1－2020、GB/T20001.4－2015的要求规范标准
5
2023年5月，标准编制小组根据专家意见，并对标准文本和编制说明进行
了修改。再次发送专家审核后形成公开征求意见稿。
9网上公开征求意见，完善标准文本，形成送审稿
6
二、标准编制原则和主要技术内容确定的依据
（一）标准编制原则
1依据GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写规则》、
GB/T20001.4-2015《标准编写规则第4部分：试验方法标准》的要求，以
3制定后的方法性具科学性、可靠性及普遍适用性，易于推广使用。
（二）主要技术内容及其确定依据
本标准所用试剂和水，在没有注明其他要求时，均指分析纯试剂和GB/T
6682中规定的一级水。试验中所用溶液在未注明用何种溶剂配制时，均指水溶
液。
试样的制备均按GB/T14699.1抽取有代表性的饲料样品，用四分法缩减
取约200g，按照GB/T20195制备样品，粉碎后过0.425mm孔径的分析
筛，混匀，装入磨口瓶中，备用。
本标准的主要技术内容（包括技术要求和试验方法）说明如下：
1仪器条件的确定
1.1监测离子对的选择及质谱条件优化
泰拉霉素含3个碱性的氨基基团，为弱碱性化合物，在正离子模式下易加氢
形成母离子。实验采用“T”三通方式，对泰拉霉素A（购自德国Dr.Ehrenstorfer，
含量97.3%）的质谱条件进行优化(图2)。ESI+模式下，806.80>577.58、
806.80>158.22、403.90>72.14和403.90>116.22四组离子对碎片特征明
显（图2）。综合比较灵敏度及基质干扰（图3）等情况后，最终选择的577.6
和158.2两个子离子进行分析（577.6子离子与分析化学37卷第10期
7
细管电压：3.0kV；离子源温度：150℃；脱溶剂气温度：500℃；锥孔气流
速：50L/h；脱溶剂气流速：1000L/h。其它条件详见表2。
表2泰拉霉素的多反应监测（MRM）离子对、锥孔电压及碰撞能量的参考值
被测物名称监测离子对（m/z）锥孔电压（V）碰撞能量（eV）
806.8>158.2238
泰拉霉素
806.8>577.6a222
a为定量离子对。
图2泰拉霉素A两个母离子（806.8和403.9）在不同碰撞能量下的质谱图
8
图3牛精料补充料基质泰拉霉素A标准溶液多反应监测（MRM）色谱图
1.2流动相的确定
实验对流动相进行考察，考察了泰拉霉素A（0.02mg/L）在水相分别为水、
0.1%甲酸溶液和5mM乙酸胺（含0.1%甲酸溶液）分别与有机相（甲醇或乙
腈）组合按照表3的梯度进行分析，进样量10μL。当水相无甲酸时，泰拉霉
素A基本无响应。水相为0.1%甲酸溶液时，无论有机相为甲醇或乙腈泰拉霉素
A峰型均较好，响应均较高，且两者响应相差较小（图4）。当水相为5mM乙
酸胺（含0.1%甲酸溶液）时，泰拉霉素A峰型较好，但响应明显较水相为0.1%
甲酸溶液时为低（图5）。因此综合考虑，流动相确定为0.1%甲酸溶液与甲醇
体系进行分析。
表3液相梯度洗脱程序
0.09010
0.59010
3.00.31090
3.51090
3.69010
9
6.09010
图4水相为0.1%甲酸溶液时不同有机相分析MRM色谱图（上：甲醇，下：乙腈）
图5水相为5mM乙酸胺（含0.1%甲酸溶液）有机相为甲醇时MRM色谱图
10
1.3色谱柱的选择
考虑到饲料基质复杂，在方法研制过程中，实验比较了WatersACQUITY
TM
1.7μm)、CSHC18(100mm×2.1mm，1.7μm)、HSST3
(100mm×2.1mm，1.7μm)、ShieldRP18(100mm×2.1mm，1.7μm)
和BEHHilic(100mm×2.1mm，1.7μm)进行本次检测方法的开发。除HILIC
柱外，其余色谱柱按1.1.2确定的梯度和流动相进行分析，Hilic色谱柱分析时
的梯度详见表4，标准溶液浓度均为20ng/mL，Hilic色谱柱分析时用乙腈配
制，其余用0.1%甲酸溶液：甲醇=9：1配制，进样量10μL。结果详见图6。
BEHC18(100mm×
BEHC18(50mm×
，μ
2.1mm，1.7μm)2.1mm1.7m)
HSST3
CSHTMC18
ShieldRP18HILIC
11
图6不同色谱柱分析泰拉霉素A的MRM色谱图
表4HILIC色谱柱分析液相梯度洗脱程序
0.00100
0.50100
3.010090
0.3
3.510090
4.50100
6.00100
从图中可知，采用BEHC18(100mm×2.1mm，1.7μm)、BEH
C18(50mm×2.1mm，1.7μm)、CSHTMC18(100mm×2.1mm，1.7μm)
分析时峰形均较好，其余色谱柱分析时峰形均较差；同时从图3和图4中采用BEH
C18(100mm×2.1mm，1.7μm)、BEHC18(50mm×2.1mm，1.7μm)、
CSHTMC18(100mm×2.1mm，1.7μm)对泰拉霉素A分析可知，图中均有两
个峰出现，前峰峰高约为后峰峰高的5%左右，该结果是在利用与梯度洗脱初始
流动相相同溶液配制的标准溶液进样获得，为梯度条件下获得的最佳色谱分析结
果。本标准制定过程中也尝试在等度条件下（0.1%甲酸溶液：甲醇=30：70）
让泰拉霉素A快速出峰，从而避免出现两个峰的现象（图7），但该条件下基质
效应不稳定（如猪空白配合饲料经节2提取净化条件的确定后的前处理分析后基
质平均增强效应的标准偏差为75%），导致定量偏差太大，因此最终实验采用
BEHC18(50mm×2.1mm，1.7μm)和表1中水相为0.1%甲酸溶液有机相为
甲醇进行梯度分析。
12
图7等度洗脱条件下分析泰拉霉素A的MRM色谱图（左：溶剂标准溶液，
右：猪配合饲料基质匹配标准溶液）
1.4泰拉霉素分析对象的最终选择
从（二）标准制定背景中可知，泰拉霉素由13元氮杂内酯环和15元氮杂
内酯环两种同分异构体以1：9的比例组成，分别为泰拉霉素B和泰拉霉素A。
因此标准品采购时分别采购了泰拉霉素A（购自德国Dr.Ehrenstorfer，含量
97.3%）和泰拉霉素B（购自美国CatoResearchChemicalsInc，含量
87.9%）。同样条件下分析获得泰拉霉素A和泰拉霉素B的MRM色谱图，详
几乎一致，同时通过后续研究发现，两者基质效应（表9）也基本一致，考虑到
通常泰拉霉素中泰拉霉素A和泰拉霉素B的组成为9：1，且泰拉霉素A标准品
纯度高，因此泰拉霉素的分析对象确定为泰拉霉素A，测定的含量以泰拉霉素A
计。
图8泰拉霉素A（左）和泰拉霉素B（右）标准溶液的定性定量离子对MRM色谱图
13
2提取净化条件的确定
2.1提取剂的确定
实验向空白基质中添加，通过甲醇、0.25%甲酸甲醇、0.5%甲酸甲醇、乙
腈、1.0%甲酸乙腈、90%乙腈、70%乙腈进行提取来考察提取剂的种类，称样
量2.5g，添加浓度10mg/kg，提取液体积20mL，1次提取，振荡300r/min
振荡提取15min。结果表明（表5），当提取剂为甲醇、0.25%甲酸甲醇、0.5%
甲酸甲醇时，提取效率较高，回收均高于80%；而另外4种提取效率较低，除
70%乙腈回收在75.1%～79.6%之间，其余3种提取剂回收均不到40%。实
验选择0.25%甲酸甲醇进行下一步优化试验。
表5不同提取溶剂对提取效率的影响
溶液种类猪配合饲料（%）牛精料补充料（%）猪复合预混合饲料（%）
乙腈5.613.614.2
1.0%甲酸乙腈8.516.715.4
90%乙腈24.331.230.6
70%乙腈75.179.678.5
甲醇80.788.995.0
0.25%甲酸甲醇82.388.696.0
0.5%甲酸甲醇81.689.195.7
2.2提取次数的确定
实验对0.25%甲酸甲醇作为提取剂考察了1、2、3次的提取效果，每次提
取溶液用量均为20mL，由于振荡提取更方便，充分，选择振荡转速为300
r/min，每次振荡提取15min，结果如表6所示。从结果可靠可知，3种饲料
经2次和3次提取的回收均高于95.0%，2次提取效果明显优于1次提取效果，
3次提取效果仅略好于2次提取效果，因此实验选择前处理提取2次。
表6不同提取次数对提取效率的影响
得取次数猪配合饲料（%）牛精料补充料（%）猪复合预混合饲料（%）
1次82.388.696.0
2次95.796.598.5
3次97.997.898.9
14
效果，每次提取溶液用量均为20mL，振荡300r/min，结果如表7所示。从
表5结果中可知，经5min振荡提取猪配合饲料的提取回收低于95.0%，其余
594.295.398.7
1595.796.598.5
2096.296.398.6
3095.496.199.2
2.4净化条件的确定
2.4.1不同净化条件下的回收率比较
已有泰拉霉素提取后净化方式主要是固相萃取净化，净化柱有SCX、MCX
和PCX。本实验通过向空白基质中添加泰拉霉素A标准品，经0.25%甲酸甲醇提
取后，选择常用的MCX小柱（60mg/3mL）、AgilentEMR柱（300mg/3mL）
和QuEChERS方法（PSA-C18吸附剂规格100mg+100mg）进行净化条件考
察。
具体净化方法如下：
MCX小柱净化方法：吸取2.0mL提取液，全部过柱后用3mL纯水和3mL
甲醇淋洗，抽干后3mL5%氨水甲醇洗脱，收集洗脱液氮气吹干后用2mL0.1%
甲酸溶液：甲醇=9:1超声溶解30s，过滤膜后进样分析。
EMR小柱净化方法：吸取2mL提取液直接过柱，用1mL甲醇淋洗，收集
过柱液和淋洗液，50℃下用氮气吹干，加入2mL0.1%甲酸溶液：甲醇=9:1超
声溶解30s，涡旋混匀，过滤膜后进样分析。
QuEChERS净化方法：吸取3mL提取液于装有100mgPSA+100mgC18
的50mL离心管中，涡旋混合1min，静置2min，准确移取2mL上清液，50℃
15
下用氮气吹干，加入2mL0.1%甲酸溶液：甲醇=9:1超声溶解30s，过滤膜后
进样分析。
结果发现（表8），采用上述方式净化时，当提取液中泰拉霉素A的浓度为
0.5mg/L时净化过程平均回收均高于90.0%，但MCX固相萃取和EMR固相
萃取的稳定性（标准偏差）略好于QuEChERS净化方法，实验考虑到EMR过
程更加简单，因此，实验偏向于选择过EMR固相萃取柱作为净化条件。通过对
于国内外各固相萃取柱商家的咨询，目前未有同类型功能的增强型脂肪去除固相
萃取柱，因此本标准最终选择了AgilentEMR柱。
表8不同净化方式下净化过程平均回收率（n=5）
净化方式猪配合饲料（%）牛精料补充料（%）猪复合预混合饲料（%）
MCX固相萃取96.3±4.598.7±4.296.6±3.9
EMR固相萃取97.2±3.897.9±3.597.6±3.2
QuEChERS93.8±8.7102±9.391.8±6.9
2.4.2不同净化条件下的基质效应比较
基质效应是指在样品测试过程中，由待测物以外的其他物质的存在，直接或
间接影响待测物响应的现象。基质效应主要是由质谱检测器的离子化过程产生
的，在电喷雾时，基质内的组分与目标化合物共同流出喷雾针，对电荷产生竞争，
它们将产生的雾滴牢牢吸在一起，改变了带电雾滴的表面张力，影响目标物的雾
化、挥发、分裂、化学反应以及带电过程，致使进入质谱的离子减少或增加，从
而影响定量分析的可靠性和准确性。
基质效应可通过公式ME（%）=基质溶液中分析物峰面积/纯溶剂中分析物
峰面积×100%，或公式ME（%）=基质标准溶液斜率/纯溶剂标准溶液斜率
×100%来评价。ME在85%~115%之间一般认为不存在基质效应；当ME
低于85%时，则认为基质对目标化合物的响应产生抑制作用；当ME高于115%
时，则认为基质对目标化合物的响应存在增强作用。从表9（斜率比值，浓度
0.5ng/mL、1.0ng/mL、2.5ng/mL、10ng/mL、25ng/mL和50ng/mL）中
可知，3种净化方式下不同饲料的基质均呈现增强效应，其中MCX柱和EMR
的增强效应整体差异较小，均小于QuEChERS净化方法的基质增强效应，如
16
2.4.1中所言，考虑到EMR过程非常简单，因此，在基质效应同等条件下最终
选择过EMR固相萃取柱作为净化条件。
表9不同净化方式下泰拉霉素A和泰拉霉素B的基质效应
泰拉霉素A的ME（%）泰拉霉素B的ME（%）
饲料种类
EMRMCXQuEChERSEMRMCXQuEChERS
鸡配合饲料214189269220194284
鸡浓缩饲料236213312229225321
鸡预混合饲料425359486399369476
猪配合饲料242261325258257341
猪浓缩饲料146154205152166198
猪预混合饲/p>鱼配合饲料137256329147247325
鱼预混合饲料250213189261221196
牛精料补充料182174200175180210
平均值228223280227228282
2.5前处理方法的确定
结合优化后的提取剂和净化条件，最终确定的前处理方法如下：称取试样
2.5g（精确至0.01g），置于50mL离心管中，加入0.25%甲酸甲醇20mL，
300r/min振荡提取15min，9000r/min离心3min，移取上清液至另一50
mL离心管中。残渣用0.25%甲酸甲醇20mL重复提取一次，合并两次上清液，
用0.25%甲酸甲醇稀释至50mL，混匀，备用。准确移取2.0mL备用液过
EMR柱，用1mL甲醇淋洗，收集过柱液和淋洗液，于50℃下用氮气吹干，加
入2mL0.1%甲酸溶液：甲醇=9：1超声溶解30s，涡旋混匀，经0.22μm
滤膜过滤后备用。
3标准溶液有效期的确定
为确保检测方法的准确性，依据目标化合物理化性质，对其标准溶液稳定性
17
进行验证。配制1.00mg/mL标准储备溶液分装于-18℃以下冰箱冷冻保存，
分别在0天、1个月、2个月、3个月、4个月、5个月、6个月取出进行测定。
同理配制10mg/L的标准中间液，分装于-18℃以下冰箱冷冻保存，分别在0
天、1个月、2个月、3个月取出进行测定。测定时将配制的标准储备溶液和标
准中间液逐级稀释成10ng/mL标准工作液，以新配制的标准储备溶液配制系
列标准工作液，因用液相色谱质谱联用仪测定浓度。对各工作液连续进样6次
考察其稳定性，结果见表10。
表10标准溶液稳定性试验结果（n=6）
6个月0.967/
5个月0.970/
4个月0.977/
3个月0.9819.23
2个月0.9839.61
1个月0.9929.84
0天1.00010.0
从表中可知，标准中间液储存3个月后测定时，标准中间液的浓度与新配
制的标准中间液浓度相比降低超过了5%，而标准储备液储存期6个月以内测定，
标准储备液的浓度与新配制的标准储备液浓度相比降低均未超过5%，为减少试
验误差，并参照GB/T27404-2008中的“标准溶液参考有效期”的要求，同时
考虑到实际检测过程中标准储备溶液和标准中间液反复冻融次数的频率较高，最
终确定在-18℃以下冷冻保存条件下，1.00mg/mL标准储备液和10mg/L的
标准中间液有效期分别确定为6个月和2个月。
18
三、试验验证的分析
（一）高效液相色谱-串联质谱试验技术验证
1线性范围
称取空白饲料样品，按照前处理步骤进行样品前处理至氮气吹干步骤，分别
准确移取2.0mL标准系列工作溶液超声溶解残渣，配制浓度为0.5ng/mL、1.0
ng/mL、2.5ng/mL、10ng/mL、25ng/mL和50ng/mL的基质匹配标准系列工
作溶液。在优化的色谱和质谱条件下进行测定，以标准溶液浓度为横坐标，定量
具体结果见表11。
饲料种类线性方程线性范围/（ng/mL）r2
鸡配合饲料Y=10263X+769.430.5~500.9996
鸡浓缩饲料Y=11322X+1589.30.5~500.9994
鸡预混合饲料Y=20419X+3212.70.5~500.9997
猪配合饲料Y=11629X+2415.20.5~500.9993
猪浓缩饲料Y=7026.5X+865.270.5~500.9995
猪预混合饲料Y=10528X+1020.10.5~500.9997
鱼配合饲料Y=6589.5X+741.110.5~500.9995
鱼预混合饲料Y=12019X+1427.90.5~500.9991
牛精料补充料Y=8731.2X+1017.50.5~500.9994
2方法的检出限和定量限
饲料基质复杂，因此，本实验选择鸡配合饲料、猪配合饲料、鸡预混合饲料、
猪预混合饲料、鸡浓缩饲料、猪浓缩饲料、牛精料补充饲料、鱼配合饲料和鱼浓
缩饲料9类饲料作为考察对象。在上述空白饲料中添加20μg/kg的泰拉霉素A标
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准溶液，按照本标准进行试验。依据信号与噪声比例，即s/n≥3的浓度为检出
限，s/n≥10的浓度为定量限的原则，确定了本方法的检出限为10μg/kg，定
量限为20μg/kg。结果见图9~图17。
图9鸡配合饲料空白样品和添加样品（添加浓度20μg/kg）MRM色谱图
图10鸡浓缩饲料空白样品和添加样品（添加浓度20μg/kg）MRM色谱图
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图11鸡预混合饲料空白样品和添加样品（浓度20μg/kg）MRM色谱图
图12猪配合饲料空白样品和添加样品（添加浓度20μg/kg）MRM色谱图
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图13牛精料补充料空白样品和添加样品（添加浓度20μg/kg）MRM色谱图
图14猪浓缩饲料空白样品和添加样品（添加浓度20μg/kg）MRM色谱图
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图15猪预混合饲料空白样品和添加样品（添加浓度20μg/kg）MRM色谱图
图16鱼配合饲料空白样品和添加样品（添加浓度20μg/kg）MRM色谱图
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图17鱼预混合饲料空白样品和添加样品（添加浓度20μg/kg）MRM色谱图
3方法准确度及精密度考察
选取9类空白饲料样品进行加标回收率及精密度实验，添加回收实验每批次
内同一浓度做5次平行实验，进行3次重复，其中低于100mg/kg的样品用泰拉
霉素A标准溶液添加，高于等于100mg/kg的样品用泰拉霉素注射液（瑞可新）
进行添加，回收实验中，当样品的上机液浓度超过回收率线性范围时，需根据测
定浓度，用空白样品经前处理制得的样品溶液进行稀释后重新测定，直至上机液
浓度在标准曲线的线性范围内。具体添加浓度见表12。
表12饲料样品添加浓度汇总表
浓度1浓度2浓度3浓度4
（mg/kg）（mg/kg）（mg/kg）（mg/kg）
鸡配合饲料0.021.010100
鸡浓缩饲料0.021.010250
鸡预混合饲料0.021.0502500
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猪配合饲料0.021.010100
猪浓缩饲料0.021.010250
猪预混合饲料0.021.0502500
鱼配合饲料0.021.010100
鱼预混合饲料0.021.0502500
牛精料补充料0.021.010100
从回收率结果（表13～表21）看出，9种饲料在0.02~2500mg/kg添加
浓度范围内，回收率在70.0%~120%之间，批内平均回收率在81.2%~98.8%
之间，批间平均回收率在84.9%~93.9%之间，批内RSD在0.9%~10.4%之间，
批间RSD在3.2%~7.9%之间。由此可见回收率和精密度均在药物残留分析规定
要求内，说明本方法能满足饲料中泰拉霉素测定的需要。添加回收实验图谱详见