本发明涉及医药，具体涉及一种非泼罗尼滴剂及其制备方法和应用。
背景技术：
1、公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
2、非泼罗尼（fipronil），又名氟虫腈，化学名为：5-氨基-3-氰基-1-（2,6-二氯-4-三氟甲苯基）-4-三氟甲基亚磺酰基吡唑，是一种苯基吡唑类杀虫剂，作用机制是与昆虫中枢神经细胞膜上的γ-氨基丁酸（gaba）受体结合，关闭神经细胞的氯离子通道，干扰中枢神经系统的正常功能，从而使虫体的神经与肌肉长期处于兴奋状态，最终导致虫体死亡。其主要通过胃毒和触杀的方式对虫体起作用，也有一定的内吸传导作用。与传统杀虫剂相比（如苯并咪唑、氨基甲酸盐等），非泼罗尼对非靶标动物较为安全，但对人体和动物仍有一定毒性。
3、目前国内市场的驱虫产品中，法国梅瑞尔公司的福莱恩占据很大份额，其产品包括滴剂（有效成分为非泼罗尼和甲氧普烯）和喷剂（有效成分为非泼罗尼），用于驱杀犬猫体表的成年跳蚤、跳蚤卵、幼虫和蜱。其中喷剂适用于治疗跳蚤和皮肤严重感染的犬猫，滴剂可用作定期预防。其产品施用于动物皮肤表面后，有效成分随着皮脂扩散至全身体表，并储存于皮脂腺中，此后药剂不断随著皮脂腺分泌的油脂，顺着毛囊持续补充至全身体表，驱杀效力约为一个月。
4、但是发明人发现，对于需要经常接触外界复杂环境的犬、猫，驱虫需要定期进行，并且考虑到驱虫产品价格高、施用药剂时动物的顺应性差，一个月的驱杀效力显然不能满足用户需求。另外，福莱恩滴剂施用后，仍有部分药物透皮进入动物的循环系统中，具有潜在的毒副作用，且有部分动物施用后出现皮肤红肿，脱毛等现象。
技术实现思路
1、为了解决现有技术中存在的驱虫产品驱杀时效短、安全性低的技术问题，本发明公开了一种驱杀时效更长、安全性更高的非泼罗尼滴剂及其制备方法和应用，以甲氧基聚乙二醇-聚（d,l-丙交酯-co-乙交酯）（mpeg-plga）微球负载药物非泼罗尼制备滴剂，并且通过控制微球的载药、粒径、释放行为，以实现长效驱虫和提高安全性的目的。
2、具体地，本发明的技术方案如下所述：
3、在本发明的第一方面，提供一种非泼罗尼滴剂，其包含：非泼罗尼微球以及溶媒；
4、所述非泼罗尼微球包含非泼罗尼和甲氧基聚乙二醇-聚（d,l-丙交酯-co-乙交酯）（mpeg-plga）；
5、所述溶媒包含溶剂和抗氧剂。
6、在一种具体的实施方式中，所述mpeg的重均分子量为1000da~2000da；所述plga为75:25型plga，其重均分子量为10000da~80000da，优选为30000da~50000da。
7、在一种具体的实施方式中，所述非泼罗尼微球中非泼罗尼与mpeg-plga的用量比以重量比计为1：3~5。
8、在一种具体的实施方式中，所述非泼罗尼微球的粒径为1~50μm，多分散指数pdi为0.05~0.4；优选地，所述非泼罗尼微球的粒径为5~10μm，多分散指数pdi为0.1~0.35。
9、在一种具体的实施方式中，所述非泼罗尼与溶剂的用量比为50~300mg：1ml，例如100mg：1ml，150mg：1ml，200mg：1ml；所述抗氧剂用量为溶剂的0.05~0.2%，w/v。
10、优选地，所述溶剂为乙醇。
11、在一种具体的实施方式中，所述抗氧化剂选自丁基羟基甲苯（bht）、尼泊金甲酯、尼泊金丙酯、特丁基对苯二酚（tbhq）中的一种或几种；
12、优选地，所述抗氧化剂为丁基羟基甲苯（bht）。
13、考虑到微球的稳定性和释药性质，本发明非泼罗尼滴剂中，将所述非泼罗尼微球和溶媒分开保存，使用前混匀制成滴剂。
14、在本发明的第二方面，提供一种所述非泼罗尼微球的制备方法，包括以下步骤：
15、（1）将非泼罗尼与甲氧基聚乙二醇-聚（d,l-丙交酯-co-乙交酯）（mpeg-plga）溶于丙酮中，得到油相a；将聚乙烯醇（pva）溶于水中得到水相b，在高速剪切下，将油相a注入水相b中，两相混合乳化形成o/w乳液；
16、（2）将上述o/w乳液在低温下减压干燥，去除丙酮，进行微球固化，固化后，过滤去除体系中水，得到固化微球；
17、（3）将固化微球分散于聚乙烯吡咯烷酮（pvp）水溶液中，冻干即得所述非泼罗尼微球。
18、在一种具体的实施方式中，步骤（1）中所述peg的重均分子量为1000da~2000da；所述plga为75:25型plga，其重均分子量为10000da~80000da，优选为30000da~50000da。
19、在一种具体的实施方式中，所述非泼罗尼与mpeg-plga的用量比以重量比计为1:3~5。此比例范围可以获得载药量和粒径较优的微球，而高于或低于此范围，会导致溶液过于粘稠不能形成乳液，或造成微球载药量低或微球粒径不均或过大。
20、在一种具体的实施方式中，步骤（1）中，所述非泼罗尼的质量为所述丙酮的质量的10~25%，优选为10~15%。
21、在一种具体的实施方式中，步骤（1）中，所述聚乙烯醇（pva）为醇解度为88%的药用聚乙烯醇，其重均分子量范围为30000da~100000da，优选为30000da~50000da。所述聚乙烯醇（pva）的质量占水质量的百分比为0.05~2%，优选为0.08~1.2%。pva作为乳化剂，在该浓度范围内可以在o/w乳液的制备过程有效分散乳液液滴，起到稳定液滴的作用。发明人研究发现，pva分子量大小和浓度对乳液的形成和稳定有影响，上述范围较为适宜。
22、在一种具体的实施方式中，步骤（1）中，所述油相a和水相b的体积比为1:1~5，优选为1:2~3。高于该比例范围，导致粒径过小，载药量偏低，低于该比例范围，导致粒径过大且分布不均匀，进而影响药物的释放。
23、在一种具体的实施方式中，步骤（1）中，所述高速剪切的转速为5000~20000rpm，优选为10000~15000rpm。
24、在一种具体的实施方式中，步骤（2）中，所述低温下减压干燥的条件为：温度为0~25℃，真空度在0~-0.10mpa。
25、在一种具体的实施方式中，步骤（3）中，所述聚乙烯吡咯烷酮（pvp）选自型号pvpk25或pvpk30，优选为pvpk30；所述聚乙烯吡咯烷酮（pvp）在pvp水溶液的质量百分比为1~5%，优选为2~4%。聚乙烯吡咯烷酮（pvp）作为冻干保护剂，微球分散于其中，起到保护微球结构和支撑作用。因此，采用此制备方法制备的非泼罗尼微球，其组分还包括冻干保护剂。
27、在本发明的第三方面，提供一种第一方面所述非泼罗尼滴剂的制备方法，包括以下步骤：
28、（1）将抗氧化剂溶于溶剂中，得到溶媒；
29、（2）将所述溶媒加入至本发明第二方面所述非泼罗尼微球的制备方法制备得到的非泼罗尼微球中，混匀，即得所述非泼罗尼滴剂。
30、在一种具体的实施方式中，步骤（1）中的所述抗氧化剂选自丁基羟基甲苯（bht）、尼泊金甲酯、尼泊金丙酯、特丁基对苯二酚（tbhq）中的一种或多种。
31、在一种具体的实施方式中，所述非泼罗尼与溶剂的用量比为：50~300mg:1ml，例如100mg:1ml，150mg:1ml，200mg:1ml；所述抗氧剂用量为溶剂的0.05~0.2%,w/v。
32、本发明的第四方面，提供一种组合药物，其包括：组分a：第二方面所述非泼罗尼微球的制备方法制备得到的非泼罗尼微球，组分b：溶媒；两者独立保存，保存方式不限，例如可以分别包装在西林瓶或特制的便于给药的塑料瓶中。
33、本发明的第五方面，提供上述非泼罗尼滴剂或上述组合药物在制备用于预防和/或驱除哺乳动物寄生虫的药物中的应用。
34、在一种具体的实施方式中，所述寄生虫包括跳蚤、蜱。
35、在一种具体的实施方式中，所述哺乳动物包括猫科动物、犬科动物、猪、牛、马羊、驴等；优选的，所述哺乳动物为猫科动物、犬科动物。
36、本发明还提供一种用于预防和/或驱除哺乳动物寄生虫的方法，所述方法使用上述非泼罗尼滴剂或上述组合药物对哺乳动物寄生虫进行预防和/或驱除；
37、具体地，所述方法包括：使用上述非泼罗尼滴剂或者将上述组合药物中组分a和b混匀得到滴剂后，分开动物肩胛骨间的毛发，将滴剂沿脊柱滴于皮肤，至吸收完全即可。
38、本发明具有以下有益效果：
39、本发明中的非泼罗尼滴剂具有近2个月的长效释药性质，可以大幅度延长驱虫周期。
40、本发明的滴剂处方中仅含有效成分、mpeg-plga、溶剂乙醇和抗氧化剂，成分简单，降低了产品对皮肤的刺激性；并且由于微球的包载和缓慢释药特性，明显降低了施用动物进入循环系统中的药物量，进一步降低了药物带来的毒副作用，在安全性上显著优于市场上现有产品。