冠状病毒(Coronavirus)是近些年来媒体曝光率非常高的一种病毒。2002年肆虐中国的“非典型性肺炎”蔓延全球,引起人类恐慌;2012年9月世界卫生组织(WHO)就当时发现一位感染新型冠状病毒患者向全球发出警告,该病(导致肾功能衰竭的急性呼吸系统综合症)至今已确诊136例,其中死亡58人。这些都与冠状病毒有关。犬,作为人类最忠实的伴侣,也会感染冠状病毒,然而对于犬冠状病毒(CCV)有人认为临床病例很少见;有人认为其症状轻微不足挂齿;有人认为它是一个不需要接种疫苗的传染病……事实果真如此吗?
冠状病毒令世人如此瞩目,如此迷惑,到底是一种什么病原体呢?冠状病毒又称为日冕病毒,略呈球形,直径80-160nm。有囊膜,其表面覆盖有12-24nm的纤突,纤突末段呈球形,整个纤突之间保持较宽的间隙整齐规则的排列成皇冠状(见图1),故此命名。其膜表面蛋白S(刺突糖蛋白)在免疫过程中具有重要作用1。
犬冠状病毒单独感染也可导致严重致死性疾病
图2,显微镜下苏木精-伊红染色的回肠切片。绒毛严重变短,隐窝上皮变薄,坏死细胞增多。由于纤维素,蛋白类物质和红细胞的出现固有层变厚,整个小肠可见成段的坏死性肠炎病变(摘自Evermann,JVetDiagnInvest,2005)
图3,苏木精-伊红免疫组化染色显微镜下小肠切片:A,鼠抗CCV抗体染色,可见红染的CCV沿绒毛顶端分布于上皮细胞内,而未深入隐窝部分;B,阴性同型抗原对照,未见染色;C,鼠抗CPV抗体染色,隐窝扩张并有坏死的细胞屑片,但未见红染的CPV-2抗原(摘自Evermann,JVetDiagnInvest,2005)
如果出现其它病原体的合并感染(如CPV、CAV-1、产气荚膜杆菌、歪曲杆菌、沙门氏菌等)则可加重临床表现。以继发CPV感染为例,CPV感染后仅在快速分化的细胞上复制,先在淋巴组织,后在肠道隐窝上皮复制(损伤见图4B)。感染CCV时为弥补小肠绒毛上皮的损伤,扁平的隐窝上皮细胞快速分裂以修补肠绒毛上皮。这种加速增殖的隐窝上皮细胞为CPV提供了良好复制场所。因此CPV,CCV并发感染,其临床症状的严重程度要远高于任一病原体单独感染(见图5),由此可看出预防CCV和预防CPV一样重要8。
图6,接受CCV攻毒后免疫犬(试验组)和未免疫犬(对照组)粪便中IgA量比(注:OD值为入射光和透射光强度比的常用对数值,可用于检测部分溶液浓度)。攻毒后7天免疫组肠道分泌的IgA明显高于对照组
预防预防CCV感染除了远离传染源这一通用法则外,目前最好的方法还是接种疫苗。国外原来生产过弱毒疫苗但因副作用较大而停用,目前几乎都采用灭活疫苗。硕腾公司生产的疫苗接种后7天可显著升高粪便中抗CCV的IgA水平(图6)18。通过比较对照组血清学和免疫荧光抗体检查结果,免疫组血清抗体显著增加,肠道组织免疫荧光抗体检查未见CCV感染,但未免疫组血清抗体未见阳转,肠道出现不同程度的免疫荧光反应(表2)18。证实接种CCV灭活疫苗可大大阻止CCV入侵肠上皮的可能性而起到预防和保护作用。目前国内已批准上市的疫苗有卫佳捌(VanguardPlus5-CVL)除了含有灭活的CCV抗原外,还含有常见的CDV、CPV、CAV-2、CPIV及两血清型钩端螺旋体抗原。因此不仅可保护犬冠状病毒引起的肠炎,配合疫苗其它抗原,还可更好的预防其它病毒病。