根据《兽药管理条例》和《兽药注册办法》规定，经审查，批准中国农业科学院上海兽医研究所等15家单位申报的沙咪珠利等8种兽药产品为新兽药，核发《新兽药注册证书》，发布产品质量标准、说明书和标签，并发布沙咪珠利每日允许摄入量（ADI）和最高残留限量标准（MRL）（试行）及沙咪珠利等2种兽药产品残留检测方法标准（试行），自发布之日起执行。
批准北京欧博方医药科技有限公司等2家单位申报的匹莫苯丹咀嚼片变更注册，发布修订后的匹莫苯丹咀嚼片质量标准、说明书和标签，自发布之日起执行，原我部发布的本产品质量标准、说明书和标签同时废止。
批准烟台只楚制药有限公司申报的硫酸庆大霉素可溶性粉变更注册，并发布庆大霉素残留检测方法标准（试行），自发布之日起执行。质量标准、说明书和标签样稿按照《兽药质量标准》（2017年版）化学药品卷同品种执行。
特此公告。
附件：1.新兽药注册目录
2.兽药变更注册目录
3.质量标准
4.说明书和标签
5.沙咪珠利每日允许摄入量（ADI）和最高残留限量标准（MRL）（试行）及沙咪珠利残留检测方法标准（试行）
6.常山酮残留检测方法标准（试行）
7.庆大霉素残留检测方法标准（试行）
农业农村部
2020年11月5日
附件1
新兽药注册目录
新兽药名称
研制单位
类别
新兽药注册证书号
监测期
备注
沙咪珠利
中国农业科学院上海兽医研究所、山东国邦药业有限公司、湖北中牧安达药业有限公司
一类
（2020）
新兽药证字54号
5年
注册
沙咪珠利溶液
中国农业科学院上海兽医研究所、天津市中升挑战生物科技有限公司、中牧全药（南京）动物药品有限公司、山东国邦药业有限公司
新兽药证字55号
味连须
西南大学、北京中农劲腾生物技术股份有限公司、成都乾坤动物药业股份有限公司、河南后羿实业集团有限公司、重庆和美保健药业有限公司
二类
新兽药证字56号
4年
味连须散
新兽药证字57号
氢溴酸常山酮
山西美西林药业有限公司
新兽药证字58号
氢溴酸常山酮预混剂
山西美西林药业有限公司、南京惠牧生物科技有限公司
新兽药证字59号
甲氧普烯
洛阳惠中兽药有限公司、普莱柯生物工程股份有限公司、河南新正好生物工程有限公司
新兽药证字60号
复方非泼罗尼滴剂
新兽药证字61号
附件2
兽药变更注册目录
兽药名称
变更事项
匹莫苯丹咀嚼片
北京欧博方医药科技有限公司、青岛欧博方医药科技有限公司
增加1.25mg、2.5mg规格，修改质量标准
硫酸庆大霉素可溶性粉
烟台只楚制药有限公司
增加100g∶20g（2000万单位）规格
附件3（略）
附件4
沙咪珠利等9种兽药产品说明书和标签
一、沙咪珠利标签
兽用
【兽药名称】
通用名称：沙咪珠利
英文名称：Ethanamizuril
汉语拼音：Shamizhuli
【性状】本品为类白色或淡黄色粉末。
【包装规格】
【生产日期】
【生产批号】
【有效期】至
【运输注意事项】启运时注意包装要完整，运输过程中要确保容器不泄漏、不倒塌、不损坏。防暴晒，防雨淋，防高温。
【贮藏】密闭保存。
【批准文号】
【生产企业】
二、沙咪珠利溶液说明书和标签
（一）沙咪珠利溶液说明书
通用名称：沙咪珠利溶液
商品名称：
英文名称：EthanamizurilSolution
汉语拼音：ShamizhuliRongye
【主要成分】沙咪珠利
【性状】本品为微黄色澄清液体。
【药理作用】药效学沙咪珠利属于三嗪类抗球虫药，主要作用于球虫的裂殖生殖和配子生殖阶段，作用峰期为感染后3～4日。对鸡的柔嫩、堆型、毒害和巨型艾美耳球虫感染有良好的防治效果。本品长期用药可出现耐药性，与地克珠利和托曲珠利存在部分交叉耐药。
【适应证】用于预防鸡球虫病。
【用法与用量】以本品计。混饮：鸡，每1L水1ml，连用2～3日。
【不良反应】按推荐的临床用法用量使用尚未见不良反应。
【注意事项】
1.本品用水稀释后须在8小时内饮完。
2.长期使用可出现耐药性。
3.由于本品与地克珠利和托曲珠利存在部分交叉耐药，临床使用时与非三嗪类抗球虫药轮换使用。
4.蛋鸡产蛋期禁用。
5.本品体外试验血浆蛋白结合率为92%～98%，慎与血浆蛋白结合率高的药物联合使用。
【休药期】鸡7日。
【规格】1%。
【包装】100ml。
【贮藏】密封，在阴凉处保存。
【有效期】24个月。
（二）沙咪珠利溶液标签
【休药期】鸡7日；蛋鸡产蛋期禁用。
详见说明书
三、味连须标签
通用名称：味连须
汉语拼音：Weilianxu
【主要成分】味连须。
【性状】本品圆柱形，极细，向下多有分支呈树枝状，单枝味连须长1～20cm，直径0.1～0.5mm。表面灰棕色或黄褐色，较光滑，有不规则结节状隆起，末端尖细。质脆，断面皮部灰棕色，木部浅黄色或黄色，呈放射状排列。气微，味极苦。
【功能与主治】清热燥湿，泻火解毒。主治仔猪白痢。
【用法与用量】按各处方量入制剂。
【规格】
【贮藏】置通风干燥处。
【包装】
四、味连须散说明书和标签
（一）味连须散说明书
通用名称：味连须散
汉语拼音：WeilianxuSan
【性状】本品为棕黄色至棕褐色粉末；气微，味极苦。
【用法与用量】混饲：一次量，每1kg体重，仔猪1～2g，一日2次，连用3日。
【不良反应】
【贮藏】密闭，防潮。
【有效期】12个月。
（二）味连须散标签
五、氢溴酸常山酮标签
通用名：氢溴酸常山酮
英文名：HalofuginoneHydrobromide
汉语拼音：QingxiusuanChangshantong
【运输注意事项】
【贮藏】密封保存。
六、氢溴酸常山酮预混剂说明书和标签
（一）氢溴酸常山酮预混剂说明书
通用名称：氢溴酸常山酮预混剂
英文名称：HalofuginoneHydrobromidePremix
汉语拼音：QingxiusuanChangshantongYuhunji
【主要成分】氢溴酸常山酮
【性状】本品为白色至淡黄色粉末。
【药理作用】抗球虫药。本品作用于球虫的无性生殖阶段，对子孢子、第一代裂殖体和第二代裂殖体均有明显的抑杀作用。本品可抑制早期病变从而有效保护鸡的肠道免受损伤，使得球虫不能进一步发育形成大小配子而无法进行有性繁殖从而抑制卵囊形成，对鸡柔嫩、毒害、堆型、布氏和巨型艾美耳球虫均有良好的效果。鸡口服几乎不吸收，由粪便排出体外。
【适应证】用于防治鸡球虫病。
【用法与用量】以本品计。混饲：每1000kg饲料，鸡500g，连用15日。
【不良反应】安全范围较窄，较高浓度（高于2倍推荐给药剂量）混饲可引起鸡不同程度的采食下降甚至拒食。
【注意事项】（1）蛋鸡产蛋期禁用。
（2）本品安全范围较窄，药料必须充分拌匀，否则容易导致动物中毒。
（3）对鱼类，水禽及其他水生动物毒性较大，禁止使用。
（4）对皮肤和眼睛有刺激，应注意工作人员的个人防护。
（5）可在商品饲料和养殖过程中使用。
【休药期】鸡5日。
【规格】0.6%
【贮藏】密闭，阴凉干燥处保存。
（二）氢溴酸常山酮预混剂标签
七、甲氧普烯标签
通用名称：甲氧普烯
英文名称：S-Methoprene
汉语拼音：Jiayangpuxi
【运输注意事项】避光密封。
【贮藏】遮光，密封，阴凉处保存。
八、复方非泼罗尼滴剂说明书和标签
（一）复方非泼罗尼滴剂说明书
通用名称：复方非泼罗尼滴剂
英文名称：CompoundFipronilSpot-onSolutions
汉语拼音：FufangFeipoluoniDiji
【主要成分】非泼罗尼、甲氧普烯
【性状】本品为淡黄色的澄清液体。
【药理作用】非泼罗尼是一种对多种害虫具有防治效果的广谱杀虫药。与昆虫中枢神经细胞膜上的γ-氨基丁酸（GABA）受体结合，关闭神经细胞的氯离子通道，从而干扰中枢神经系统的正常功能而导致昆虫死亡。主要通过胃毒和触杀起作用，也具有一定的内吸作用。
甲氧普烯是昆虫的生长调节剂（IGR），是昆虫保幼激素的同类物，对未成熟阶段昆虫的发育有抑制作用。这种药物与保幼激素的作用机制相类似，可导致昆虫发育受阻和发育阶段的跳蚤死亡。甲氧普烯对动物体上的卵的作用机制主要包括：通过直接渗透作用穿过卵壁进入新生跳蚤卵或者通过跳蚤成虫角质上皮的吸入而进入卵内。甲氧普烯对跳蚤幼虫和蛹的发育也有很强的抑制作用。
【适应证】用于驱杀犬体表的成年跳蚤，跳蚤卵、幼虫和蜱。
【用法与用量】外用，滴于皮肤。体重10kg以下的犬使用0.67ml，体重10～20kg的犬使用1.34ml，体重20～40kg的犬使用2.68ml，体重40kg以上的犬使用2.68ml加另一相应小管。
【不良反应】舔食药液的犬可能会出现短时流涎，主要是由于药物载体中含酒精成分所致。
【注意事项】1.仅限于犬外用。
2.用时滴于犬舔不到的地方。
3.禁用于8周龄以下的犬。
4.请勿在一个月内重复使用本品。
7.动物洗澡或受太阳照射后，该药物仍有效。
8.妥善处理用过的空管。在用药部位药物吸收被吸干以前请勿触摸动物。
9.本品应置于儿童触及不到的地方。
【休药期】不需要制定。
【规格】（1）0.67ml∶非泼罗尼67mg与甲氧普烯60.3mg（2）1.34ml∶非泼罗尼134mg与甲氧普烯120.6mg（3）2.68ml∶非泼罗尼268mg与甲氧普烯241.2mg
【贮藏】遮光，在阴凉干燥处保存。
（二）复方非泼罗尼滴剂标签
九、匹莫苯丹咀嚼片说明书和标签
（一）匹莫苯丹咀嚼片说明书
宠物用
通用名称：匹莫苯丹咀嚼片
英文名称：PimobendanChewableTablets
汉语拼音：PimobendanJujuepian
【主要成分】匹莫苯丹
【性状】本品为浅棕色至棕色片，片面中部有刻痕；有牛肉香味。
药动学匹莫苯丹在体内氧化去甲基化后形成具有生物活性的代谢物，再与硫酸盐或葡萄糖醛酸结合，主要通过粪便排泄途径消除。匹莫苯丹及其活性代谢物在犬血浆中的平均蛋白结合率达90%以上。
本品以原研品匹莫苯丹咀嚼片（Vetmedin）为参比制剂，在24只健康比格犬中进行了生物等效性试验。结果显示与原研品匹莫苯丹咀嚼片（Vetmedin）具有生物等效性。
【适应证】用于治疗由心脏瓣膜关闭不全（二尖瓣和/或三尖瓣返流）或扩张型心肌病引起的犬充血性心力衰竭；用于治疗大型犬临床前扩张型心肌病（无症状，经超声心动图诊断伴随左心室收缩末期和舒张末期直径加大）；用于治疗犬临床前粘液瘤性二尖瓣疾病（无症状的心脏收缩期二尖瓣杂音和心脏增大），延缓充血性心力衰竭临床症状的发生。
【用法与用量】以匹莫苯丹计。内服：每1kg体重，犬0.25mg，一日2次。
对于体重约为5kg的犬，早、晚分别给予1.25mg的咀嚼片一片。
对于体重约为10kg的犬，早、晚分别给予2.5mg的咀嚼片一片。
对于体重约为20kg的犬，早、晚分别给予5mg的咀嚼片一片。
给药1小时后方可进食，可联合使用利尿剂（如呋塞米）；对于充血性心力衰竭患犬可长期持续给药。
3.在极少数情况，治疗犬二尖瓣疾病可能引起二尖瓣返流增加。
1.禁用于肥大型心肌病或由临床非功能性或生理性原因（如大动脉狭窄）不宜增加心输出量的患犬；由于本品主要经肝脏代谢，禁用于严重肝功能不全的患犬。
2.目前尚无用于治疗杜宾犬无症状扩张性心肌病（伴随房室纤维性颤动或持续心室性心搏过速）的试验数据。
3.本品尚未获得无症状粘液瘤二尖瓣疾病伴显著室上性或室性心律失常的研究数据。
4.对大鼠和兔子的研究表明该药对动物繁殖性能无影响，仅在母代高剂量毒性剂量下可能产生胚胎毒性，研究表明该药可通过乳汁排泄；尚未有用于怀孕或哺乳期母犬的安全性研究数据，应在兽医进行利益/风险评估指导下使用。
5.用于治疗已有糖尿病患犬时应定期测定血糖。
6.用于治疗临床前阶段的扩张性心肌病（无症状伴随左心室收缩末期和舒张末期直径增大）前，应进行综合性心脏病检查诊断（包括超声心动图及动态心电图监测等）。
7.用于治疗临床前粘液瘤二尖瓣疾病（ACVIM共识的B2阶段，无症状的二尖瓣杂音≥3/6和心脏增大），应进行全面的心脏检查（包括超声心动图和放射学检查等）。
8.治疗时建议监测心脏功能及形态。
9.药理学研究表明匹莫苯丹与强心苷类（哇巴因）药物无相互作用，在钙拮抗剂（如戊脉安和地尔硫卓）和β-拮抗剂（如心得安）的作用下，匹莫苯丹可能诱发心脏收缩性减弱。
10.不要超剂量使用。如超剂量使用，可能发生心率加快或呕吐，应立即减少剂量，并适当对症治疗。
11.在健康比格犬上进行3倍和5倍超剂量的长期暴露（6个月）研究中，部分犬出现二尖瓣增厚和左心室肥大，这些变化源于药效学作用。
12.置于儿童不可触及处。
13.施药后洗手。
14.如发生误食，应立即就医并出示产品标签或说明书。若误食，尤其是儿童，可能导致心动过速，或非体位性低血压，面色泛红和头痛。
15.任何未使用完的药品或废弃物应根据当地的要求进行处理，咨询当地兽医如何处理这些不再使用的废弃药品，这些措施应符合环境保护要求。
【规格】（1）1.25mg（2）2.5mg（3）5mg
【包装】高密度聚乙烯瓶。
【有效期】（1）24个月（1.25mg、2.5mg）（2）36个月（5mg）
匹莫苯丹咀嚼片内标签
匹莫苯丹咀嚼片外标签
附件5
沙咪珠利每日允许摄入量（ADI）和最高残留限量标准（MRL）（试行）及沙咪珠利残留检测方法标准（试行）
沙咪珠利每日允许摄入量（ADI）和最高残留限量（MRL）（试行）
申报单位根据研究数据制定了沙咪珠利的每日允许摄入量（ADI）、鸡组织中的最高残留限量（MRLs）如下表：
活性成分
残留标志物
动物品种
靶组织
MRLs
ADI：0～1.7
μg·kg-1b.w.
+
去乙酰基沙咪珠利
鸡
肌肉
100μg·kg-1
皮脂
300μg·kg-1
肝脏
200μg·kg-1
肾脏
600μg·kg-1
沙咪珠利残留检测方法标准（试行）
鸡可食性组织中沙咪珠利残留量的测定高效液相色谱-串联质谱法
1范围
本标准规定了动物源性食品中沙咪珠利残留量制样和高效液相色谱-串联质谱测定方法。
本标准适用于新鲜或冷冻鸡肌肉、皮脂、肝脏及肾脏中沙咪珠利及去乙酰基沙咪珠利残留的测定。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T1.1-2009标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写规则
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3原理
试料中的沙咪珠利及去乙酰基沙咪珠利用乙腈和10%碳酸钠溶液提取，正己烷除脂，高效液相色谱-串联质谱法检测，外标法定量。
4试剂和材料
除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682规定的一级水。
4.1试剂
4.1.1乙腈：色谱纯。
4.1.2甲醇
4.1.3甲酸：色谱纯。
4.1.4乙腈
4.1.5正己烷
4.1.6碳酸钠
4.2溶液配制
10%碳酸钠溶液：取碳酸钠10g，用水溶解并稀释至100mL，混匀。
4.3对照品
4.3.1沙咪珠利：C18H16N4O4含量≥99.5%。
4.3.2去乙酰基沙咪珠利：C16H14N4O3含量≥97.5%。
4.4标准溶液配制
4.4.1沙咪珠利和去乙酰基沙咪珠利标准贮备液（1mg/mL）：精密称取沙咪珠利和去乙酰基沙咪珠利对照品各10.0mg，分别置10mL量瓶中，用甲醇适量使溶解并稀释至刻度，配制成浓度为1.0mg/mL的沙咪珠利和去乙酰基沙咪珠利标准贮备液。4℃以下避光保存，有效期为1个月。
4.4.2沙咪珠利标准工作液（100μg/mL）：精密量取1.0mg/mL沙咪珠利标准贮备液1mL，置10mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，配成浓度为100μg/mL的标准工作液。4℃避光保存，有效期1周。
4.4.3沙咪珠利标准工作液（10μg/mL）：精密量取100μg/mL的标准工作液1.0mL，置10mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，配成浓度为10μg/mL的标准工作液。4℃避光保存，有效期1周。
4.4.4沙咪珠利标准工作液（1.0μg/mL）：精密量取10μg/mL的标准工作液1mL，置10mL量瓶中，用乙腈稀释至刻度，配成浓度分别为1.0μg/mL。4℃避光保存，有效期1周。
4.4.5沙咪珠利标准工作液（0.4μg/mL）：精密量取10μg/mL的标准工作液0.4mL，置10mL量瓶中，用乙腈稀释至刻度，配成浓度分别为0.4μg/mL。4℃避光保存，有效期1周。
4.4.6沙咪珠利标准工作液（0.2μg/mL）：精密量取1.0μg/mL的标准工作液2mL，置10mL量瓶中，用乙腈稀释至刻度，配制成浓度为0.2μg/mL的标准工作液；4℃避光保存，有效期1周。
4.4.7沙咪珠利标准工作液（0.1μg/mL）：精密量取1.0μg/mL的标准工作液1.0mL，置10mL量瓶中，用乙腈稀释至刻度，配制成浓度为0.1μg/mL的标准工作液；4℃避光保存，有效期1周。
4.4.8沙咪珠利标准工作液（0.02μg/mL）：精密量取0.2μg/mL的标准工作液1.0mL，置10mL量瓶中，用乙腈稀释至刻度，配制成浓度为0.02μg/mL的标准工作液；4℃避光保存，有效期1周。
4.4.9沙咪珠利标准工作液（0.01μg/mL）：精密量取0.1μg/mL的标准工作液1.0mL，置10mL量瓶中，用乙腈稀释至刻度，配制成浓度为0.01μg/mL的标准工作液；4℃避光保存，有效期1周。
4.4.10去乙酰基沙咪珠利标准工作液（100μg/mL）：精密量取1.0mg/mL去乙酰基沙咪珠利标准贮备液1mL，置10mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，配成浓度为100μg/mL的标准工作液。4℃避光保存，有效期1周。
4.4.11去乙酰基沙咪珠利标准工作液（10μg/mL）：精密量取100μg/mL的标准工作液1.0mL，置10mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，配成浓度为10μg/mL的标准工作液。4℃避光保存，有效期1周。
4.4.12去乙酰基沙咪珠利标准工作液（1.0μg/mL）：精密量取10μg/mL的标准工作液1mL，置10mL量瓶中，用乙腈稀释至刻度，配成浓度分别为1.0μg/mL。4℃避光保存，有效期1周。
4.4.13去乙酰基沙咪珠利标准工作液（0.4μg/mL）：精密量取10μg/mL的标准工作液0.4mL，置10mL量瓶中，用乙腈稀释至刻度，配成浓度分别为0.4μg/mL。4℃避光保存，有效期1周。
4.4.14去乙酰基沙咪珠利标准工作液（0.2μg/mL）：精密量取1.0μg/mL的标准工作液2mL，置10mL量瓶中，用乙腈稀释至刻度，配制成浓度为0.2μg/mL的标准工作液；4℃避光保存，有效期1周。
4.4.15去乙酰基沙咪珠利标准工作液（0.1μg/mL）：精密量取1.0μg/mL的标准工作液1.0mL，置10mL量瓶中，用乙腈稀释至刻度，配制成浓度为0.1μg/mL的标准工作液；4℃避光保存，有效期1周。
4.4.16去乙酰基沙咪珠利标准工作液（0.02μg/mL）：精密量取0.2μg/mL的标准工作液1.0mL，置10mL量瓶中，用乙腈稀释至刻度，配制成浓度为0.02μg/mL的标准工作液；4℃避光保存，有效期1周。
4.4.17去乙酰基沙咪珠利标准工作液（0.01μg/mL）：精密量取0.1μg/mL的标准工作液1.0mL，置10mL量瓶中，用乙腈稀释至刻度，配制成浓度为0.01μg/mL的标准工作液；4℃避光保存，有效期1周。
5仪器和设备
5.1高效液相色谱串联质谱仪。
5.2分析天平：感量0.00001g。
5.3天平：感量0.01g。
5.4均质机
5.5离心机：转速4000r/min以上。
5.6涡旋仪
5.7移液器：量程为0.5～5mL、0.1～1mL、0.02～0.2mL。
5.8具盖刻度离心管：50mL、15mL、2mL。
5.9有机滤膜：孔径0.22μm。
6试料的制备与保存
6.1试料的制备
取适量新鲜或解冻的空白或供试鸡肌肉、皮脂、肝脏、肾脏组织，绞碎并使均质。
——取均质的供试样品，作为供试试料。
——取均质的空白样品，作为空白试料。
——取均质的空白样品，添加适宜浓度的标准工作液，作为空白添加试料。
6.2试料的保存
-20℃保存。
7测定步骤
7.1提取
称取试料2.0g（准确至±0.02g）置50mL具盖离心管中，先加入10%Na2CO3溶液1mL，涡旋混匀，加入乙腈8mL，涡旋混匀，超声30min，涡旋，5000r/min离心10min，取上清液置15mL具盖离心管，用乙腈加至10mL，混匀，吸取1mL，置2mL具盖离心管中，加正己烷0.8mL，涡旋30s，5000r/min离心10min，弃上层，得提取液，精密量取提取液0.25mL于2mL具盖离心管，加水0.75mL稀释，混匀，12000r/min离心10min，取上层液体0.22μm滤膜滤过，取续滤液，供液相色谱-串联质谱仪测定。
7.2基质匹配标准曲线的制备
7.2.1肌肉、皮脂与肝脏基质匹配标准曲线的制备
7.2.2肾脏基质匹配标准曲线的制备
7.3测定
7.3.1色谱条件
色谱柱：C18（100mm×2.1mm，粒径1.7μm），或相当者。
柱温：35℃。
进样量：5mL。
流速：0.3mL/min。
流动相：A-乙腈，B-0.1%甲酸溶液。
梯度洗脱程序：见表1。
表1液相色谱梯度洗脱条件表
A%
B%
曲线
0
23
77
/
3
6
5
40
60
8
8.1
12
7.4质谱条件
离子源：电喷雾离子源。
扫描方式：正离子扫描。
检测方式：多反应监测。
毛细管电压：3.0kV。
离子源温度：150℃。
脱溶剂温度：350℃。
锥孔气流速：15L/h。
雾化气流速：800L/h；定性离子对、定量离子对、锥孔电压和碰撞能量见表2。
表2药物的定性、定量离子对及锥孔电压、碰撞能量的参考值
化合物
定量离子对
m/z
定性离子对
碰撞能量
eV
锥孔电压
V
353.1>108.1
353.1>147.1
24
56
311.2>108.1
311.2>79.9
34
32
18
7.5测定法
7.5.1定性测定
表3定性确证时相对离子丰度的最大允许误差
相对离子丰度
＞50%
＞20%至50%
＞10%至20%
≤10%
允许的最大偏差
±20%
±25%
±30%
±50%
将供试试料和标准溶液的定量离子面积之比作单点校正定量。
7.5.2定量测定
取试料溶液和相应的基质匹配标准工作液，取单点或多点进行校正，按外标法定量。标准工作溶液及试料溶液中的沙咪珠利和去乙酰基沙咪珠利的响应值均应在仪器检测的线性范围内。在上述色谱-质谱条件下，空白试料、试料添加和基质匹配标准溶液中特征离子质量色谱图见附录A。
7.6空白试验
除不加试料外，均按上述测定步骤进行。
8结果计算
试料中待测物残留按下式计算：
单点法校正：
………………………………（1）
或标准曲线校正：由
求得a和b，则：
按下式计算沙咪珠利或去乙酰基沙咪珠利的残留量：
………………………………（2）
式中：
X——试料中沙咪珠利或去乙酰基沙咪珠利的残留量，单位为微克每千克（μg/kg）；
Cs——基质匹配溶液中沙咪珠利或去乙酰基沙咪珠利的浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL）；
C——试料溶液中沙咪珠利或去乙酰基沙咪珠利的浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL）；
As——基质匹配溶液中沙咪珠利或去乙酰基沙咪珠利的峰面积；
A——试料溶液中沙咪珠利或去乙酰基沙咪珠利的峰面积；
V——样品加水稀释后体积，单位为毫升（mL）；
m——试料的质量，单位为克（g）。
注：计算结果需扣除空白值，测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留三位有效数字。
9检测方法灵敏度、准确度和精密度
9.1灵敏度
本方法中沙咪珠利与去乙酰基沙咪珠利在肌肉、皮脂、肝脏中定量限分别为10μg/kg、20μg/kg、40μg/kg。
本方法中去乙酰基沙咪珠利肾脏中定量限为40μg/kg。
9.2准确度
本方法中沙咪珠利与去乙酰基沙咪珠利的添加浓度在肌肉组织中为10μg/kg～200μg/kg时，在肝脏组织中为40μg/kg～400μg/kg时，在皮脂组织中为20μg/kg～400μg/kg时，回收率均在70%～120％范围内。
本方法中去乙酰基沙咪珠利肾脏组织中的添加浓度在40μg/kg～800μg/kg时，回收率均在70%～120％范围内。
9.3精密度
本方法批内相对标准偏差≤20%，批间相对标准偏差≤30%。
附录A
(资料性附录)
图A1鸡空白肌肉中沙咪珠利（353.1>108.1）和去乙酰基沙咪珠利（311.2>108.1）特征离子色谱图
图A2鸡空白皮脂中沙咪珠利（353.1>108.1）和去乙酰基沙咪珠利（311.2>108.1）特征离子色谱图
图A3鸡空白肾脏中去乙酰基沙咪珠利（311.2>108.1）特征离子色谱图
图A4鸡空白肝脏中沙咪珠利（353.1>108.1）和去乙酰基沙咪珠利（311.2>108.1）特征离子色谱图
图A5鸡空白肌肉中添加沙咪珠利（10μg/kg，353.1>108.1）和去乙酰基沙咪珠利（10μg/kg，311.2>108.1）特征离子色谱图
图中1为沙咪珠利色谱峰，2为去乙酰基沙咪珠利色谱峰。
图A6鸡空白皮脂中添加沙咪珠利（20μg/kg，353.1>108.1）和去乙酰基沙咪珠利（20μg/kg，311.2>108.1）特征离子色谱图
图A7鸡空白肾脏中添加去乙酰基沙咪珠利（40μg/kg，311.2>108.1）特征离子色谱图，图中1为去乙酰基沙咪珠利色谱峰。
图A8鸡空白肝脏中添加沙咪珠利（40μg/kg，353.1>108.1）和去乙酰基沙咪珠利（40μg/kg，311.2>108.1）特征离子色谱图，图中1为沙咪珠利色谱峰，2为去乙酰基沙咪珠利色谱峰。
图A9沙咪珠利（0.5μg/L，353.1>108.1）和去乙酰基沙咪珠利（0.5μg/L，311.2>108.1）肌肉基质匹配标准溶液特征离子色谱图，图中1为沙咪珠利色谱峰，2为去乙酰基沙咪珠利色谱峰。
图A10沙咪珠利（1μg/L，353.1>108.1）和去乙酰基沙咪珠利（1μg/L，311.2>108.1）皮脂基质匹配标准溶液特征离子色谱图，图中1为沙咪珠利色谱峰，2为去乙酰基沙咪珠利色谱峰。
图A11去乙酰基沙咪珠利（2μg/L，311.2>108.1）肾脏基质匹配标准溶液特征离子色谱图
图中1为去乙酰基沙咪珠利色谱峰。
图A12沙咪珠利（2μg/L，353.1>108.1）和去乙酰基沙咪珠利（2μg/L，311.2>108.1）肝脏基质匹配标准溶液特征离子色谱图图中1为沙咪珠利色谱峰，2为去乙酰基沙咪珠利色谱峰。
附件6
常山酮残留检测方法标准（试行）
鸡组织中常山酮残留量的测定（试行）液相色谱-串联质谱法
本标准规定了鸡组织中常山酮残留检测的制样和液相色谱-串联质谱测定方法。
本标准适用于鸡的皮+脂中常山酮残留量的测定。
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本标准。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本标准。
试料中残留的常山酮用乙酸乙酯提取，乙酸铵缓冲溶液萃取，正己烷脱脂，提取液经HLB固相萃取柱净化，浓缩后供液相色谱-串联质谱法测定，外标法定量。
4试剂与材料
以下所用试剂，除特别注明者外均为分析纯试剂；水为符合GB/T6682规定的一级水。
000014.1氢溴酸常山酮对照品：含量≥99.0%。
000024.2甲醇：色谱纯。
000034.3乙腈：色谱纯。
000044.4甲酸：色谱纯。
000054.5胰蛋白酶。
000064.6乙酸铵。
000074.7冰醋酸。
000084.8无水碳酸钠。
000094.9乙酸乙酯。
000104.1025mg/mL胰蛋白酶水溶液：称取胰蛋白酶5g，用水溶解并稀释至200mL。
4.110.125mol/L乙酸铵缓冲溶液：称取乙酸铵9.64g，加冰醋酸15mL，用水溶解并稀释至1000mL，混匀。
000114.1210%碳酸钠溶液：称取无水碳酸钠10g，用水溶解并稀释至100mL。
000124.130.1%甲酸溶液：量取甲酸1mL，用水稀释至1000mL，混匀。
000134.140.1%甲酸乙腈溶液：量取甲酸1mL，用乙腈稀释至1000mL，混匀。
000144.1550%乙腈溶液：量取乙腈和水按体积比50∶50，混匀。
000154.16稀释液：量取0.1%甲酸溶液和0.1%甲酸乙腈溶液按体积比90∶10，混匀。
000164.171mg/mL氢溴酸常山酮标准储备液：精密称取氢溴酸常山酮对照品10mg，置于10mL量瓶中，用50%乙腈溶液溶解并定容至刻度，制成浓度为1mg/mL的氢溴酸常山酮标准储备液。4℃避光保存，有效期6个月。
000174.181μg/mL氢溴酸常山酮标准工作液：精密移取1mg/mL氢溴酸常山酮标准储备液100μL置于100mL量瓶中，用稀释液稀释并定容至刻度，制成浓度为1μg/mL的氢溴酸常山酮标准工作液，现配现用。
4.1910μg/mL氢溴酸常山酮标准工作液：精密移取1mg/mL氢溴酸常山酮标准储备液1mL置于100mL量瓶中，用稀释液稀释并定容至刻度，制成浓度为10μg/mL的氢溴酸常山酮标准工作液，现配现用。
000185仪器和设备
000195.1液相色谱-串联质谱仪：配电喷雾离子源。
000205.2分析天平：感量0.00001g。
000215.3天平：感量0.01g。
000225.4均质机。
000235.5离心机。
000245.6恒温水浴锅。
000255.7超声波清洗器。
000265.8涡旋振荡器。
000275.9酸度计。
000285.10固相萃取装置。
000295.11氮吹仪。
000305.12HLB固相萃取柱：500mg/6mL，或相当者。
000315.13微孔滤膜：0.22μm，有机系。
000326试样的制备与保存
000336.1试料的制备
取适量新鲜或解冻的空白或供试组织，绞碎，并使均质。
——取均质后的供试样品，作为供试试料。
——取均质后的空白样品，作为空白试料。
——取均质后的空白样品，添加适宜浓度的标准工作液，作为空白添加试料。
-20℃以下保存。
7测定
称取试料2±0.05g，于50mL离心管内，加入25mg/mL胰蛋白酶水溶液2mL，用10%碳酸钠溶液调pH值至7～8，在40℃水浴锅里酶解过夜。取出放至室温，加10%碳酸钠溶液1mL，混匀，加乙酸乙酯10mL，涡动1min，在冰水混合物中静置3min，立即4℃5000r/min离心3min。将上清液转入另一个干净的离心管中，置于冰水浴中。用乙酸乙酯10mL重复提取1次，合并乙酸乙酯层，加0.125mol/L乙酸铵缓冲溶液7.5mL，涡动1min，在冰水混合物中静置3min，立即4℃5000r/min离心3min，收集水层置于冰水浴中，用0.125mol/L乙酸铵缓冲溶液7.5mL再提取乙酸乙酯层1次。合并水层，加正己烷5mL，轻微振摇20s，5000r/min离心3min，除去多余的乙酸乙酯，弃去正己烷层，下层溶液再加正己烷5mL洗涤一次，弃去正己烷，下层溶液作为备用液。
7.2净化
HLB小柱依次用甲醇3mL、水3mL和0.125mol/L乙酸铵缓冲溶液3mL活化。取全部备用液过柱，用水3mL洗涤，然后用甲醇8mL洗脱，并收集洗脱液于10mL离心管中，于45℃水浴氮气吹干。用稀释液0.5mL溶解残余物，混匀，过0.22μm滤膜后，供液相色谱-串联质谱仪测定。
7.3基质匹配标准曲线的制备
分别精密移取1μg/mL氢溴酸常山酮标准工作液2.5、5、25μL，10μg/mL氢溴酸常山酮标准工作液5、25、50μL，依次加入6份经提取和净化处理的空白试料洗脱液中，于45℃水浴氮气吹干，用稀释液0.5mL溶解残余物，混匀，配成浓度为5、10、50、100、500和1000ng/mL的基质匹配系列标准溶液，过0.22μm滤膜后，供液相色谱-串联质谱仪测定。以测得特征离子质量色谱峰面积为纵坐标，对应的标准溶液浓度为横坐标，绘制基质匹配标准曲线。
7.4测定
7.4.1液相色谱参考条件
色谱柱：C18柱（2.1mm×50mm，1.7μm），或相当者；
流动相：A：0.1%甲酸溶液；B：0.1%甲酸乙腈溶液；
梯度洗脱：梯度洗脱程序见表1；
流速：0.3mL/min；
柱温：30℃；
进样量：10μL。
00034表1梯度洗脱程序
A（%）
B（%）
梯度变化曲线
90
10
-
0.5
1.0
95
1.5
3.0
1
7.4.2质谱参考条件
离子源：电喷雾离子源；
扫描方式：正离子扫描；
检测方式：多反应监测；
电离电压：3.0kv；
离子源温度：100℃；
雾化温度：350℃；
锥孔气流速：25L/h；
雾化气流速：650L/h。
氢溴酸常山酮定性、定量离子对及对应的锥孔电压、碰撞能量见表2。
00035表2定性、定量离子对及锥孔电压、碰撞能量
定性离子对(m/z)
定量离子对(m/z)
锥孔电压(V)
碰撞能量(eV)
416.3>138.3
416.3>99.7
20
7.4.3测定法
取试料溶液和基质匹配标准溶液，作单点校准，外标法定量。试料溶液及基质匹配标准溶液中常山酮的峰面积均应在仪器检测的线性范围之内。试料溶液中的离子相对丰度与基质匹配标准溶液中的离子相对丰度相比，符合表3的要求。空白组织溶液、基质匹配标准溶液和空白添加试样溶液中特征离子质量色谱图分别见附录A中图A.1～图A.3。
00036表3试料溶液中离子相对丰度的允许偏差范围
相对丰度（%）
允许偏差（%）
＞50
±20
20～50
±25
10～20
±30
≤10
±50
00037
7.4.4空白试验
取空白试料，采用完全相同的测定步骤进行平行操作。
8结果计算和表述
鸡组织中常山酮的残留量按下式计算：
单点校准：
X——试料中常山酮的残留量，μg/kg；
A——试样溶液中常山酮的峰面积；
AS——基质匹配标准溶液中常山酮的峰面积；
CS——基质匹配标准溶液中常山酮的浓度，μg/L；
V——残余物定容体积，mL；
m——供试试料质量，g；
本方法的检测限为1.5μg/kg，定量限为5μg/kg。
本方法在5μg/kg～400μg/kg添加浓度水平上的回收率为70～120%。
本方法批内相对标准偏差≤20%，批间相对标准偏差≤20%。
00038附录A
00039（资料性附录）
00040常山酮特征离子质量色谱图
00041
图A.1空白鸡皮+脂样品常山酮特征离子质量色谱图
图A.2鸡皮+脂基质匹配样品常山酮特征离子质量色谱图（200μg/kg）
图A.3鸡皮+脂添加样品常山酮特征离子质量色谱图（200μg/kg）
附件7
庆大霉素残留检测方法标准（试行）
鸡可食性组织中庆大霉素残留检测方法
液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）法
本标准规定了鸡肝脏、肾脏、脂肪组织中庆大霉素残留检测的制样和液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）测定方法。
本标准适用于鸡肝脏、肾脏、脂肪组织中庆大霉素的残留量测定。
GB/T6682分析实验室用水规则和试验方法
试料中的庆大霉素用磷酸盐缓冲溶液提取，阳离子固相萃取柱净化，氨化甲醇溶液洗脱，氮气吹至近干。用液相色谱-串联质谱仪测定，基质匹配标准曲线校准，外标法定量。
以下所用的试剂，除特别注明者外均为分析纯试剂；水为符合GB/T6682规定的一级水。
4.1庆大霉素（Gentamicin）标准品：纯度≥94%，德国Dr.EhrenstorferGmbH公司。其中C1组分含量为31.0%，C1a组分含量为22.2%，C2+C2a组分含量为46.8%。
4.3乙腈：色谱纯。
4.4甲醇：色谱纯。
4.5三氯乙酸。
4.6乙二胺四乙酸二钠。
4.7磷酸二氢钾。
4.8阳离子固相萃取柱：规格为60mg，3mL，或相当者。
4.9氨化甲醇溶液：量取浓氨水15mL，用甲醇稀释至100mL。
4.100.3%醋酸溶液：量取醋酸0.3mL，用水稀释至100mL。
4.11磷酸盐缓冲液：称取磷酸二氢钾1.36g，用980mL水溶解，分别加入乙二胺四乙酸二钠0.15g和三氯乙酸20g，溶解混匀并稀释至1000mL，置4℃保存，有效期1个月。
4.122mol/L乙酸铵溶液：称取15.416g乙酸铵，用水溶解并稀释至100mL。
4.13流动相A（乙酸铵缓冲液）：取2mol/L乙酸铵溶液25mL，浓氨水20mL，甲酸2mL，用水定容至1000mL。
4.14庆大霉素贮备液：取庆大霉素标准品约10mg，精密称定，用水溶解并稀释成庆大霉素总组分为1mg/mL的贮备液，其中庆大霉素C1组分浓度为0.31mg/mL，庆大霉素C1a组分浓度为0.222mg/mL，庆大霉素C2+C2a组分浓度为0.468mg/mL。置20℃避光保存，现配现用。
4.15庆大霉素标准工作液：准确量取庆大霉素贮备液适量，用0.3%醋酸溶液稀释，制成庆大霉素总组分浓度为100、250、500、1000、2000、5000ng/mL的系列标准工作液，各组分对应浓度庆大霉素C1组分为31.0、77.5、155、310、620、1550ng/mL；庆大霉素C1a组分浓度为22.2、55.5、110、222、444、1110ng/mL；庆大霉素C2+C2a组分为46.8、117、234、468、936、2340ng/mL。置4℃冰箱中避光保存，现配现用。
5.1液相色谱-串联质谱仪：配电喷雾离子源（ESI），或相当者。
5.2天平：感量0.01g。
5.3分析天平：感量0.00001g。
5.4漩涡混合仪
5.5组织匀浆机
5.6高速冷冻离心机：转速不低于10000r/min。
5.7固相萃取装置
5.8氮吹仪
5.9微孔滤膜：0.22μm。
5.10塑料进样小瓶：250μL。
5.11超声波仪
6试样的制备与保存
6.1试样的制备
取新鲜或冷冻空白或供试组织，绞碎，并使均质。
——取均质后的供试样品，作为供试试样。
——取均质后的空白样品，作为空白试样。
——取均质后的空白样品，添加适宜浓度的标准工作液，作为空白添加试样。
6.2样品的保存
-20℃以下冰箱中贮存备用。
称取试样2g±0.02g，置50mL离心管中，加磷酸盐缓冲液10mL，涡漩混匀1min，超声5min，10000r/min离心10min。取上清液于另一50mL离心管中。残渣加磷酸盐缓冲液4mL，重复提取一次，合并两次提取液并稀释至15mL，涡旋混匀，作为备用液。
阳离子固相萃取柱依次用甲醇5mL和水5mL活化，取备用液7.5mL上样，依次用水5mL和甲醇5mL淋洗，抽干，用氨化甲醇溶液5mL洗脱，收集洗脱液于10mL塑料离心管中，于40℃下用氮气吹至近干，用0.3%醋酸溶液溶解并稀释至1mL，涡旋，用0.22μm滤膜过滤，滤液装塑料进样小瓶，供液相色谱-串联质谱仪测定。
7.4.1色谱条件
色谱仪：Agilent1290lnfinityII或相当者。
色谱柱：AgilentPoroshellHPH-C8（3.0mm×100mm，2.7μm），或相当者。
柱温：35℃
流速：0.4mL/min。
进样量：5μL。
流动相：A相：乙酸铵缓冲液；B相：乙腈。
线性梯度洗脱程序如表1所示。
表1线性梯度洗脱程序
0.0
92.0
8.0
6.0
60.0
40.0
6.1
2.0
98.0
7.4.2质谱条件
质谱仪：Agilent6470三重四级杆LC-MS/MS或相当者。
离子源：ESI+。
检测方式：多反应检测。
干燥气温度：250℃。
干燥气流速：7L/min。
雾化器：40psi。
鞘气流速：12L/min。
鞘气温度：350℃。
毛细管电压：3500V。
定性、定量离子对和裂解电压及碰撞能量见表2。
表2庆大霉素定性、定量离子对和裂解电压及碰撞能量
目标物
前级离子
子离子
裂解电压（V）
碰撞能量（eV）
庆大霉素C1a
450.2
322.1
159.9
庆大霉素C2
464.2
100
160.1
庆大霉素C2a
庆大霉素C1
478.2
105
7.4.3定性测定
表3定性测定时相对离子丰度的最大允许偏差
>50%
>20%至50%
>10%至20%
允许的相对偏差
7.4.4定量测定
7.5空白试验
除不加试料外，采用完全相同的测定步骤进行平行操作。
8.1标准曲线校准
将标准曲线每个组分的浓度和对应峰面积进行回归分析，然后按下式分别计算供试组织中庆大霉素各组分的残留量XC1、XC1a、XC2+C2a，再将各组分残留量相加即得到庆大霉素总组分残留量
X总（μg/kg）=XC1+XC1a+XC2+C2a
式中:
X——供试试样中被测单组分残留量（μg/kg），分别用XC1、XC1a、XC2+C2a表示；
A——供试试样处理后试样溶液中庆大霉素相应单组分的色谱峰面积；
b——标准曲线回归方程中截距；
a——标准曲线回归方程中斜率；
m——试样的质量（g）；
V1——备用液的总体积（mL）；
V2——过柱上样液的体积（mL）；
V3——残余物定容的体积（mL）；
X总——被测试样中庆大霉素总组分的残留量（μg/kg）。
8.2单点校准
按下式计算供试组织中庆大霉素单组分残留量XC1、XC1a、XC2+C2a，再将各组分残留量相加即得到庆大霉素总组分残留量。
X——试料中被测庆大霉素单组分的残留量（μg/kg），分别用XC1、XC1a、XC2+C2a表示；
CS——对照溶液中相应庆大霉素单组分的浓度（ng/mL）；
A——试样溶液中相应庆大霉素组分的色谱峰面积；
AS——对照溶液中相应庆大霉素组分的色谱峰面积；
注：计算结果需扣除空白值，测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留3位有效数字。
9检测方法灵敏度、准确度、精密度
本方法在鸡肝脏、鸡肾脏和鸡脂肪的定量限（S/N>10）为25μg/kg，庆大霉素各组分C1、C1a、C2+C2a在鸡肝脏、鸡肾脏和鸡脂肪的定量限分别为7.75μg/kg、5.55μg/kg、11.7μg/kg；检测限（S/N>3）为10μg/kg，庆大霉素各组分C1、C1a、C2+C2a在鸡肝脏、鸡肾脏和鸡脂肪的检测限分别为3.1μg/kg、2.22μg/kg、4.68μg/kg。
本方法鸡肝脏、鸡肾脏、鸡脂肪在总组分为25、50、100、200μg/kg添加浓度水平下（其中庆大霉素C1：7.75、15.5、31、62μg/kg；庆大霉素C1a：5.55、11.1、22.2、44.4μg/kg；庆大霉素C2+C2a：11.7、23.4、46.8、93.6μg/kg），庆大霉素总组分及各组分的平均回收率范围为60.38%～112.65%。
本方法鸡肝脏、鸡肾脏、鸡脂肪在总组分为25、50、100、200μg/kg添加浓度水平下（其中庆大霉素C1：7.75、15.5、31、62μg/kg；庆大霉素C1a：5.55、11.1、22.2、44.4μg/kg；庆大霉素C2+C2a：11.7、23.4、46.8、93.6μg/kg），批内变异系数RSD≤10.92%；批间变异系数RSD≤12.52%。