本发明涉及兽药制剂领域，特别涉及一种宠物用复方阿维菌素透皮溶液及其制备和使用方法，该外用的透皮溶液可用于治疗宠物因蜱虫、螨虫、虱子、跳蚤等体表寄生虫及体内线虫感染所致的寄生虫病。
背景技术：
由体表寄生虫(蜱虫、螨虫、跳蚤及虱子等)及体内线虫等感染引起的寄生虫病是宠物常见的疾病之一。各种体内外的寄生虫都会不同程度的通过夺取动物机体的营养，损害动物的组织细胞，分泌毒素，影响宠物的生长发育，并传播多种疾病。这些都严重地危害着宠物的健康，甚至威胁到人类的健康。寄生虫种类多，有效防治难度大，一些寄生虫致使动物感染发病，严重的甚至会导致动物死亡。因此，为了宠物健康以及公共卫生安全，亟需开发广谱、高效、安全的抗寄生虫药物。
阿维菌素(avermectin)是一类具有杀虫、杀螨、杀线虫活性的十六元环结构的大环内酯类抗生素，对体内、外寄生虫具有极强的杀伤活性，无抗真菌和细菌活性。阿维菌素具有结构新颖、高效、广谱、低残留和对人畜安全等特点，是一种可用于人类医药、农药及兽药领域的“三位一体”型药物(李卫平，中国药业，21(19)，108-110(2012))。目前阿维菌素应用于兽药领域的剂型有注射液、粉剂、片剂、胶囊等，尽管这些制剂可以不同程度的满足动物的用药需求，但依然存在着给药途径不方便、首过效应大、易中毒等缺点。中国专利cn201711427558.8、cn200610014920.4均公开了一种外用阿维菌素透皮剂及其制备方法，但该两项发明为单一的阿维菌素透皮剂，临床使用时仍存在局限性，如有限的抗虫谱，起效慢，不能同时满足对于寄生虫病及继发感染细菌及真菌性皮肤病的治疗需求。
随着抗生素过量使用引发的环境微生物平衡破坏以及耐药性等问题的日趋严重，抗生素减量使用计划势在必行。将多种植物源性杀虫剂与阿维菌素科学组方，通过中西结合协同增效，实现优势互补，既可高效治疗宠物体内外寄生虫病及继发的皮肤病，又能减少阿维菌素的使用量而实现减抗和生态安全。
技术实现要素：
本发明要解决的技术问题是提供一种宠物用复方阿维菌素透皮溶液及其制备和使用方法，解决现有的单一的阿维菌素透皮剂，临床使用时仍存在局限性，如有限的抗虫谱，起效慢，不能同时满足对于寄生虫病及继发感染细菌及真菌性皮肤病的治疗需求的问题。
为了解决上述技术问题，本发明的技术方案为：
一种宠物用复方阿维菌素透皮溶液，包括如下重量份原料：
阿维菌素b10.5％，除虫菊素10％～25％，土槿皮提取物1％～5％，苦楝皮提取物0.5％～5％，薄荷醇0.5％～3％，氮酮2％～8％，丙二醇3％～15％，余量为有机溶剂。
优选的，所述除虫菊素为15％～25％。
优选的，所述土槿皮提取物为2％～5％。
优选的，所述苦楝皮提取物为1％～5％。
优选的，所述薄荷醇为1％～3％。
优选的，所述氮酮为2％～6％。
优选的，所述丙二醇5％～15％。
优选的，所述有机溶剂为乙醇、聚乙二醇、丙三醇、异丙醇或乙酸乙酯中的至少一种。
一种所述的宠物用复方阿维菌素透皮溶液的制备方法，包括如下步骤：
(1)称取所需重量份2/3的有机溶剂，预热至40～50℃；
(2)加入所需重量份的丙二醇和氮酮，搅拌使其完全溶解；
(3)再加入所需重量份的阿维菌素b1、除虫菊素、土槿皮提取物、苦楝皮提取物和薄荷醇，搅拌使其完全溶解；
(4)用剩余所需重量份1/3的有机溶剂定容。
一种所述的宠物用复方阿维菌素透皮溶液的使用方法，向宠物两耳耳部内侧涂擦所述复方阿维菌素透皮溶液或沿宠物背脊线分点滴所述复方阿维菌素透皮溶液。
采用上述技术方案，通过除虫菌素、土槿皮提取物、苦楝皮提取物、阿维菌素b1以及薄荷醇协同增效，同时氮酮和丙二醇具有良好的促渗透的作用，薄荷醇作为一种多活性物质，也具有促进渗透的作用，使得本发明的复方阿维菌素透皮溶液具有良好的治疗宠物寄生虫病以及继发感染细菌和真菌性皮肤病等的效果，对宠物因寄生虫病继发感染的细菌和真菌性皮肤病有显著的效果，具有止痛消肿、消炎止痒效果，可显著改善宠物皮肤病症状；本发明的复方阿维菌素透皮溶液与单一的阿维菌素透皮溶液相比，除了在抗虫谱和抗虫活性方面有增强，还在继发性细菌性、真菌性皮肤病方面有很好的治疗效果，抗虫谱更广，抗虫活性更强；本发明为透皮溶液，透皮吸收快，起效快；本发明的制备方法简单，成本低。
具体实施方式
下面对本发明的具体实施方式作进一步说明。在此需要说明的是，对于这些实施方式的说明用于帮助理解本发明，但并不构成对本发明的限定。此外，下面所描述的本发明各个实施方式中所涉及的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以相互组合。
实施例1
一种复方阿维菌素透皮溶液，其组分成分及重量百分比为：
配制量为100ml，通过以下步骤进行制备：
(1)先称取2/3配方量的乙醇，并预热至40～50℃；
(2)依次加入配方量的丙二醇和氮酮，搅拌使完全溶解；
(3)分别准确称取配方量的阿维菌素b1，除虫菊素、土槿皮提取物、苦楝皮提取物和薄荷醇，依次加入至上述溶液中，搅拌，使各组分完全溶解；
(4)用余量乙醇定容。
实施例2
实施例3
实施例4
实施例5
(1)先称取2/3配方量的乙酸乙酯，并预热至40～50℃；
(4)用余量乙酸乙酯定容。
实施例6
(1)先称取2/3配方量的异丙醇，并预热至40～50℃；
(4)用余量异丙醇定容。
实施例7
本发明的复方阿维菌素透皮溶液对体表寄生虫的临床疗效试验
(一)试验材料
(1)试验药物：本发明实施例3所制备的复方阿维菌素透皮溶液
(2)对照药物：阿维菌素透皮溶液(含量0.5％，市售产品)
(3)试验动物：南京某流浪犬收容中心，经过体外寄生虫检查，确诊有蜱虫、跳蚤等感染的犬。
(二)试验分组及给药
试验组：10只，一次量按0.1ml/kg体重于两耳耳部内侧涂擦给药。
药物对照组：10只，一次量按0.1ml/kg体重于两耳耳部内侧涂擦给药。
(三)疗效判定
于用药前及用药后14d，每隔7天检测跳蚤及蜱虫的数量，分类计数，并记录感染寄生虫病犬症状的发生、发展、转归和消失情况。以体外寄生虫数量变化指标为主要判断标准，按下列公式分别计算每组动物每种虫体(及虫卵)的转阴率及减少率。
虫体转阴率＝虫体转阴动物数/试验动物数×100％
虫体减少率＝(驱虫前虫体数-驱虫后虫体数)/驱虫前虫体数×100％
(四)试验结果
结果如下表所示，本发明复方阿维菌素透皮溶液对犬体表寄生虫的驱杀结果表明，用药后30min，试验组瘙痒症状明显减轻，用药后2～4h可见跳蚤掉落，用药后24h，未见跳蚤和蜱虫。用药后第7d，试验组疥螨及跳蚤的虫体转阴率及虫体减少率达100％，皮肤病变消失，基本恢复正常。而药物对照组用药后第7d蜱虫和跳蚤的虫体转阴率和虫体减少率为90％，用药后第14d皮肤病变消失，基本恢复正常。
实施例8
本发明的复方阿维菌素透皮溶液对犬肠道蛔虫的临床疗效试验
(1)试验药物：本发明实施例4所制备的复方阿维菌素透皮溶液。
(2)对照药物：阿维菌素透皮溶液(含量0.5％，市售产品)。
(3)试验动物：南京某流浪犬收容中心犬，经粪便虫卵检查，选择30只供试。
阳性对照组：10只，不给药。
于给药前和给药后第7d，每只犬采集新鲜粪便约5g，用饱和盐水漂浮法检查线虫虫卵，并计算每克粪便中的虫卵数(epg)，计数统计。
根据体内线虫虫卵给药前后的变化，按以下公式计算虫卵转阴率与减少率。
虫卵转阴率＝虫卵转阴动物数/试验动物数×100％
虫卵减少率＝(驱虫前epg-驱虫后epg)/驱虫前epg×100％
结果如下表所示，本发明复方阿维菌素透皮溶液对犬肠道蛔虫的临床疗效试验表明，阳性对照组两次粪检结果均为阳性，epg无明显变化。试验组在给药后的第7d转阴率和虫卵减少率均为100.0％，优于药物对照组在给药后第7d的转阴率(85.11％)和虫卵减少率(87.94％)。
实施例9
本发明的复方阿维菌素透皮溶液对犬皮癣的临床疗效试验
(1)试验药物：本发明实施例5所制备的复方阿维菌素透皮溶液。
(3)试验动物：南京某流浪犬收容中心，患有皮癣的病犬。
试验组：45只，一次量按0.1ml/kg体重于两耳耳部内侧涂擦给药。
药物对照组：48只，一次量按0.1ml/kg体重，于两耳耳部内侧涂擦给药。
无效：与用药前相比，临床症状未减轻，甚至加重，镜检仍发现大量螨虫和真菌。
有效：症状减轻，病变区域缩小，镜检病原体减少或无，但有时可复发。
治愈：皮肤病变消失，无痒感，长出新被毛，不复发，无反弹，镜检未发现螨虫和真菌。
结果如下表所示，本发明复方阿维菌素透皮溶液对犬皮癣的临床疗效试验表明，试验组治疗效果明显优于药物对照组，重症病犬使用复方阿维菌素透皮溶液后，用药后30min，痒感明显减轻。用药后24h，病情明显得到控制，病变缩小，脱毛停止，脓疱疹消失，镜检未发现螨虫和真菌。用药后5天，患部开始长出新毛。对于轻度病犬或单纯真菌病犬用药2～3天即可恢复至正常。而药物对照组用药后3～5天症状才开始减轻，用药14天以后轻度感染的病例才开始长新毛，癣斑仍然存在，镜检仍可见真菌。
以上对本发明的实施方式作了详细说明，但本发明不限于所描述的实施方式。对于本领域的技术人员而言，在不脱离本发明原理和精神的情况下，对这些实施方式进行多种变化、修改、替换和变型，仍落入本发明的保护范围内。