目的了解安徽省部分地区硬蜱蜱种种类、蜱种分布及蜱虫携带无形体情况,为蜱传无形体防控提供参考依据。方法于2023年4月至8月,在安徽省金寨县、含山县、旌德县、巢湖市等地通过布旗法和从动物身上采集硬蜱共计630只。用体式显微镜进行形态学鉴定,设计蜱特异性引物进行蜱种分子生物学鉴定。设计无形体16SrRNA特异性引物用巢式PCR检测单只蜱虫无形体携带情况。利用MEGA11.0构建系统发育树并分析。结果安徽省金寨县微小扇头蜱占18.8%(18/96)、长角血蜱占81.2%(78/96),含山县、巢湖市均为长角血蜱,旌德县均为微小扇头蜱。长角血蜱携带无形体阳性率为30.9%(102/330),包括牛无形体1.8%(6/330)、嗜吞噬细胞无形体21.8%(72/330)和一种uncultured无形体7.3%(24/330),微小扇头蜱携带嗜吞噬细胞无形体13.6%(18/132)。牛无形体和未培养无形体在游离蜱检测出,在24.4%的寄生蜱和15.8%的游离蜱检测出嗜吞噬细胞无形体。结论安徽省调查县的蜱种包括长角血蜱和微小扇头蜱,长角血蜱和微小扇头蜱及其游离蜱和寄生蜱均携带无形体。
于2023年4月至8月期间分别从安徽省金寨县、含山县、旌德县、巢湖市等地收集游离蜱和寄生蜱。从牛、羊等家畜体表用眼科镊采集寄生蜱,包括饱血蜱和半饱血蜱;用布旗法收集草地游离蜱,共收集到硬蜱630只,包括361只游离蜱和269只寄生蜱。
PCR仪为伯乐生命医学产品(上海)有限公司,分光光度计为ThemoFisherscientific,电泳仪为上海天能,离心机为Eppendorf,琼脂糖凝胶成像仪器为上海勤翔科学仪器有限公司。
将PCR阳性产物送通用公司测序,测序结果分别与GenBank公布的蜱虫线粒体16SrRNA基因序列及无形体16SrRNA基因序列进行同源性比对,应用MEGA11.0软件进行分析并构建遗传进化树。
2.2.1蜱种分子生物学鉴定及遗传进化分析
2.2.2无形体分子生物学鉴定及遗传进化分析
2.2.3长角血蜱和微小扇头蜱携带无形体情况
上述结果中检测到120份无形体阳性标本,进一步分析其在长角血蜱和微小扇头蜱中分布情况(表3),各调查地蜱种携带无形体情况见表4。
2.2.4游离蜱和寄生蜱携带无形体情况
本研究是用单只蜱进行的无形体感染研究,我们的研究结果相对更能准确体现蜱虫的无形体实际感染率。在我们的调查中检测到的长角血蜱和微小扇头蜱中发现均携带无形体,长角血蜱作为安徽省的优势蜱种,其无形体携带率达到30.9%,可以携带牛无形体、嗜吞噬细胞无形体及未鉴定的无形体。在我省含山县的蜱虫无形体感染率高达43.33%,并且携带有3种无形体,对含山县蜱传无形体防控工作应该进一步加强。携带无形体的游离蜱对人和动物具有更大传播风险,我们的研究显示牛无形体和一种unculturedAnaplasma都在游离蜱中检测到,游离蜱和寄生蜱都携带有嗜吞噬细胞无形体。一旦到蜱虫活动高发季节,人和动物被游离蜱或寄生蜱叮咬都有较大感染无形体的风险,因此要大力宣传蜱传疾病防护知识,增强人们防护意识,减少被蜱叮咬的风险。本次调查对安徽省的蜱种分布及无形体携带有了更进一步的了解,为蜱媒疾病防控工作的开展提供了一定的参考依据。
利益冲突:无
引用本文格式:赵雪,LeratoKhakhane,陆皖晴,等.安徽省部分地区硬蜱蜱种鉴定及蜱携带无形体检测[J].中国人兽共患病学报,2024,40(4):302307.DOI:10.3969/j.issn.1002-2694.2024.00.054