根据《兽药管理条例》规定，我部组织制定了《黄芪多糖注射液中非法添加解热镇痛类、抗病毒类、抗生素类、喹诺酮类等11种化学药物（物质）检查方法》（附件1）和《肥猪散、健胃散、银翘散等中兽药散剂中非法添加氟喹诺酮类化学药物（物质）检查方法》（附件2），现予公布，自发布之日起执行。
附件：1．黄芪多糖注射液中非法添加解热镇痛类、抗病毒类、抗生素类、氟喹诺酮类等11种化学药物（物质）检查方法
2．肥猪散、健胃散、银翘散等中药散剂中非法添加氟喹诺酮类药物（物质）检查方法
中华人民共和国农业部
2012年10月17日
附件1：
黄芪多糖注射液中非法添加解热镇痛类、抗病毒类、抗生素类、
氟喹诺酮类等11种化学药物（物质）检查方法
1适用范围
本法可用于黄芪多糖注射液的检查。
2测试药物
2.1解热镇痛类：对乙酰氨基酚、安乃近、氨基比林、安替比林
2.2抗病毒类：利巴韦林、盐酸吗啉胍
2.3林可霉素
2.4喹诺酮类：诺氟沙星、氧氟沙星、环丙沙星、恩诺沙星
3检查方法
3.1薄层色谱法
取供试品1ml，加水–甲醇（1:1）至25ml，作为供试品溶液。照薄层色谱法（《中国兽药典》二〇一〇年版附录33页）试验，吸取供试品溶液3μl，点于硅胶GF254薄层板上，以乙酸乙酯–乙醇（1:1）为展开剂，展开，取出，晾干。置紫外光灯（254nm）下检视，不得检出斑点。如色谱图中Rf值约0.55、0.8、0.9处显现暗色斑点，照3.2.1项下的方法验证；如Rf值约0.35处显现暗色斑点，照3.2.3项下的方法验证；如Rf值小于0.1处显现亮蓝色斑点，照3.2.4项下的方法验证。
另将上述薄层板置碘蒸气中熏蒸后，置紫外光灯（254nm）下检视，不得检出斑点。如色谱图中Rf值约0.35处显现暗色斑点，照3.2.3项下的方法验证；如Rf值约0.6处显现暗色斑点，照3.2.2项下的方法验证。
3.2高效液相色谱法
照高效液相色谱法（《中国兽药典》二〇一〇年版附录36页）试验。
3.2.1解热镇痛类
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以磷酸盐缓冲液（取磷酸二氢钠6.0g，加水1000ml使溶解，加三乙胺1ml，用氢氧化钠试液调pH值至7.0）–甲醇（70:30）为流动相；二极管阵列检测器，采集波长范围为190nm～400nm，分辨率为1.2nm；记录229nm波长处的色谱图。
3.2.2利巴韦林
色谱条件与系统适用性试验用氢型阳离子交换树脂，磺化交联的苯乙烯–二乙烯基共聚物为填充剂；以水（用稀硫酸调节pH值至2.5±0.1）为流动相，流速为每分钟0.3ml；二极管阵列检测器，采集波长范围为190nm～400nm，分辨率为1.2nm，记录207nm波长处的色谱图。理论板数按利巴韦林峰计算应不低于3000。
3.2.3林可霉素或盐酸吗啉胍
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.02mol/L磷酸氢二铵溶液–乙腈（70:30）为流动相；二极管阵列检测器，采集波长范围为190nm～400nm，分辨率为1.2nm；记录240nm（盐酸吗啉胍）或202nm（林可霉素）波长处的色谱图。
3.2.4喹诺酮类
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（WatersAtlantisT3）；以磷酸溶液–乙腈（取磷酸3ml加水至1000ml，用三乙胺调pH值至3.0±0.1，加乙腈53ml）为流动相A，乙腈为流动相B，甲醇为流动相C，按A:B:C为85.5:7.0:7.5进行洗脱（可调节流动相B和C比例，使氧氟沙星与诺氟沙星峰分离度符合规定）；二极管阵列检测器，采集波长范围为200nm～400nm；分辨率为1.2nm；记录283nm波长处的色谱图。
称取氧氟沙星、诺氟沙星对照品各约12.5mg，分别加2%磷酸溶液–乙腈（1:1）50ml，超声处理15分钟使溶解，各取2ml，置同一容器中，加流动相A稀释至10ml，摇匀，作为系统适用性试验溶液。取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图与光谱图。氧氟沙星、诺氟沙星峰分离度应符合要求。
4结果判定
5检测限
5.1TLC法
5.1.1解热镇痛类：0.5mg/ml，在黄芪多糖注射液中含量1.25%。
5.1.2盐酸吗啉胍、林可霉素：1.0mg/ml，在黄芪多糖注射液中含量2.5%。
5.1.3利巴韦林：4mg/ml，在黄芪多糖注射液中含量10%。
5.1.4喹诺酮类：0.5mg/ml，在黄芪多糖注射液中含量1.25%。
5.2HPLC法
5.2.1解热镇痛类：8mg/ml，对应黄芪多糖注射液中含量0.4%。
5.2.2利巴韦林：2mg/ml，对应黄芪多糖注射液中含量0.15%。
5.2.3林可霉素、盐酸吗啉胍：6mg/ml，对应黄芪多糖注射液中含量0.06%。
5.2.4喹诺酮类：2mg/ml，对应黄芪多糖注射液中含量0.08%。
注：1.盐酸环丙沙星2．氧氟沙星3．恩诺沙星4．诺氟沙星5．利巴韦林6．林可霉素7．盐酸吗啉胍8．安乃近9．安替比林10．氨基比林11．对乙酰氨基酚
起草单位：中国兽医药品监察所
复核单位：山东省兽药质量检验所
新疆维吾尔自治区兽药饲料监察所
河南省兽药监察所
附件2：
肥猪散、健胃散、银翘散等中药散剂中非法添加氟喹诺酮类药物（物质）检查方法
1.1本法可用于肥猪散、健胃散、银翘散的检查。
1.2用于其他中兽药散剂检测时，需进行空白试验和检测限测定。
2检查方法
照高效液相色谱法测定（《中国兽药典》二〇一〇年版一部附录36页）。
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（WatersAtlantisT3）；以磷酸溶液–乙腈（取磷酸3.0ml加水至1000ml，用三乙胺调pH值至3.0±0.1，加乙腈53ml，摇匀）为流动相A，乙腈为流动相B，甲醇为流动相C，按A:B:C为85.5:7.0:7.5进行洗脱（可调节流动相B和C比例，使氧氟沙星与诺氟沙星峰分离度符合规定）；二极管阵列检测器，采集波长范围为200nm～400nm；分辨率为1.2nm；记录283nm波长处的色谱图。
取氧氟沙星、诺氟沙星对照品各约12.5mg，分别加2%磷酸溶液–乙腈（1:1）50ml，超声处理15分钟使溶解，各取2ml，置同一容器内，加流动相A稀释至10ml，摇匀，作为系统适用性试验溶液。取10μl，注入液相色谱仪，同时记录色谱图及光谱图。氧氟沙星与诺氟沙星主峰的分离度应符合要求。