核酸突变分析方法抉择:PCR杂交NGS?

如何快速高效进行突变体检测和鉴定是植物基因组编辑技术迅速发展面临的重要问题之一。目前植物基因组编辑突变检测方法主要包括PCR/RE、T7EI错配切割、临界退火温度PCR(ACT-PCR)、Sanger测序和二代测序(NGS)等。以上所有的检测方法都基于PCR反应,且都有各自的不足之处。PCR/

基因突变(genemutation)是遗传病和肿瘤发生的根本原因,检测与遗传病及恶性肿瘤发生有关的突变基因(mutantgene)是分子生物学,医学遗传学及肿瘤学研究的热点,它对阐明遗传病和肿瘤发生的分子生物学基础及其诊断和早期诊断具有重要\意义,分子生物学技术的发展,尤其是PCR技术的出

基因突变(genemutation)是遗传病和肿瘤发生的根本原因,检测与遗传病及恶性肿瘤发生有关的突变基因(mutantgene)是分子生物学,医学遗传学及肿瘤学研究的热点,它对阐明遗传病和肿瘤发生的分子生物学基础及其诊断和早期诊断具有重要\意义,分子生物学技术的发展,尤其是PCR技

基因突变(genemutation)是遗传病和肿瘤发生的根本原因,检测与遗传病及恶性肿瘤发生有关的突变基因(mutantgene)是分子生物学,医学遗传学及肿瘤学研究的热点,它对阐明遗传病和肿瘤发生的分子生物学基础及其诊断和早期诊断具有重要\意义,分子生物学技术的发展,尤其是PCR技术

中国微生物菌种查询网:21世纪是以分子生物学为代表的生命科学的时代,近年来,随着现代生物技术的快速发展,人类基因组计划的完成,尤其是生物化学、免疫学、生物仪器及计算机理论与技术的进步,分子生物学技术在医学、遗传学、法医学、生物学等各个领域广泛应用,新的诊断技术和方法不断涌现并被广泛应用于微生物检测

随着分子生物学技术的发展,检测基因结构和突变的方法不断涌现.尤其是PCR技术问世以后,各种与PCR相结合的基因检测技术进一步推动了基因研究的发展.如不对称PCR产物的直接测序、核糖核酸酶酶切法(Ribonucleasecleavage,RNAase)、限制性片段长度多态性分析(Restric

实时荧光定量PCR(realtimefluorogeneticquantitativePCR,FQ-PCR),是在PCR定性技术基础上发展起来的核酸定量技术。它是一种在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时检测整个PCR过程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。该

Qβ复制酶反应Kacian等于1972年首次报报Qβ复制酶催化RNA模板的自我复制功能,它能在常温30min,将其天然MDV扩增至109.1986年Chu等报道用生物标记的靶序列特异性探针,可与亲和素联接的MDV杂交,经洗脱未被结合的MDV后,再加入Qβ复制酶,扩增复制MDV拷贝,然后用溴乙锭染色检

二代测序技术能够针对数以万计的DNA分子进行测序,能够在碱基突变的水平上进行分析,测序技术的发展使得精准医学有了更加先进的技术解决方案。不同的二代测序平台的区别主要体现在测序反应的技术上,这些差别可以分为:模板制备方法(例如乳液PCR、DNA纳米球、桥式扩增、单分子模板)、序列测定方法(焦磷酸测序

医生需要综合患者的病史,症状,及各种检查的结果作出临床诊断。随着人们对疾病的病因及发病机理的认识的不断深入,临床检查的手段也在不断进步。目前看来,绝大多数疾病的发生,发展都与患者遗传背景或者其改变有关,所以临床上越来越有必要检查这种变化。这种用分子生物学方法检测患者体内遗传物质的水平或结构变化而

实时荧光定量PCR(realtimefluorogeneticquantitativePCR,FQ-PCR),是在PCR定性技术基础上发展起来的核酸定量技术。它是一种在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时检测整个PCR过程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方

1)分子生物学分析设备—基因测序仪器(管理类别:Ⅲ类)常见仪器有基因测序仪、基因测序系统等。2)分子生物学分析设备—sanger测序仪器(管理类别:Ⅱ类)常见仪器有sanger测序仪器等。3)分子生物学分析设备—核酸扩增分析仪器(管理类别:Ⅲ类)常见仪器有核酸扩

聚合酶链反应(polymerasechainreaction,PCR)是微量核酸扩增的有效工具,由于其灵敏、特异、快速等优点,在医学上已广泛应用与病毒、细菌病原体及遗传病、肿瘤的早期诊断。随着PCR技术的发展,特别是病毒或肿瘤的治疗监测、疾病的诊断、机体基因表达调控方面,不仅需要检测其存在是否

2019年7月,美国食品药品监督管理局(FDA)发布了关于抗病毒药物产品提交二代测序数据的指南。指南为抗病毒药物产品向FDA提交二代核苷酸序列分析程序以及支持耐药性评估数据提供了意见。一、背景信息为保护公共卫生、避免出现可能传染他人并导致不能通过已批准药物产品控制疾病暴发的新型耐药和交叉

针对白领族长期紧张工作状态引起的脂肪肝、肥胖症、高血脂、心血管病等慢性病进行健康筛查,及早发现潜在的危害健康危险因素,同时提出全面健康改善方案异常结果:各种病原微生物感染导致的病症以及各种不健康症状。需要检查的人群:有各种病原微生物感染者、肿瘤或者癌症患者。

核酸杂交技术是根据两条互补的核苷酸单链可以杂交结合成双链的原理所建立,用一段已知序列的放射性或非放射性标记的核苷酸单链做探针,与待检标本中的DNA杂交来探查待检标本中有无与之相互补的核酸。该方法特异性高,但敏感性低于PCR方法。本实验学习用非放射性标记物-地高辛(DIG)标记DNA片段作探针,用

其原理是核酸变性和复性理论。即双链的核酸分子在某些理化因素作用下双链解开,而在条件恢复后又可依碱基配对规律形成双链结构。杂交通常在一支持膜上进行,因此又称为核酸印迹杂交。根据检测样品的不同又被分为DNA印迹杂交(Southernblothybridization)和RNA印迹杂交(Nort

核酸杂交技术的基本原理是两条DNA链之间可以通过碱基配对而形成氢键,通常核酸杂交的检测过程主要包括以下几个步骤:将单链的目的DNA结合到膜上,然后加入单链、标记过的探针DNA,在一定的温度条件和离子浓度下使探针分子与目标DNA分子碱基配对,再洗去未结合的标记探针,检测探针和目标DNA

由于核酸分子杂交的高度特异性及检测方法的灵敏性,它已成为分子生物学中最常用的基本技术,被广泛应用于基因克隆的筛选,酶切图谱的制作,基因序列的定量和定性分析及基因突变的检测等。具有一定同源性的两条核酸单链在一定的条件下(适宜的温室度及离子强度等)可按碱基互补还原成双链。杂交的双方是待测核酸序列

一、分子生物学Promega:Promega公司是分子生物学研究工具的经典品牌,已有接近30年的历史,是生命科学这个朝阳产业中的“老字号”。该公司所特有的萤光素酶生物发光技术,灵敏度高,信号/背景比率低,在基础研究和药物筛选领域内得到广泛的应用和认可。应用范围涉及报告基因检测;细胞学活力、细胞毒作用

Promega:Promega公司是分子生物学研究工具的经典品牌,已有接近30年的历史,是生命科学这个朝阳产业中的"老字号"。该公司所特有的萤光素酶生物发光技术,灵敏度高,信号/背景比率低,在基础研究和药物筛选领域内得到广泛的应用和认可。应用范围涉及报告基因检测;细胞学活力、细胞毒作用、细胞凋亡检

治疗HIV感染的抗逆转录病毒疗法的使用在过去十年里急剧增长,而且这种疗法也是目前全球采用的终止艾滋病公共卫生威胁计划的一部分;据世界卫生组织数据显示,HIV药物耐受性的并发性增长会通过抵消抗逆转录病毒药物抑制HIV及AIDS进展的作用,从而就会破坏掉科学家们多年来的努力;因此检测患者对HIV药物

日前,英属哥伦比亚大学(以下简称英属哥大)卓越教学中心的研究人员开发了一种基于高通量测序的丙型肝炎病毒检测方法,该方法可鉴定产生耐药的病毒变种。研究人员表示,该检测方法还可进行病毒分型,是PCR、杂交和基于Sanger平台检测技术的有力补充。与传统检测方法,基于NGS的检测方法具有更佳

根据PNA的代谢稳定性,主要将其用于抑制基因表达的反义药物研究领域,国外几家制药及生物技术公司,ISIS、PE等公司均投入大量精力从事开发研究;根据其与DNA优良的杂交稳定性,PNA又被广泛用于DNA分子识别和操纵。PNA可以广泛用于病原体、遗传病检测的分子杂交、原位杂交、突变分析、抗癌、抗病毒反义

(1)Southern印迹杂交:FMRl基因5’端非编码区CGG异常扩增和其上游CpG岛异常甲基化,使特异性的甲基化酶切位点无法被甲基化敏感的限制性内切酶识别。应用甲基化敏感的限制性内切酶酶切并与探针进行杂交,分析杂交后DNA片段大小,了解CGG重复次数和CpG岛甲基化程度,从而对脆性X综合征

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