放射免疫检测(radioimmunoassay,RIA)是利用放射性核素的测量方法与免疫反应的基本原理相结合的一种放射性核素体外检测法。该法有灵敏度高、特异性强、精确度佳及样品用量少等优点,因而发展迅速。这种测试技术不仅普遍用于测定具有抗原性的蛋白质、酶和多肽激素,而且越来越广泛地用于测定许多本身无抗原性的药物。
放射免疫检测技术是开始应用较早的一项标记免疫技术,1959年由美国学者Yalow和Berson利用放射性核素的高敏感性和免疫反应的高特异性而创建。由于放射免疫检测技术的敏感性可高达10-12甚至10-15,线性范围宽(指标),在定量分析上是一次重大的突破,2人因此而荣获1977年诺贝尔生物医学奖。
放射性免疫检测技术虽然有很多优点,但也存在不少缺点。1、试剂的半衰期段,费用较高,需要用闪烁计数仪等专门的设备;2、放射性核素对人体存在着一定潜在的危害性;3、试验废物处理困难;4、放射性核素标记有时会改变某些生物物质的生理活性。
1、常用的放射性核素放射性核素依据衰变方式分α、β、γ三种,用于放射性标记的有β和γ两类;分别用液体闪烁计数器及γ计数器测定。β型:3H(最常用)、14C和32P。γ型:125I(最常用)、131I、51Cr和60Co。2、125I和3H标记物比较
3、放射性核素的选择原则高比活度、适宜半衰期、对抗原或抗体没损害、容易标记。4、放射性标记的抗原或抗体的要求纯度高、灵敏、有足够或完整的免疫活性、高亲和常数、特异性强、交叉反应率低。
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