羊小反刍兽疫病毒抗体检测试剂盒说明书
【产品名称】
通用名：
羊小反刍兽疫病毒抗体检测试剂盒
英文名：TestKitforAntibodiestoGoatPestedesPetitsRuminantsVirus（ELISA）
【包装规格】96T×1/盒、96T×2/盒【预期用途】小反刍兽疫是由小反刍兽疫病毒（PestedesPetitsRuminantsVirus，PPRV）引起的一种急性接触性传染病，其特征为口腔、舌粘膜糜烂、流泪、流鼻液。本病的易感动物为山羊，也可感染绵羊、白尾鹿等，但对牛无感染性。
本试剂用于检测山羊血清中小反刍兽疫病毒抗体，可用于小反刍兽疫疫苗免疫效果评价。
【原理】
【试剂盒组成】
序号
名称
规格（96T×1）
规格（96T×2）
1.
酶标板
96T×1
96T×2
2.
酶标记物(红盖)
11ml×1
11ml×2
3.
样品稀释液(黄盖)
50ml×1
4.
20X浓缩洗涤液
40ml×1
5.
底物液A(白盖)
6ml×1
6.
底物液B(黑盖)
7.
终止液(黄盖)
8.
阳性对照(红盖)
1.0ml×1
1.5ml×1
9.
阴性对照(绿盖)
10.
盖板膜
1张
2张
11.
自封袋
1个
12.
说明书
1份
【储存及有效期】储存于阴凉干燥处（2-8℃），有效期期12个月。
包被板开封后请于2～8℃避光保存，避免受潮。使用期限为2个月。
【适用仪器】含450nm、630nm波长的酶标仪，37℃恒温设备，可调微量移液器。【样品准备】
1.取动物全血按常规方法制备血清，要求血清清亮，无溶血、无污染。样品1周内可于2～8℃保存，长期需置-20℃保存。
2.用样品稀释液将待检血清按40倍稀释（如5μl血清加入195μl样品稀释液中，混匀）。阴、阳性对照不用稀释。
3.浓缩洗涤液使用前应恢复至室温使沉淀溶解，然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释。
【检验方法】
1.使用前将试剂盒置室温30分钟，恢复至室温。
2.取所需用量酶标板条，设空白对照1孔、阴性/阳性对照各2孔，未用的板条尽快密封，2～8℃保存。
3.空白对照孔加样品稀释液100μl；阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照100μl；样品孔每孔加入稀释后的样品100μl。
4.混匀，置37℃（推荐水浴）反应30分钟。
5.扣去孔内液体，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，重复洗涤5次，拍干。
6.每孔加酶标记物100μl（空白孔除外）。置37℃反应30分钟。
7.洗涤，同步骤5。
8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl，混匀，37℃避光反应10分钟。
9.每孔加终止液50μl，混匀，用空白孔调零，于450nm(可用630nm作参比波长）测定各孔吸光值（A值）。
【参考值】实验正常的情况下，阴性对照≤0.10，阳性对照≥0.6。【检验结果的解释】
1.样品A值≥0.38为阳性；样品A值在0.2到0.38之间为可疑；样品A值＜0.2为阴性。
2.本实验结果为阴性或可疑时表明羊只抗体水平不足，建议补打相应疫苗。
【试验方法的局限性】
该试验仅作为定性检测山羊血清、血浆中小反刍兽疫病毒抗体，根据A值高低可作抗体水平强、中、弱的粗略评估。
【注意事项】
1.实验操作时需戴手套、穿工作衣，严格健全和执行消毒隔离制度，各种实验废弃物都应按传染物处理。
2.终止液具有腐蚀性，应避免接触皮肤和衣物，如不慎接触请立即用大量自来水冲洗。
3.酶标板从冷藏环境中取出时应恢复至室温方可开袋，未用完的酶标板需放入有干燥剂的密封袋中保存。
4.浓缩洗涤液在低温时容易结晶，使用时需恢复至室温以*溶解。
5.洗涤时各孔均需加满液体，防止孔口有游离酶不能洗净。
6.用于检测的样品应保持新鲜。
7.试验结果的判定必须以酶标仪读数为准。
8.不同批号试剂组分不得混用。
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