养殖行业的源头在饲料,饲料质量的好坏直接影响乳品的优劣,因此需从源头上加以控制。饲料中最主要的污染物来自霉菌毒素,不仅会通过的新陈代新带入生乳中,产生所谓的“毒奶”,更要的是霉菌毒素会危害奶牛的健康并严重影响产奶水平,造成隐形的重大经济损失。
霉菌毒素(mycotoxins)是某些真菌在污染的粮食和谷物的生长繁殖过程中,产生的具有毒害作用的次级代谢产物,由其引起的中毒症状被称作是霉菌毒素中毒症状(mycotoxicoses)。目前,已经发现霉菌毒素的种类达400多种,其化学、生物学和毒理学性质多种多样,主要的毒性作用包括致癌作用、遗传毒性、致畸作用、肝细胞毒性、中毒性肾损害、生殖紊乱和免疫抑制。霉菌毒素的存在不仅给人类及牲畜的健康带来极大的危害,也造成了相应的经济损失。据联合国粮食与农业组织(FoodandAgricultureOrganizationoftheUnitedNations,FAO)统计,全球每年约有25%的农作物被霉菌毒素污染,约2%的农作物因污染严重而失去营养和经济价值,造成数千亿美元的经济损失。
二、现有检测方法比较
目前霉菌毒素的检测方法主要分为两大类:即确认方法和快速方法。确认方法主要基于理化仪器设备,如薄层色谱法(TLC)、气相色谱法(GC)、高压液相色谱法(HPLC)和各种联用技术如气质联用(GC-MS)、液质联用(HPLC-MS)等;快速方法主要是基于免疫化学基础上的免疫分析方法如免疫亲合柱-荧光检测(IAC-FLD)、酶联免疫吸附法(ELlSA)和胶体金免疫层析法等。
结果准确、法定认可是理化方法最大的优点,但是仪器设备价格昂贵,前处理过程复杂、操作繁琐、效率低,成本极高,因此不适用于大规模样本的筛查和日常的内控检测,一般仅用于最终的确证。酶联免疫吸附法ELISA方法和胶体金快速检测卡是企业常用的快速检测方法,但也均存在各自的优缺点:ELISA方法能灵敏度相对较高,且能定量检测,但操作过程相对复杂,对环境和人员要求高,环境干扰因素复杂,重复性较差;胶体金检测卡可以满足现场快速的要求,能在5-10min内快速测定,但是只能定性,且灵敏度较低,肉眼观察主观性较强,重复性差。
三、上海飞测霉菌毒素荧光定量快速检测系统
3.1.检测原理
当将样品滴加在加样区时,样品中的待测物与结合垫中的荧光微球标记抗体结合并通过毛细作用向前层析,当达到检测区后,检测线T线上固定的抗原与剩余的部分荧光微球标记抗体结合,检测线T线上结合的荧光微球标记抗体的量与样品中待测物的量成反比,质控线C线结合的荧光标记物样品中待测物的量无关,其它荧光标记物继续层析达到吸收区。层析结束后,采用荧光读数仪的读取T线和C线的荧光强度并计算T/C值,通过仪器内置的标准曲线即可计算出样品中待测物的含量。
采用聚苯乙烯纳米微球对稀土荧光离子铕进行包裹,通过荧光预增强技术,提升单个荧光离子的荧光强度。通过对包裹技术的优化和改良,纳米微球中铕离子的密度可提升到10万个/微球,包裹完荧光离子后,在微球表面再进行葡聚糖修饰,大大提升了微球的稳定性和对可逆环境的抗干扰性。在此基础上可开发出的荧光定量免疫层析技术灵敏度高于胶体金、有色乳胶和普通荧光免疫层析方法1-3个数量级,稳定性和精密度更好,线性范围更宽。
3.3双T线定量检测技术
目前,普通免疫层析快检产品通常采用单检测线(T线)定量方法,产品研发周期更短,生产工艺更为简单,成本也更低,但检测结果的精密度难以控制,导致结果的重复性较差。我们在单T线的基础上,增加了一条矫正T线,与质控线(C线)一起,形成“双保险”,大大提升了检测结果的精密度和重复性。