PCR的工作原理:在TaqDNA聚合酶(热稳定DNA聚合酶)的作用下,由一对特异性引物经热变性-退火-延伸反应,三个不同温度的循环处理使得DNA由少量扩增到多量的一种体外DNA扩增技术。在反应体系内,以一对人工合成的寡核苷酸作为扩增引物,第一步,模板DNA变性,以构成脱氧核糖核酸的四种脱氧核苷酸为底物,目的基因作为模板,在DNA聚合酶的作用下模板DNA经过80-90℃高温变性,使模板DNA双链经PCR扩增形成的双链解离成单链。第二步,模板DNA与引物退火(复性),模板DNA解离成单链后温度降至50-60℃,引物与模板DNA单链互补配对。第三步,引物的延伸,DNA模板-引物结合物在DNA聚合酶作用下,70-75℃以dNTP为反应原料半保留复制合成一条新的模板DNA链。这三个步骤为一个循环,2-4分钟即可完成一个循环,2-3小时就能使极微量的DNA、片段、甚至单拷贝基因复制到几百万倍,从而实现对靶DNA的放大。由于扩增碱基序列按照靶DNA复制,因此PCR反应具有高度特异性。传统的免疫学检测(如:荧光和胶体金)存在灵敏性和特异性的局限性。
无论是由病毒、细菌,还是原虫、寄生虫等引起的犬猫传染性疾病都可利用巧亦捷核酸一体机进行诊断。宠物PCR检查
巧亦捷核酸检测一体机的特异性及灵敏度可达99%以上,使用的PCR荧光探针技术不但可以检测出病毒的种类,更可以检测出样品里100个/ul数量级的病毒数量,可谓特异性极强,准确度极高!若检测出有病毒,但没有发病也要引起重视,因为检测的病毒是一些对动物机体伤害极大的病毒,或者是人畜共患病,虽然现在没有发病,并不表明以后不会发病,如果任其在体内发展,等到病毒繁殖到一定的数量后,或者机体的抵抗力突然下降,也许就会发生灾难性的爆发,对动物造成极大的伤害。宠物PCR检查
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