A为吸光度，C浓度，L为光径，ε为摩尔吸光系数，单位是L/molcm。
朗伯比尔定律的应用需要满足几个条件：
①光线为平行光；
②光线为单色光；
③溶液介质均匀；
生化仪器的分析方法
①终点法：被测物质在反应过程中完全被转变为产物，到达反应终点，根据终点吸光度的变化求出被测物浓度，称为终点法。
①全血
包括血细胞和血浆的所有成分。采集全血时，收集管中必须含有抗凝剂。常用的抗凝剂有：肝素、柠檬酸钠和乙二胺乙酸酸(EDTA)。根据不同研究需要进行选择。
②血浆
是全血经抗凝处理后，通过离心沉淀，获得的不含细胞成分的液体。含有纤维蛋白原、凝血因子等。
③血清
是全血未经过抗凝处理，血凝块聚缩释出的液体。其中没有纤维蛋白原和凝血因子。
收集全血于不含抗凝剂or含促凝剂的血液收集管中；室温/4℃让样本自然凝血30-60min，期间不能摇晃或震动；4℃，2000~3000rpm离心10-15min。
②大鼠的循环血量大约是64ml/kg。以250g的成年大鼠为例，它的循环血量大约为16ml。
④状况良好的小鼠一般采血量建议不超过循环血量的10%。有研究表明失血超过15%以上实验动物会发生血量减少性休克。以25g的成年小鼠为例，10%的循环血量大约是0.2ml。
三、不同采血管的应用
四、生化检测送样检测注意事项
1.血常规检测（检测量全血20ul，客户准备全血50ul）
①最好使用EDTA抗凝血剂；
②柠檬酸盐将稀释样本，肝素将引起细胞凝集，两者都将减少计数。
2.生化检测（检测量血清10ul/指标，客户准备血清30+（n-1）*10ul）
①肝素化血浆或血清(无抗凝血剂)样品适用于生化检测。因为同一患者的血浆与血清的检测结果不同。所以如果需要连续监测同一患者，应使用相同的样品。血浆里含有纤维蛋白原，而血清中没有(在凝血期间移除)，因此检测结果里血浆的总蛋白(和球蛋白，因为纤维蛋白原是β球蛋白)的结果比血清高。凝血期间钾从血小板中释放，因此血清钾高于血浆钾(后者结果更准确)。
②柠檬酸盐和EDTA抗凝剂不适用于生化检测，因为它们会螯合二价阳离子(钙，镁)并含有高浓度的钠(柠檬酸盐)或钾(EDTA)。即使是在轻度EDTA污染的血液样品中进行生化检测都会出现超高钾和超低钙的结果。一些酶的活性也需要二价阳离子。因此，在含有EDTA或柠檬酸盐做抗凝剂的血浆中，这些酶(例如碱性磷酸酶)的检查结果会虚假偏低。
3.凝血四项（检测量血浆100ul/指标，客户准备血浆100ul/指标或全血2ml）
①最好使用枸橼酸钠(对钙有轻度螯合作用，因此钙可以回到样本中以进行凝血筛选测定)。
②不能使用肝素(样品不会凝结)，EDTA可以使用(钙可以回到样本中)，但不是很可靠所以不推荐使用。
五、不同样本采集及送样要求
1.样本采集
①全血：取新鲜血液加入到盛有抗凝剂的管中，轻轻颠倒混匀，充分抗凝，得到全血样本。
②血清：取新鲜血液置于普通，室温条件下静置30min，待血液凝结，2000rpm离心10min，取上层淡黄色澄清液体即为血清。
③血浆：取新鲜血液加入到盛有肝素化抗凝剂的管中，颠倒混匀，充分抗凝，1000-2000rpm离心10min，取上层淡黄色透明液体即为血浆
2.样本保存及运输
①全血：血常规检测应尽量在血液采集后2h内完成，如全血标本未来得及送检，需要将标本放置于4℃以下保存一天内检测；糖化血糖蛋白检测：当天完成避免过夜；4℃运输，将样本用纸包裹起来避免直接与冰袋接触；
②血清、血浆：生化检测尽快完成，若暂时不测定，可分装冻存备用，避免反复冻融，一般4℃可保存一周，-20℃可保存半个月，-80℃可保存一个月。特殊指标对样本有较高要求除外。4度运输；干冰运输（切记反复冻融）；
3.凝血四项样本采集及送样要求
①样本采集：抽取静脉血，按照9份静脉血、1份抗凝剂的比例加入到3.8%(或3.2%)的枸橼酸钠抗凝管中，轻轻颠倒10次使之充分混匀，不得有凝块，不得形成泡沫。（蓝色管）
②样本处理：采样后应尽快分离血浆(60分钟内进行)，将标本以3000r/min离心10-15分钟，使血浆分层，取上层血浆。
③样本保存及运输：分离后的血浆-20℃以下密封可保存2周。干冰运输。
④样本用量：凝血四项单次检测样本量不可低于300ul，单项检测最好提供100ul以上，样本不可稀释。
由于RBC内高浓度成分逸出，增加血浆分析物浓度；血红蛋白（Hb）浓度升高导致的光学干扰，还可以使431～555nm波长附近的吸光度（A）值明显上升，与试剂成分发生化学反应等。溶血对免疫透射比浊法的干扰主要来自Hb本身A值的干扰。
2.常见受影响指标
①免疫散射比浊法类的指标：溶血样本的IgM、前白蛋白和类风湿因子（RF）的结果均低于对照样本；
②肌酐/尿酸：溶血对酶法测定肌酐/尿酸有明显的负干扰，且干扰作用随着溶血程度的加重而增大，这可能与Hb具有过氧化氢酶活性，Hb增加会消耗反应中更多的过氧化氢有关；溶血对尿素和CysC检测无显著影响。
3.解决方案
对于溶血，实验室可通过设置适当的副波长或采用Hb单克隆抗体处理样本，以减少干扰。
发生脂浊的血清样本中含有大量的乳糜微粒和极低密度脂蛋白，其对检测结果的干扰主要是由于乳糜微粒具有光散射的特性，会产生浊度，从而影响反应的A值或使产物的颜色发生变化。
对肌酐和尿酸测定产生负干扰，造成检测结果被低估；且TG浓度越高，干扰程度越显著。
高速离心法、血清稀释法、0.9%氯化钠溶液稀释法均可去除乳糜，其中通过超高速离心，吸取下层血清检测尿素、肌酐和尿酸，可降低TG的干扰，效果最好。
M蛋白是由浆细胞或B淋巴细胞单克隆恶性增殖产生的一种异常免疫球蛋白。M蛋白可在特定条件下形成沉淀，干扰分光光度比色法、比浊法和免疫学检测方法。
M蛋白可对血糖、γ-谷氨酰基转移酶、总胆红素、高密度脂蛋白胆固醇、CRP、免疫球蛋白等项目以及凝血功能实验、药物检测等产生明显干扰;
样本进行预稀释，降低了M蛋白的干扰。
当待测物浓度过高时，免疫散射比浊法和免疫透射比浊法均可能出现检测结果假性减低，其主要原因是产生了钩状效应。样本性状、内源性干扰、等各种干扰因素是影响检测结果准确性的重要因素。
1.盐酸利多卡因
利多卡因通过血管给药后能迅速到达全身，其中10%以原体药物随尿排出，90%经肝脏细胞色素P450系统代谢为单乙基甘氨酰二甲基苯胺（MEGX）、甘氨酰二甲基苯胺和2，6-二甲基苯胺等产物，其中MEGX在代谢过程中会产生肌氨酸（N-甲基甘氨酸）类似物N-乙酰甘氨酸（NEG），可能会参与肌氨酸的氧化反应，生成过氧化氢，造成肌酐检测结果的假性升高。
2.青霉素
青霉素是一种有机弱酸，进入机体后，可以释放H+，改变机体环境的pH值，当用干化学法检测尿蛋白时，酸碱指示剂产生阴离子与带阳离子的蛋白质结合生成复合物，但青霉素降低了尿液的pH值，没有达到酸碱指示剂的缓冲范围，无法引起试纸条的指示剂颜色变化，导致检测结果为假阴性。
3.头孢替安
有些药物会产生与分析物相似的显色反应，从而影响检验结果。有研究结果显示，头孢替安会干扰干化学法测定总胆红素水平，导致检测结果升高。这是由于头孢替安的结构与胆红素相似，与总胆红素检测干片产生红色的颜色反应，导致出现假阳性的检测结果。
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