本发明属于标本制备技术领域。具体地，涉及一种骨骼标本去肉的方法。
背景技术：
动物标本在生物学科研、教学以及科普工作中占有特别重要的地位，骨骼标本是研究动物骨骼的形态结构及其与其他器官相互关系的主要材料，动物骨骼标本不仅具有展示的功能，而且在传统的形态分类学及考古学中也具有极其重要的角色。随着遗传学的发展，研究人员往往需要从形态和遗传两方面进行分类，这就需要各种动物的骨骼标本用于数据支持，因此，动物骨骼标本的制作显得尤为重要。
技术实现要素：
本发明要解决的技术问题是克服上述现有技术的不足，提供一种骨骼标本去肉的方法，通过使用合理比例的碱性蛋白酶与脱脂剂，恒温浸泡去除大部分软组织的骨骼，用此方法处理后的骨骼干净且完整，避免了骨骼的损坏。
本发明上述目的通过以下技术方案实现：
一种骨骼标本去肉的方法，包括以下步骤：
s1.剔除动物尸体85%～90%的软组织，保留骨骼部分，然后将骨骼分为四肢、头骨、胸廓、腰椎及髋骨部分，分别封装；
s2.将蛋白酶、脱脂剂和水按20～50：1～2：2000～2100的质量比混合溶液后，进行恒温水浴；
s3.将步骤s1封装好的骨骼分别放入步骤s2的混合溶液中，使得混合溶液刚好淹没骨骼，浸泡4～5h，用高压水冲去软组织，再剔除骨骼上的杂质；
s4.将步骤s3的骨骼放入步骤s2的混合溶液中，浸泡至骨骼表面无杂质，取出骨骼，用高压水冲去软组织，将骨骼用洗涤剂洗干净，即可。
所述软组织是指内脏、肌肉、油脂。
所述水为清水。
所述高压水是指通过高压水发生装置将水加压至10～25mpa，再通过具有细小孔径的喷射装置转换为高速的微细“水射流”。
优选地，步骤s2中，蛋白酶、脱脂剂和水的质量比为30～45：1～2：2000～2050。
更优选地，步骤s2中，蛋白酶、脱脂剂和水的质量比为40：1：2000。
优选地，步骤s2中，所述蛋白酶的浓度为0.95%～2.5%。
更优选地，步骤s2中，所述蛋白酶的浓度为1.5%～2.5%。
最优选地，步骤s2中，所述蛋白酶的浓度为2%。
优选地，步骤s2中，所述脱脂剂的浓度为0.05%～0.1%。
更优选地，步骤s2中，所述脱脂剂的浓度为0.05%。
优选地，步骤s2中，所述蛋白酶选自碱性蛋白酶、酸性蛋白酶、中性蛋白酶中的一种或几种；所述脱脂剂选自碱性脱脂剂、乳液脱脂剂、溶剂脱脂剂中的一种或几种。
更优选地，步骤s2中，所述蛋白酶为碱性蛋白酶；所述脱脂剂为碱性脱脂剂。
更进一步优选地，所述碱性蛋白酶为诺维信蛋白酶；所述碱性脱脂剂为皮毛脱脂剂。
优选地，步骤s2中，所述恒温水浴的条件为：于55～60℃恒温水浴4～5h。
优选地，步骤s3中，所述骨骼上的杂质包括韧带、脊髓和大脑。
优选地，步骤s4中，所述洗涤剂的浓度为1.0%～2%。
更优选地，步骤s4中，所述洗涤剂的浓度为1.0%。
优选地，步骤s4中，所述洗涤剂为粉体洗涤剂、液体洗涤剂或固体洗涤剂的一种或几种。
更优选地，步骤s4中，所述洗涤剂为液体洗涤剂。
与现有技术相比，本发明的有益效果在于：
具体实施方式
以下结合具体实施例来进一步说明本发明，但实施例并不对本发明做任何形式的限定。除非特别说明，本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试剂、方法和设备。
除非特别说明，以下实施例所用试剂和材料均为市购。
诺维信蛋白酶为诺维信蛋白酶1.6（protamex1.6）；皮毛脱脂剂，购买于山东冠县立润日化有限公司。
实施例1一种骨骼标本去肉的方法
（1）利用手术刀剔除动物尸体85%～90%的软组织，保留骨骼部分，然后经骨骼分为四肢、头骨、胸廓、腰椎及髋骨部分，分别用网袋封装；
（2）配置溶液：按诺维信蛋白酶：皮毛脱脂剂：清水=40：1：2000的质量比配制溶液；将该溶液放于60℃恒温水浴锅中4h，直至溶液温度恒定；其中，诺维信蛋白酶的浓度为2%，皮毛脱脂剂的浓度为0.05%；
（4）再次将骨骼放入溶液中，2h之后观察软组织去除效果；若效果不佳则继续消化，直至骨骼表面无明显杂质，取出骨骼，用压力水枪冲去软组织，将骨骼用浓度为1.0%的洗涤剂洗干净，即可得到完整、干净的骨骼。
实施例2一种骨骼标本去肉的方法
（2）配置溶液：按碱性蛋白酶：碱性脱脂剂：清水=30：1：2050的质量比配制溶液；将该溶液放于55℃恒温水浴锅中5h，直至溶液温度恒定；其中，碱性蛋白酶的浓度为1.5%，碱性脱脂剂的浓度为0.1%；碱性蛋白酶和碱性脱脂剂可市购得到；
（4）再次将骨骼放入溶液中，1h之后观察软组织去除效果；若效果不佳则继续消化，直至骨骼表面无明显杂质，取出骨骼，用压力水枪冲去软组织，将骨骼用浓度为2%的洗涤剂洗干净，即可得到完整、干净的骨骼。
实施例3一种骨骼标本去肉的方法
（2）配置溶液：按中性蛋白酶：溶剂脱脂剂：清水=45：2：2000的质量比配制溶液；将该溶液放于60℃恒温水浴锅中5h，直至溶液温度恒定；其中，中性蛋白酶的浓度为2.5%，溶剂脱脂剂的浓度为0.08%；中性蛋白酶和溶剂脱脂剂可市购得到；
实施例4一种骨骼标本去肉的方法
（2）配置溶液：按酸性蛋白酶：乳液脱脂剂：清水=20：1：2100的质量比配制溶液；将该溶液放于60℃恒温水浴锅中5h，直至溶液温度恒定；其中，酸性蛋白酶的浓度为0.95%，乳液脱脂剂的浓度为0.5%；
（4）再次将骨骼放入溶液中，3h之后观察软组织去除效果；若效果不佳则继续消化，直至骨骼表面无明显杂质，取出骨骼，用压力水枪冲去软组织，将骨骼用浓度为2%的洗涤剂洗干净，即可得到完整、干净的骨骼。
实施例5不同蛋白酶浓度对去肉效果的影响
1、方法：取狗（8～10kg）、猫（4～6kg）、猪（10～15kg）尸体各5个，依次使用0.1%、0.95%、1.5%、2%、2.5%的碱性蛋白酶按实施例1的方法进行去肉处理。
2、结果
1、方法：
（1）取5具猪（10～15kg）尸体，编号1号、2号、3号、4号、5号，将5具尸体去除大部分肌肉，分别将骨骼分为四肢、头骨、胸廓、腰椎、髋骨，用纱网袋封装；
实验发现，1号骨骼中，所有骨骼均没有去肉干净；2号骨骼中，头骨上颌部位还存有部分软组织，但其他骨骼依然没有去肉干净，尤其四肢，韧带的处理效果甚微；3号骨骼中，头骨表面无明显杂质，但是颅腔内脑组织依旧完整，腰椎骨以及髋骨部分均剩余较少部分软组织，但是四肢部分的韧带依旧处理不干净；4号骨骼中，头骨部分已经出现枕骨脱落迹象，脑组织体积变小，仍然存在于颅腔中，牙齿部分脱落，胸廓、腰椎脊髓仍然存在，髋骨部分无明显杂质；5号骨骼中，头骨部分枕骨完全脱落，脑组织脱落，牙齿等已经大部分脱落，下颌骨分为两半，腰椎，胸廓的椎间盘部分脱落，髋骨分为两半，部分小尾骨出现轻微的损坏，但是四肢的关节部分韧带还是没有完全脱落。
再次将骨骼放入溶液中，1h之后观察去除效果，发现头骨已经处理干净，取出用洗涤剂冲洗干净，其他部分仍有部分残留，再过1h之后观察，发现胸廓、腰椎、髋骨几部分已经处理干净，取出用洗涤剂冲洗干净，四肢部分由于关节位置韧带，处理仍有残留，再过1h后观察效果，发现四肢已经处理干净，取出用洗涤剂冲洗干净。
实施例7蛋白酶、脱脂剂和水的不同质量比对去肉效果的影响
（1）取9具狗尸体，分别编号后参考实施例1的方法处理骨骼，其中其他条件与实施例1的方法相同，观察诺维信蛋白酶、皮毛脱脂剂和水的不同质量比对去肉效果的影响。
表1蛋白酶、脱脂剂和水的不同质量比对去肉效果的影响
实验发现，蛋白酶和脱脂剂联合用于去肉，且蛋白酶、脱脂剂和水的质量比为20：1：2000，去肉效果较好，50：1：2000时，去肉效果较好，但是骨骼较薄部位且四肢等骨骼出现骨端脱落现象；当蛋白酶、脱脂剂和水的质量比为30：1：2000，去肉效果更好，45：1：2000时，去肉效果更好，但是骨骼同样出现骨缝等部位出现开裂现象；当蛋白酶、脱脂剂和水的质量比为40：1：2000时，去肉效果最好。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其它的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。