FelineInfectiousPeritonitisVirus（FIPV）猫传染性腹膜炎病毒（猫传腹病毒）染料法荧光定量PCR试剂盒
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穿山甲PCR鉴定试剂盒BES28163GDK
￥2990.00
昆布PCR鉴定试剂盒BES28164GDK
海金沙PCR鉴定试剂盒BES28162GDK
猫传染性腹膜炎病毒（猫传腹病毒）染料法荧光定量PCR试剂盒
【产品名称】
英文名称：FelineInfectiousPeritonitisVirus（FIPV）
中文名称：猫传染性腹膜炎病毒（猫传腹病毒）染料法荧光定量PCR试剂盒
【包装规格】
50T/盒
【检验原理】
本试剂盒采用SYBRGreen染料法实时荧光PCR技术，针对猫传染性腹膜炎病毒（猫传腹病毒）（FIPV）的基因高度保守区域设计特异性引物，用荧光PCR技术对猫传染性腹膜炎病毒（猫传腹病毒）（FIPV）的核酸进行体外扩增检测，在反应体系中含猫传染性腹膜炎病毒（猫传腹病毒）（FIPV）核酸模板的情况下，PCR反应得以进行并释放荧光信号，利用仪器对PCR过程中相应通道的信号强度进行实时监测和输出，实现检测结果的定性、定量分析。
【试剂组成】
名称
规格
FIPV扩增液
50μL×1管
FIPV反应液
950μL×1管
FIPV阳性质控品
FIPV阴性质控品
说明书
1份
说明：1）不同批号的试剂盒组分不可交互使用。2）试剂盒内各试剂组份足够包装规格所标示的检测次数。
【储存条件及有效期】
-20℃±5℃，避光保存、运输、反复冻融少于7次，有效期12个月。
【适用仪器】
ABI、MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、eppendorf等系列荧光定量PCR检测仪。
自备：无DNA/RNA酶的1.5mL离心管，0.2mLPCR反应管，滤芯吸头(规格:10μL，200μL，1000μL)，离心机，振荡混合器，各种规格的移液器。
【样品要求】
1.根据实际情况采样，胃液分泌物、胃液呕吐物以及样品培养物作为检测样本，具体参考《临床微生物样本采集规范》。
2.应避免样本间交叉污染，样本采集后应及时检测，也可保存于-20±5℃待检，长期保存应置于-70℃以下。
【样品保存和运输】
上述标本短期内可保存于-20℃，长期保存可置-70℃，但不能超过6个月，标本运送应采用2~8℃冰袋运输，严禁反复冻融。
【使用方法】
1.样品处理（样本处理区）
1.1样本前处理
按照试剂盒操作说明或者临床样品处理方法做好样品前处理。
1.2DNA提取
根据您实验室的具体情况和样品类型，选择适当的提取策略方法。为了使实验结果稳定、有效、可靠，我们建议使用商品化的试剂盒进行提取，严格按照对应试剂盒说明书进行操作，样本核酸提取过程中应避免污染，提取好的模板样品如不能立即检测，建议-15℃以下保存。推荐采用我们公司研发生产的试剂盒：细菌基因组DNA提取试剂盒(离心柱法)
2.试剂配制（试剂准备区）
2.1从-15℃以下冰箱中取出试剂盒平衡到室温（20～25℃），注意避免强光照射，待完全溶解后振荡混匀并低速离心10s，使用低吸附吸头分液取样，避免试剂损失和浪费。
2.2根据待检测样本总数，设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照；样品每满7份，多配制1份)，每测试反应体系配制如下表：
试剂
用量（样本数为N）
19μL
1μL
2.3在适当容积的无菌离心管中加入上述试剂，充分振荡混匀后2000rpm离心10s，按照20μL/管分装量将试剂分装至八联PCR反应管中。
2.4盖紧八联PCR反应管盖,并注意做好相应标识（请标记在八联PCR反应管盖两端突出部位，切勿标记在八联PCR反应管盖中间）。将PCR反应管转移至样本准备区，剩余试剂放回-15℃以下冰箱冷冻保存。
3.加样（样本处理区）
将步骤1提取的DNA、阳性质控品、阴性质控品各取5μL，加入相应的反应管中，盖好管盖，混匀，短暂离心，核酸加样过程中应避免污染。
4.PCR扩增（核酸扩增区）
4.1将待检测反应管置于荧光定量PCR仪反应槽内。
4.2设置好通道、样品信息，反应体系设置为25μL。
荧光通道选择：检测通道荧光染料法(SYBRGreenI)，淬灭通道（QuencherDye）NONE，ABI系列仪器请勿选择ROX参比荧光，选择None即可。
4.3推荐循环参数设置：
5.结果分析判定
5.1结果分析条件设定
设置Baseline和Threshold：一般直接按机器自动分析的结果分析，当曲线出现整体倾斜时，根据分析后图像调节Baseline的start值(一般可在3~15范围内调节)、stop值(一般可在5~20范围内调节)，以及Threshold的Value值(上下拖动阈值线至高于阴性对照)，重新分析结果。
5.2结果判断
阳性：检测通道Ct值≤35.0，且曲线有明显的指数增长曲线。
可疑：检测通道Ct值>35.0，且出现典型扩增曲线的样本建议重复试验，重复试验结果出现Ct值≤38.0和典型扩增曲线者为阳性，否则为阴性。
阴性：检测结果Ct值无Ct值，无明显的扩增曲线。
6.质控标准
阴性质控品：无明显扩增曲线或无Ct值显示；
阳性质控品：扩增曲线有明显指数生长期，且Ct值≤30；
以上条件应同时满足，否则实验视为无效。
7.产品性能指标
阴阳性参考品符合率：5份阳性参考品符合率为100％；10份阴性参考品符合率为100％。
最低检测限：1.0×103copies/mL。
精密度：批内、批间精密度检测Ct值的变异系数（CV）均小于等于3%。
8.检测方法的局限性
样本检测结果与样本收集、处理、运送以及保存质量有关；
样本提取过程中没有控制好交叉污染，会出现假阳性结果；
阳性对照、扩增产物泄漏，会导致假阳性结果；
病原体在流行过程中基因突变、重组，会导致假阴性结果；
不同的提取方法存在提取效率差异，会导致假阴性结果；
试剂运输，保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降，出现假阴性或定量检测不准确的结果；
本检测结果仅供参考，如须确诊请结合临床症状以及其他检测手段。
9.注意事项
所有操作严格按照说明书进行；
试剂盒内各种组分使用前应自然融化，完全混匀并短暂离心；
反应液应避光保存；
反应中尽量避免气泡存在，管盖需盖紧；
使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服；
样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行，以免交叉污染；
实验完毕后用10%次氯酸或75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器；
试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
注意事项：该产品仅供科研实验使用，未经允许不得用于其它用途！以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。