患者男,74岁,主诉于2023年11月27日被狗咬伤左手中指,于2023年12月2日就诊北京大学人民医院,体格检查左手中指明显肿胀,可见脓性分泌物,初步诊断为动物致伤和软组织感染。给与如下处置:
1.送检病原微生物培养;
2.莫西沙星(盐酸莫西沙星氯化钠注射液)250ml:0.4g:2.0g/瓶、250m1、输液、QD(8am)(1次/日)、1天、1瓶;
3.吗啉硝唑(迈灵达注射液)、0.5g100m1/瓶、100m1、输液、ONCE(一次)、1天、1瓶;4.人用狂犬病疫苗(冻干人用狂犬病疫苗)、≥2.5单位0.5毫升/瓶、0.5ml、肌注、ONCE(一次)、1天、1瓶;
4.破伤风免疫球蛋白(破伤风人免疫球蛋白)、250单位/瓶、250IU、肌注、ONCE(一次)、1天、1瓶;
经37℃培养24h后,在哥伦比亚琼脂平板上形成直径为1~2mm、不透明、浅灰色菌落(如图1所示),菌落底部为浅绿色(如图2所示),培养物经涂片革兰染色后(如图2所示),镜检所示革兰染色阴性,小杆菌或球杆菌,菌体大小(0.3~1.0)μmx(1.0~2.0)um,单个存在,有时成对或短链(如图4所示);无芽孢、无鞭毛、无抗酸性。氧化酶试验用血平板上的菌落,在滴加氧化酶试剂30s后才出现弱阳性反应。经BrukerMALDIBiotype和梅里埃VITEK2ID-GNBcard鉴定为多杀巴斯德菌。
▲图1多杀巴斯德菌在哥伦比亚血琼脂平板24小时培养物
▲图2多杀巴斯德菌在哥伦比亚血琼脂平板24小时培养物,菌落刮去后,菌落底部为浅绿色
▲图3多杀巴斯德菌在巧克力琼脂平板24小时生长物
▲图4多杀巴斯德菌24小时培养物革兰染色镜下
药敏试验采用纸片法进行药敏试验,试验结果按照美国临床实验室标准化协会不常见菌和苛养菌药敏试验判断标准进行判定,具体参考文件为CLSIM45-A3。结果显示该菌对青霉素、氨苄西林、头孢曲松、阿莫西林/克拉维酸、四环素、阿奇霉素敏感,对红霉素耐药,对复方新诺明、莫西沙星沙星不敏感。见表1
▲表1患者伤口分泌物药敏试验结果
▼二、什么是巴斯德菌?
巴斯德菌属(Pasteurella)隶属于细菌域,变形菌门,y-变形菌纲,巴斯德菌目,巴斯德菌科(Pasteurellaceae)。目前属内有24个种和3个亚种,可引起人类感染的菌种主要有多杀巴斯德菌(P.multocida)、侵肺巴斯德菌(P.pneumotropica)、溶血巴斯德菌(P.haemolytica)、产气巴斯德菌(P.aerogenes)、咬伤巴斯德菌(P.dagmatis)、犬巴斯德菌(P.canis)和口腔巴斯德菌(P.stomatis)等,代表菌种为多杀巴斯德菌。
▼三、巴斯德的培养环境是否由特殊需求?
巴斯德菌属为需氧到微需氧或兼性厌氧,在22~42℃均能生长。最适生长温度35~37℃,加血液促进生长。在血琼脂平板上35℃孵育18~24小时后,多杀巴斯德菌形成灰白色、不溶血,直径大小为0.5~1.5mm的小菌落,有荚膜的菌株呈现黏液状。在肉汤中经孵育后,光滑型和黏液型菌株呈均匀混浊,而粗糙型菌株可形成细小颗粒状沉淀。产气巴斯德菌和咬伤巴斯德菌菌落圆形、光滑、半透明而不溶血;侵肺巴斯德菌的菌落更扁平。多数菌株生长不需要X和V因子,复合培养基更有利于菌株生长。该菌在麦康凯上不生长。
▼四、巴斯德菌生化反应如何?
巴斯德菌属从有机化合物氧化和发酵获得能量。氧化酶阳性,触酶阳性,发酵葡萄糖,能还原硝酸盐,不液化明胶,甲基红和VP为阴性,鸟氨酸和赖氨酸脱羧酶阴性。这里需要特别注意的是,该菌的氧化酶试验用血平板上的菌落,在滴加氧化酶试剂30s后才出现弱阳性反应。巴斯德属氧化酶阳性,这可用于与肠杆菌目细菌进行鉴别;巴斯德菌属生长大多数不需要V因子和X因子,这可用于与嗜血杆菌鉴别。
▼五、如何进行治疗?
根据ABX指南感染性疾病的诊断与治疗:
1.阿莫西林/克拉维酸500mgPO,每8小时1次,或875mgPO,随餐,每天2次(阿莫西林/克拉维酸为动物咬伤的首选经验用药)。
2.氨苄西林/舒巴坦3glV每6小时1次。
3.青霉素500mgPO,每6小时1次或4mUIV每4小时1次(仅在确定菌株敏感时使用)。
4.环丙沙星500mgPO或400mgIV每12小时1次或左氧氟沙星500mgPO/IV每24小时1次。
5.对于β-内酰胺类药物过敏患者,可选用多西环素100mgPO,每天2次或TMP-SMX剂PO,每天2次。
6.一代头孢菌素[如头孢氨苄(先锋霉素IV)及克林霉素]无效。·偶发菌株产B-内酰胺酶,使对青霉素耐药。
一般控制咬伤感染多为多种微生物混合感染,因此阿莫西林/克拉维酸常被推荐为具有广谱覆盖性的经验用药。对于四肢咬伤,保持相应的手或足抬高。对手部咬伤感染,尽早前往手部外科就诊。
▲表2病例文献信息汇总
▼七、巴斯德菌感染途径有哪些?
巴斯德菌属最常见的感染途径为咬伤,如狗、猫、仓鼠、马、猪等动物咬伤、抓伤、舔伤等,但是也有非咬伤感染途径:如与宠物密切接触导致带菌的手接触眼睛感染8;无明确病因导致的关节肿胀与疼痛加重及屈伸活动受限11;亲吻宠物导致健康成年人感染致脓毒症13;如踩到狗的口水导致脚底部溃疡、伤口触碰沾有猫毛和猫皮屑的袜子、醉酒时被狗绊倒擦伤后伤口沾染狗唾液导致感染等14。
▼八、生活中,我们要怎么小心预防该菌感染?
在现实生活中,认为猫狗咬伤后,应加强动物咬伤的伤口处理,必要时要预防性应用抗生素。在有婴幼儿和老人的家庭,在饲养宠物时应做好宠物及家庭人员的卫生工作,积极采取措施预防非咬伤型的宠物源的多杀巴斯德菌感染。临床医生如果怀疑关节巴斯德属感染时,建议进行细菌培养,并配合高敏C反应蛋白、降钙素原其他感染指标,尽早发现感染致病菌,予以对症治疗。
参考文献(上下滑动)
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蔡淑梅
就职于联勤保障部队第九〇〇医院检验科,主管技师,主要从事临床微生物检验工作。2023年8月-2024年2月在北京大学人民医院检验科微生物进修。