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2023.09.20
标本采集指南
1检测项目总览表
该部分内容主要适用于护士标本采集管的选择和标本送检,为应急之用,在条码上已有最新内容,若本手册与条码内容有悖,以条码为准;
黑头管、蓝头管和紫头管按管子上推荐的体积准确抽取,余参考容器要求
标本
类型
检测项目包
容器要求
送检科室
血
液
术前、输血前检查(外科)、感染指标(艾乙丙梅)包(内科)、乙肝两对半定量、乙肝两对半定性、乙肝表面抗原定性、甲、丙、戊肝抗体检测(酶法),梅毒抗体试验、人免疫缺陷病毒抗体检测(胶体金)、结核抗体检测(胶体金)、丙肝抗体检测(胶体金)、伤寒血清学检测、肺炎支原体抗体检测、孕妇免费检测三项(胶体金)、抗M2型线粒体抗体检测(胶体金)、优生优育TORCH,EB病毒感染检测、传单EB病毒检测、结核感染T细胞检测、抗核抗体滴度测定、双链DNA、自身抗体谱15项、抗中性粒细胞胞浆抗体、类风湿关节炎(包)、自身免疫性肝炎检测、呼吸道病原体九联检(包)、呼吸道病毒抗原7种、食入物过敏原8项、过敏原筛查12项、过敏原筛查20项、食入物过敏原筛查10项
均为红头管4ml
免疫室
骨髓细胞染色体计数及G+R带分析、骨髓细胞染色体计数及核型G带或R带分析、外周血/脐带血核型G+R带分析、外周血/脐带血染色体核型G带或R带分析、骨髓活检+免疫组化、骨髓活检+免疫组化(3项)、
绿头管
遗传室
血培养
需/厌氧培养
血培养瓶(蓝色)8-10ml,儿童瓶(黄色)3-5ml;
1个需氧瓶(蓝色)+1个厌氧瓶(紫色);
细菌室
ABO-Rh血型鉴定、血型单特异性抗体(抗筛)血浆合血、成分血合血(包)、直接抗人球蛋白试验、抗A、抗B效价检测(包)、血型鉴定(卡式法)、TEG血栓弹力图试验。
紫头管(见试管刻度)
TEG:蓝头管(采集至刻度)
血库
荧光原位杂交胎儿染色体检测、血染色体
绿管子(病人到遗传室采集)
血常规、超敏C反应蛋白、血涂片查寄生虫、网织红细胞分析、变异淋巴细胞百分数(包)、嗜酸性粒细胞数(包)、糖化血红蛋白测定。
临检室
红斑狼疮细胞检查
到检验科采血
血液流变学测试
绿头管5ml、黑头管2.4ml
蓝头管(见试管刻度)
ESR(红细胞沉降率);血红蛋白电泳
黑头管(见试管刻度)
白血病免疫分析(30CD)、白血病/淋巴瘤/MDS免疫分析(30CD)、MRD微小残留病灶检测(8CD)、MRD微小残留病灶检测(20CD)、淋巴瘤(25CD)、多发性骨髓(20CD)、HLAB27、PNH、淋巴细胞亚群、免疫功能。
紫头管
流式细胞室
肝功Ⅰ(包)、肾功Ⅰ(包)、血脂Ⅰ(包)、
血脂Ⅱ(包)、生化全套(包)、电解质(包)、血气分析(包)、
血清总胆汁酸测定(酶法)、血糖或餐后血糖(包)、血淀粉
酶(包)、尿酸(包)、钙、磷、镁、碱性磷酸酶(包)、,B型钠尿肽(pro-BNP);内生肌酐清除率(采血同时留取24小时尿并标明升高体重)、血氨
绿头管3ml(血气分析短管3ml,混匀后,密闭标明体温、吸氧浓度立即送检;胆红素注意避光)
生化室
血清铁及转铁蛋白(包)、免疫功能监测(包)、免疫球蛋
白4项测定(包)、总IgE测定(包)、单项免疫球蛋白测定、
补体C3C4定量(包)、风湿病监测(定量)(包)、抗链球
菌O定量(包)、心梗三项定性/量(包)、无机离子(包)、心肌酶谱(包)、肝功Ⅱ(包),肾功Ⅱ(包)、B型钠尿肽(BNP)、降钙素原、脑脊液生化、胸腹水生化、24小时尿蛋白、类风湿因子定量、同型半胱氨酸、胱抑素C、乳酸脱氢酶、C-反应蛋白、血清铁、胆碱酯酶、血清蛋白电泳
红头管4ml
尿液
尿妊娠试验HCG(金标法)、尿沉渣+干化学、尿沉渣分析(包)(体检专用)、尿三杯试验、尿本周蛋白
清洁、干燥的一次性容器10ml以上
24h尿蛋白定量(标明24小时尿量),尿淀粉酶
24小时尿微量白蛋白、尿微量白蛋白(随机尿)、尿肾功能检测、尿微量白蛋白/尿肌酐
细菌培养
清洁、有盖、干燥、无菌的一次性容器5ml(蓝盖无菌杯>1ml)
抗酸染色
红盖杯>1ml
结核分枝杆菌rpoB基因及利福平耐药快速检测(XpertMTB/RIF)
大便
大便常规分析
清洁、干燥的一次性容器(拇指大小,1H内送检)
培养
清洁、有盖、干燥、无菌的一次性容器(拇指大小)蓝盖杯(拇指大小)
大便菌群、轮状病毒检测(该项目在临检)、霍乱弧菌快检
红盖杯(拇指大小)
穿刺液(脑脊液/浆膜腔积液等)
常规检查
无菌小瓶3ml
生化检查
培养(同血培养)
使用血培养瓶做增菌培养(同血培养)
细菌
室
脑脊液墨汁染色
骨髓
细胞染色分类计数
涂片5张送检(需含骨髓小粒)
用血培养瓶做增菌培养(2-5ml)
阴道分泌物(白带)
清洁、干燥的一次性容器
培养、革兰染色
女性专用标本采集管
羊水
染色体检查
专用采集管(需提前联系遗传室)
清洁、有盖、干燥、无菌的一次性容器5-10ml
其他体液
如痰、前列腺、精液、引流物、器官组织分泌物等标本涂片查细菌、培养
清洁、有盖、干燥、无菌的一次性容器
男性/女性分泌物支原体培养
专用采集管
病人类型
实验室已开展的相关检查项目
危重病人
生化(电解质、血气分析、肾功,心肌酶谱,心梗三项、血糖、淀粉酶)、临检(D二聚体、凝血图、血分析)
糖代谢疾病
生化(血糖),临检(糖化血红蛋白),核医学(葡萄糖耐量试验(OGTT)、胰岛素、C肽)
泌尿系统疾病
生化(肾功、24h尿蛋白,微量白蛋白、补体、内生肌酐清除率)、临检(尿分析、尿三杯、12小时adiss计数、1小时尿沉渣计数);微生物(细菌培养),核医学(2微球蛋白)
消化系统疾病
生化(肝功、淀粉酶)、临检(粪便隐血试验)、微生物(细菌培养)
心血管疾病
生化(心肌酶、心梗三项、B型钠尿肽前体(pro-BNP))
呼吸系统疾病
生化(血气分析)、微生物(细菌培养、抗酸杆菌检测、肺炎衣原体支原体检查)
产前检查
遗传室(染色体检查)、血库(不规则抗体筛查、ABO血型鉴定(包括Rh血型)),免疫(TORCH全套)、泌尿外科(不孕不育抗体全套)、核医学科(唐氏筛查、性激素全套)
血液疾病
免疫性疾病
生化(免疫功能监测、风湿病监测);临检(红斑狼疮细胞检查)、免疫(ANA、自身抗体谱)
肿瘤疾病
核医学科(肿瘤标志物)
内分泌疾病
核医学科(垂体激素、甲功、皮质醇、性激素)
肝炎系列
免疫(甲肝、丙肝抗体检测,乙肝标志物定量、乙肝DNA定量);核医学(肝纤维化四项)
其他感染系列疾病
免疫(淋球菌、衣原体、支原体、HIV、梅毒、抗酸杆菌检测、革兰染色、细菌培养、肥达试验、外斐试验、TORCH、结核分枝杆菌rpoB基因及利福平耐药快速检测(XpertMTB/RIF)此处建议微生物和免疫分开;临检(寄生虫血涂片镜检)
药物中毒
生化(胆碱酯酶,电解质,肾功,肝功)
儿科疾病检测
临检(血红蛋白电泳、轮状病毒)、微生物(细菌培养、肛鼻咽拭子定植菌筛查)、核医学(生长激素测定)生化(无机离子检测);血库(直接抗人球蛋白)、免疫(甲、乙型流感病毒核酸联合检测、地中海贫血基因检测)
备注:(1)以上检查项目主要是针对不同类别疾病的一些特殊检查,没有详细介绍其它的常规检查
(2)凡是激素类、肿瘤标志物检查项目均送核医学科
(于晓、郑凡、刘能英、张梦玲、唐世杰、喻婷、黄维园审校)
生化、临检项目
检验项目
生化、血脂1、血糖、肝功1、肾功、尿淀粉酶、血淀粉酶、尿酸、电解质、
9:00点以前采集
上午11:00取报告
上午11:00以后取报告
9:00点以后采集
上午11:00后顺延1小时取报告
下午14:00以后取报告
血脂2、肝功2、微量元素、风湿全套、尿微量白蛋白、免疫全套、IGE、补体C3C4、抗链球菌O定量、类风湿因子
下午14:00取报告
血清蛋白电泳(肝功II、肾功II含电泳)
当天下午14:30取报告
所有血清蛋白电泳标本均送总院生化室检测。
10:25以后采集送达科室标本
次日14:30取报告
急查项目:1血分析、超敏C反应蛋白、大便分析、小便分析、血气分析、凝血功能、D-2聚体;2心肌酶谱、血、尿淀粉酶、电解质、肝功I、肾功、心梗三项、BNP、PCT;3培养;4输血全套项目
随时采集
1、检验科收到标本后30分出报
2、2小时内出报告
4、立即初筛报告临床,第二天酶法检测后出结果
随时可采集
1、检验科收到标本后30分以后出报
血分析、网织红细胞、超敏C反应蛋白、大便分析、小便分析、血气分析、凝血功能、D-2聚体
检验科收到标本后30分钟取结果
血分析+超敏C反应蛋白+C反应蛋白、白带分析
检验科收到标本后1h取结果
总院临检收到标本后1小时
疟原虫、胸腹水常规、脑脊液常规
检验科收到标本后2h取结果
血沉
16:30以后,需要在17:00以前送到检验科临检
血红蛋白电泳
周二、周四10:25前采集标本
总院临检在周二上午10:30以前收到标本,在周二下午14:30可取结果,周二上午10:30以后到周四上午10:30以前收到的标本在周四下午14:30可取结果,周四上午10:30以后收到的标本在下周二下午14:30取结果。
均可采集
总院临检在周二上午10:30以前收到标本,在周二上午14:30可取结果,周二上午10:30以后到周四上午10:30以前收到的标本在周四下午14:30可取结果,周四上午10:30以后收到的标本在下周二下午14:30取结果。
糖化血红蛋白
周一到周六总院临检在上午11:30以前收到标本,在当天下午14:30可取结果,周一到周五总院临检上午11:30以后收到的标本,第二天下午14:30取结果。
周六上午11:30以后收到的标本在下周一下午14:30取结果。
血流变
周1-5,10:25前采集,需在上午11:35以前送总院临检
下午14:30取报告
周1-5,11:30前采集,需在上午11:35以前送总院临检
多项凝血因子
每周3下午15:30可取报告
DIC诊断包、纤溶活性包、AT-III
总院临检收到标本后2小时
骨髓穿刺涂片
周一到周五送达后第二个工作日下午14:30报告,周六和星期天送到的标本在下周一下午14:30报告
纠正试验、
13:55前
周一到周五总院临检在15:00以前收到标本,三个小时可取结果,周一到周四总院临检15:00以后收到的标本,第二天下午14:30取结果。
周五15:00以后收到的标本在下周一下午14:30取结果。
随时送检
12小时adiss计数
送达后2个小时出报告
1小时尿沉渣计数
淋巴细胞亚群
HLA-B27
PNH
周一至周五上午9:15前
周一到周五总院临检在上午10:00以前收到标本,在当天下午14:30可取结果,周一到周四总院临检上午10:00以后收到的标本,第二天下午14:30取结果。
周五上午10:00以后收到的标本在下周一下午14:30取结果。
白血病免疫分型、淋巴瘤、多发性骨髓瘤、MRD微小残留。
标本接收后三个工作日取报告。
免疫项目
检测项目分类
项目内容
备注
杂项系列(1)
乙肝两对半定性、乙肝表面抗原定性、人免疫缺陷病毒抗体检测(胶体金)、丙肝抗体检测(胶体金)、结核抗体检测(胶体金)、伤寒血清学检测、孕妇免费检测三项(胶体金)、抗M2型线粒体抗体检测(胶体金)、24小时尿微量白蛋白、尿微量白蛋白(随机尿)、尿肾功能检测、尿微量白蛋白/尿肌酐。
每日11:00时(总院)
每日9:15(南区、临港)
当日下午15:00
杂项系列(2)
梅毒抗体试验、肺炎支原体抗体检测
每日10:00时(总院)
每日9:15时(南区、临港)
杂项系列(3)
甲、丙、戊肝抗体检测
周一、三、五11:00(总院)周一、三、五10:25(南区、临港)
检测当日下午15:00
自身抗体谱系列
抗核抗体滴度测定、双链DNA、自身抗体谱15项、抗中性粒细胞胞浆抗体、类风湿关节炎(包)、自身免疫性肝炎检测、食入物过敏原8项、过敏原筛查12项、过敏原筛查20项、食入物过敏原筛查10项
呼吸道九联检
嗜肺军团菌、肺炎支原体、Q热立克次体、肺炎衣原体、腺病毒、呼吸道合胞病毒、流感病毒、副流感病毒IgM抗体
每周一至五上午8:00
分院第二天下午15:00
TORCH十项
弓形虫,风疹,巨细胞,单疱疹Ⅰ,单疱Ⅱ(IgM、IgG)共十项
周一、三、五11:00(总院)周一、三、五10:25(南区、临港)
结核感染T细胞检测
每周一至周日上午11:00时
每周检测两次,周一、周四检测。每周日上午11:00以前的标本请于下周一下午3:00以后取报告,每周日上午11:00以后的标本请于下周四下午3:00以后取报告。每周三
上午11:00以前的标本请于周四下午3:00以后取报告,每周三上午11:00以后的标本请于下周一下午3:00后取报告。
EB病毒抗体检测
EB病毒抗体检测,传单EB病毒抗体检测,EB病毒检测(体检中心)。
每周二上午9:00以前的标本请于下午3:00以后取报告,每周二上午9:00以后的标本请于下周二下午3:00以后取报告。
血清胃功能检测
胃泌素-17检测
每周二、四检测
周二9点以前的标本当日下3:00取报告,周二9点以后的标本周四下午3:00取报告。周四9点以前的标本当日下午3:00取报告,周四9点以后的标本下周二下午3:00取报告。
遗传实验室项目:
Y染色体微缺失系列基因检测
SRY,ZFX/ZFY,AZFA,AZFB,AZFC
每周一至周五
5个工作日
携带缴费小票遗传室领取
外周血淋巴细胞染色体畸变率
外周血细胞培养;染色体分析
每周五上午11:00前
15个工作日
外周血淋巴细胞微核率
外周血细胞培养,T淋巴细胞转化试验
外周血胎儿染色体DNA测序倍体分析
脱氧核糖核酸测序(13-1,13-2,18-1,18-2,21-1,21-2)
10-14天
血染色体检查
脐血,外周血细胞培养;染色体分析(外周血)
羊水染色体
羊水,绒毛细胞培养(双份);染色体分析
每周一下午17:30前(产前手术室统一穿刺)
20个工作日
分子项目
检测项目
乙肝病毒DNA
周一至周五上午10:30周六上午10:00(总院)
周一至周五上午10:25周六上午8:25(南区、临港)
周一至周五10:30以前送检标本当日15:00取,10:30以后送检标本第二日15:00取,周六10:00以前送检标本当日15:00取,周六10:00以后和周日送检标本下周一15:00取
丙肝病毒RNA
周四上午11:00(每周做一次)(总院)
周四上午10:25(每周做一次)(南区、临港)
每周四上午11:00以前送检标本周五15:00取,之后送检标本下周五15:00取
结核DNA
周二和周五上午8:00(每周做两次)
周一送检标本周二15:00取,周二至周四送检标本周五15:00取,周五至周日送检标本下周二15:00取
衣原体DNA
周一至周六上午8:00
周一至周五送检第二日15:00取,周六周日送检标本下周一15:00
支原体DNA
淋球菌DNA
人乳头瘤病毒基因分型23型
周一至周五上午8:00
周一至周三送检标本隔一日15:00取,周四送检标本周五17:00取,周五至周日送检标本下周二15:00取
HPVDNA高危15项分型检测
周一周三周五上午8:00
周一周二送检标本周三15:00取,周三周四送检标本周五15:00取,周五到周日送检标本下周一15:00取
甲、乙型流感病毒核酸联合检测
每周一三五上午8:00
周一至周二送检标本,周三16:00取,周三至周四送检标本,周五16:00取,周五至周日送检标本,下周一16:00取
地中海贫血基因检测
周二上午8:00(每周做一次)
周一送检标本周三15:00取,周二至周日送检标本下周三15:00取
乙肝病毒耐药突变位点检测
周四上午8:00(每周做一次)
周一至周三送检标本周五15:00取,周四至周日送检标本下周五15:00取
微生物室项目
三天初报,五天终报(除去收取标本的当天)
普通细菌培养
两天(除去收取标本的当天)
真菌培养
七天(除去收取标本的当天)
支原体培养
涂片染色
16:30(总院)、15:15(南区)前送达微生物,当天下午18:00前可取报告
输血科
项目
血型鉴定(ABO-Rh)直抗、抗筛
每天
2小时后
抗A、抗B效价检测
每周四上午12:00
当日下午14:30
血栓弹力图(TEG)
周一至周五
(8:00-18:00)
2h
常规合血
急诊合血
随时
45min
4.申请单
(2)申请者应向患者讲清楚采集标本前的准备和用药须知,及可能会影响到结果的注意事项。
(3)申请单的填写(在信息系统崩溃时启用)
(于晓、郑凡、刘能英、张茂玲、唐世杰、郭雅梅、喻婷、黄维园审校)
5患者的一般准备和指导
5.1患者状态
一般需要在安静状态下采集标本,如患者处于高度紧张状态,可使血红蛋白、白细胞升高;运动后由于能量消耗、体液丢失,可造成CK、LDH、ALT、AST等一时性升高,还可引起血液中钠、钙、白蛋白、血糖等成分的改变。
5.2饮食
病人在采血前24小时内应避免饮酒,不宜改变饮食习惯和睡眠习惯,多数试验要求在采血之前禁食12h,因为食物中的不同成分可直接影响实验结果。
(1)餐后血液中ALT、GLU、BUN、Na等均可升高,但空腹达24h以上,可出现低血糖,血中TG、游离甘油及脂肪酸可升高。
(2)高脂餐后2~4h采血,多数人ALP含量增高,主要来自肠源性同工酶,且与血型有密切关系,O型或B型兼为Le+分泌型,增高更为明显。
(3)高蛋白质餐使血尿素、血氨增加,但不影响肌酐的含量。
(4)高比例不饱和脂肪酸食物,可减低胆固醇含量;香蕉、菠萝、番茄可使尿液5-羟色胺增加数倍。
(5)含咖啡因饮料,可使血浆游离脂肪酸增加,并使肾上腺和脑组织释放儿茶酚胺。
(6)食物如含有动物血液,可引起粪隐血假阳性。
饮酒后使血浆乳酸、尿酸盐、乙醛、乙酸等增加,长期饮酒者高密度脂蛋白胆固醇偏高、平均血细胞体积增加、谷氨酸转肽酶也较不饮酒者高,甚至可以将这三项作为嗜酒者的筛查。
吸烟者血液中儿茶酚胺、可的松较不吸烟者为高,血液学方面也有变化,白细胞数增加,嗜酸性粒细胞减少、中性粒细胞及单核细胞增多、血红蛋白偏高、平均红细胞体积增高。吸烟组血浆硫氰酸盐浓度明显高于非吸烟组。
5.3药物
药物对检验的影响非常复杂,在采样前,以暂停各种药物为宜,如某种药物不可停用,则应了解可能对检验结果产生的影响,如服用维生素C会导致血清肌酐、尿酸、ALT、AST和血糖测定结果升高,而LDH等偏低。故如果患者使用已明确的对检验结果有影响的药物时临床应主动告知检验科。
5.4体位
体位影响血液循环,由于血液和组织间液因体位不同而平衡改变,则细胞成分和大分子物质改变较为明显,例如由卧位改为站位,血浆ALB、TP、酶、Ca、胆红素、Tch及TG等浓度增高;Hb、HCT、RBC等亦可增加。由于体位的因素,在确立参考值时,应考虑门诊和住院病人可能存在的结果差异,故采集标本时要注意保持正确的体位和保持体位一致性。
5.6生理差别
不同年龄组的个体及妇女的妊娠期、月经期,血液成分有一定的生理差异,应注意与病理情况区别。
5.7输液的影响
由于边输液边采血影响血液成分的测定,如单纯输入电解质可使钾、钠、镁升高;输入葡萄糖溶液使血糖测定值升高,而钾、胆红素偏低;输血可使全血PH降低。输液时应在输液的另一侧手臂取血,同时应在检验申请单上注明“输液时采血”。
5.8情绪和运动的影响
激动的情绪或剧烈运动都会影响到一些血液成分浓度的变化,如可以影响神经-内分泌功能,影响呼吸,使乳酸等升高。剧烈运动后血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)天冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)等均升高。
6采血工作人员须知
6.1患者指导
除应了解以上提到的内容外,还要了解以下事项:血常规一般要求休息15分钟后采血,冬季注意保暖,以保持血液循环畅通。尽量避免药物干扰,化疗患者要求在化疗前采集标本;采血沉标本前一周应尽量避免服用对检测有影响的药物,患者采血时宜采用坐位或卧位。
6.2采血过程
6.3采集部位
协助患者采取舒适姿势,露出合适之采血部位,选择明显具有弹性的血管,通常选择手肘中央较粗的静脉血管,用食指触摸,是否为有弹性的血管(肌肉较无弹性)若血管不明显,请轻拍手肘中央部位(约5-8次),让血管较易浮现,若该部位不明显,可改用手背处静脉(请患者手轻握),轻拍手背中央部位(约5-8次),让血管较易浮现,小儿采用股静脉采血或颈外静脉采血,但有危险性,少用为宜。特别注意:不可选择输液同侧之手臂。严禁在输液端或输血端放血检测。危重和抢救病人不能使用末梢血。
静脉穿刺建议选择部位:
a、尺骨中静脉:位于肘窝的表浅静脉,为最常被选的手臂静脉穿刺部位。
b、贵要静脉:位于肘前臂,为肱静脉分支。
c、头静脉:位于肘上臂,为腋静脉分支。
d、婴幼儿等采血困难者可采用颈部和腹股沟静脉采集血液样本。
6.4第一次绑上止血带(离抽血扎针部位上方约5cm距离)注意袖筒不要太紧。
a、第一选择为手肘中央部分较粗的静脉血管,用食指触摸,是否为有弹性的血管(肌肉较无弹性),若血管不明显,请轻拍手肘中央部位(5-10次),让血管较易浮现,若仍无把握时,请选择手背处静脉(请患者手轻握),轻拍手背中央部位(约5-10)次,让血管较易浮现。
b、确定穿刺部位后,松开压脉带。第二次绑上压脉带后,采血。
d、备妥采集真空管双头针、压脉带、棉球、镊子、垫巾等,并将条码贴在选择好的试管上。如果无条码,请将申请单上的标本联填写上病人姓名后贴在试管上。
e、以碘伏做第二次消毒,但方向与第一次相反,待干咳后进行穿刺。
6.5真空采血方法
a、确定穿刺部位后,先以碘伏消毒,以选定的静脉穿刺部位为中心点,由内往外以环状凃拭消毒,消毒直径约7.5cm,稍待干燥后进行第二次75%酒精消毒。
b、真空采血装置,设计备有软橡皮套管式止血装置,酒精消毒后,将采血针头以15度角针头朝下,在手臂上进行静脉穿刺,回血后即将另一端的硬管插入真空定量采血管内,血液足量后,拔出硬插管即止血,当插入另一支真空采血管时又可采血,整个采血过程无血液溢出和污染,采血完成后,针头从静脉拔出前,需将最后一支试管退出持针器,以无菌棉签压住采血部位,再拔除针头。
c、血液收集于适量试管内后,轻轻的倾倒试管8-10次(180°轻微摇晃),使试管内原本添加好的添加剂与血液混合均匀。但不可过度摇动,过度摇动可能造成溶血现象,影响分析结果。
d、针头拆卸后丢入专用锐器盒统一消毒无害化处理。千万不可用手拿针盖而将针套入,避免针扎意外。
f、止血:退针后请病人手指压住棉签,手伸直抬高于心脏,保持5分钟(如果是有出血倾向者如紫癜,ITP,血液病等,请病人不要离开,要压迫5-10分钟直到无血渗出为止)。同时请病人观察采血部位有无红肿、青紫等,如出现请病房护士帮助处理,包括冷敷等。
——新生儿止血要求:采血人员压迫5-10分钟直到无血渗出为止方可离开,请注意观察患儿有无出血情况。
——婴幼儿或昏迷病人止血要求:采血人员采血完毕后,请监护人或陪伴帮助压迫采血部位5-10分钟直到无血渗出。
g、将针头拔出后,用干净无菌棉球覆盖于针扎伤口上,告知病患手臂伸直,略高于心脏,稍加压力于抽血点至少五分钟;
h、协助病人恢复舒适姿势,如放下袖筒,披上外衣等;
j、将采样后的试管与检验单核对后交运转中心送至检验科标本处理组;
k、抽血者洗净双手。
6.6真空管采血顺序
血标本采集时建议的真空管使用顺序如下:
(1)血液培养(分成人需氧瓶、厌氧瓶,儿童需氧瓶)(直立旋转混匀)
(2)血清生化(绿头或红头)
(3)凝血功能(蓝头)(颠倒混匀5-8次)
(4)血常规(紫头)(颠倒混匀5-8次)
(5)血清免疫(红头)
(6)血沉(黑头)(颠倒混匀5-8次)
6.7真空采血管分类及采血要求
真空采血管冒颜色
管内填充物
用途
采血量
混匀
(次)
橙色、红色帽
促凝剂(加速血液凝固或无添加剂)
血清生化、血清学、免疫学实验
3-5ml
5
蓝色帽
抗凝管(管内含3.8%的枸橼酸钠)
凝血、DIC检查,枸橼酸钠与血液体积比例为1:9
1.8ml
3-4
紫色帽
EDTA抗凝剂(EDTA的钠盐或钾盐)
血常规、血浆氨、疟原虫分片、血常规+血沉+CRP
1-2ml
2-3ml
8
黑色帽
抗凝管(管内含3.8%的枸橼酸钠)
单独的血沉测定,枸橼酸钠与血液体积比为1:4
1.6ml
绿色帽
抗凝剂(肝素或肝素锂)
化学、免疫(如两对半)、血浆实验、血液流变
8-10
金黄色、黄色帽
促凝剂、分离胶
血清生化、免疫
灰色帽
抗凝剂(添加剂为氟化钠+草酸钾/氟化钠+肝素锂)
血糖检测(氟化钠抑制糖酵解)
备注:
a、严禁将紫色帽血常规管内血液倒入红色帽生化管内,导致高钾、低钙、低镁(或钙为0),原因为:EDTA抗凝剂含钾盐,EDTA抗凝剂螯合钙离子,钙离子大量被结合,出现高钾、低钙。
b、凝血和DIC请严格按比例采血:凝血、DIC检查,枸橼酸钠与血液体积比例为1:9,一般精确采血至2ml.
c、粘贴条码一般离管口0.5cm,严禁横贴条码、严禁不同项目同一条码、严禁条码完全遮盖管子、严禁重复使用同一条吗,条码应清晰可辨。
6.7采集注意事项
严格按照无菌技术操作,无论医生、护士、检验人员除穿戴工作服外,还应戴一次性口罩,同时严格做好采血时手的消毒,防止患者采血部位的感染。保证一人一针一带一巾,杜绝交叉感染。真空采血过程如有血液外溢和污染,立即用75%酒精溶液消毒处理。对所有的采血材料严格执行使用前再次检查,保证安全。采血人员对所采集的标本做好登记工作,并签名。样品采集完后,对所使用的材料做好无害化处置,保证环境和人员安全。
7血液常见检查项目标本的采集
7.1血液常规检查
7.1.1患者准备
采血前患者应避免剧烈运动,一般要求休息15分钟后采血,冬季注意保暖,以保持血液循环畅通。患者心情平静时方可采血。尽量避免药物干扰,化疗患者要求在化疗前采集标本。
7.1.2标本采集
采血部位通常选择肘前静脉,幼儿可采用颈外静脉。使用一次性真空采血管,紫头管(抗凝剂为EDTA-K2)。抗凝血2mL,取血后轻轻颠倒混匀5-8次。
7.1.3标本运送
血液标本应采集后由运送人员送检。
7.1.4标本处理与存储
未能及时检验的抗凝血标本在室温下保存,4小时内检测完毕。一般WBC、RBC、PLT可稳定24小时,白细胞分类可稳定6-8小时,血红蛋白可稳定数日。低温(4℃)保存可使血小板结果降低。
7.1.5标本拒收
检验申请单填写内容与血液标本标识内容不一致或不清楚者可拒收;标本量少于1mL者(婴幼儿,严重烧伤等特殊情况除外),可拒收;血液中有凝块,严重溶血,脂血者,拒收。
7.2网织红细胞
同血液常规检查的标本采集。
7.3红细胞沉降率
7.3.1患者准备
患者在安静状态下,采血前一周应尽量避免服用对检测有影响的药物;患者采血时宜采用坐位或卧位。
7.3.2标本采集
采血部位通常选择肘前静脉,幼儿可采用颈外静脉。使用黑头管(抗凝剂为枸橼酸钠),采血量1.6mL。
7.3.3标本运送
采血后应尽快运送测定。
7.3.4标本处理与存储
7.3.5标本拒收
标本量低于要求量,严重溶血,脂血,有凝块者拒收。
7.4血流变检测
7.4.1患者准备
采血前避免过度活动和高脂饮食,避免情绪激动。
7.4.2标本采集
早晨空腹采血,采血时止血带不宜扎得过紧,采血体位对结果有影响,立位高于坐位,坐位高于卧位。分别用绿头管(标本量5mL),黑头管(标本量1.6mL),紫头管(标本量2mL)三支试管同时采集标本。
7.4.3标本运送
取血后立即送检。
7.4.4标本处理和存储
取血后静置20分钟进行试验。最好在4小时内完成。血样不能在0℃以下冰冻保存,室温条件下应在0.5-2小时内完成检测,4℃条件小,在12小时内完成。
7.4.5标本拒收
标本量少,有溶血,凝块的标本拒收。
7.5血红蛋白电泳
7.5.1患者准备
一般采血前24小时要素食,避免高脂食物。
7.5.2标本采集
采静脉血2mL紫头抗凝管。
7.5.3标本运送
标本采集后应立即送检。
7.5.4标本处理与存储
标本制成血红蛋白液后,可在4℃冰箱保存一周。-20℃冰冻可保存几个月,但应避免反复冻融,也可通入一氧化碳形成一氧化碳血红蛋白,冰冻后长期保存。
7.5.5标本拒收
标本抗凝失败或抗凝不完全,致使游离红细胞过少者,应予以拒收。
7.6凝血和抗凝血筛选实验
7.6.1患者准备
一般采血前24小时要素食,避免高脂食物。情绪稳定,避免剧烈运动。注意患者是否应用肝素、口服抗凝剂等对结果有影响的药物,是否有肝病。
7.6.2标本采集
用蓝头管采集静脉血3mL,抽血要顺利,且避免溶血,取血后轻轻颠倒混匀5-8次。
7.6.3标本运送
7.6.4标本处理与存储
3000r/min离心10分钟,分离血小板血浆。标本采集后室温下应在4小时内检测完毕。
7.6.5标本拒收
溶血、有凝块、量不足的标本拒收。
7.7血型及合血标本的采集
7.7.1采血管:用EDTAK2抗凝(紫头管)4.0ml采血管,儿童患者可用2.0ml采血管,采血后轻轻颠倒混匀5—8次。
7.7.2采血管条码要求:需要输血的病人,医生必须填写输血申请单,条码打印一式双份,一份粘贴在试管上,但请务必粘贴在试管中间部位,标签下端距底部15mm处,另一份粘贴在申请单的条码粘贴区。
7.7.3标本要求:无溶血,无凝块,采血量成人不少于3ml,儿童不少于1.5ml。
7.7.5TEG标本采集:用蓝头管采血至刻度线,无空腹要求,外周静脉采血,颠倒混匀5-8次,半小时内送至输血科。
7.8常规生化项目
7.8.1患者准备
7.8.1.1避免剧烈运动:剧烈肌肉运动明显影响体内代谢,引起血中某些成分浓度的改变,如乳酸、肌酸激酶、天门冬氨酸转移酶、乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶、葡萄糖等的升高,故一般主张抽血前24小时不做剧烈运动,清晨取血,住院病人可在起床前抽血,匆忙赶到门诊的人应至少休息15分钟取血。
7.8.1.3采血前避免饮酒:采血前饮酒可使血乳酸,尿酸等迅速增加,连续饮酒可使天门冬氨酸转移酶、丙氨酸氨基转移酶、γ-谷氨酰基转移酶升高,而γ-谷氨酰基转移酶上升最明显。长期饮酒者往往有甘油三酯血症,γ-谷氨酰基转移酶也会长期不正常。
7.8.1.4避免紧张与情绪激动,否则可以影响神经内分泌功能,影响呼吸,使乳酸等升高。
7.8.1.5药物的影响:很多药物进入人体后可使某些检测项目结果增高或降低。如咖啡因可使血糖和胆固醇增高;治疗冠心病的某些药物可使甘油三酯和乳酸脱氢酶减低;维生素C可使乳酸脱氢酶减低;血和尿中维生素C能影响测定过程中的化学反应;维生素B2可使尿呈现黄色;口服避孕药可影响脂质代谢,可使转氨酶升高等。故病人在检验前应尽可能停服对试验有干扰的药物。
7.8.1.6体位的影响:体位(站立、坐位、卧位)改变可以引起某些检验指标的显著改变,故建议取血时以坐位5分钟后取血为宜。
7.8.2标本采集
采集标本的容器和必需的添加品:
一般为静脉血,非抗凝血作生化项目需4mL,抗凝血应视抗凝剂的量而定。
抗“O”,类风湿因子,免疫全套,肌钙蛋白和心肌酶谱,肝功2使用一次性真空采血管,不抗凝,即用红头管。
7.8.3标本运送
标本采集后应及时送检。送检过程中应避免日光直接照射,且注意不要剧烈震荡。
7.8.4标本处理和存储
7.8.5标本拒收
标本量过少,试管用错,溶血以及严重脂血的标本可拒收。
7.9血气标本的采集
7.9.1患者准备
患者采血前解除恐惧心理,保持安静是很重要的条件,因为暂时屏气或呼吸急促都会使测定结果异常,对于正在吸氧的患者,如病情许可最好停止给氧30min后采血。
7.9.2标本采集
采用动脉血,取桡动脉、肱动脉、股动脉、足背动脉均可,最常取桡动脉。桡动脉,也可用动脉化毛细血管血,穿刺桡动脉需要施行Allen,s试验(检查手部的血液供应,桡动脉与尺动脉的吻合情况):让受检者握紧拳头,采血者用手指压住受检者的手腕,同时阻断桡动脉和尺动脉的血流,让受检者松开拳头(不可完全伸直),可见手指和手掌呈现苍白色,采血者放松尺动脉压迫,受检者手掌应在15s内变红,能在15s内变红为阳性,方可在桡动脉采血,反之,不能再桡动脉采血,取血的空针一般为1-5ml,需用肝素(1000U/mL)抗凝用干燥空针抽吸肝素湿润管内壁,推出多余的肝素,馆内残余的肝素足以抗凝2ml全血,血标本要隔绝空气,可在针尖插入一橡皮塞,然后用两手滚动注射器使标本充分混合达到抗凝,如发现混有小气泡时,可将针管竖直,立即排出气泡,避免血液与气泡震动。
7.9.3标本运送
抽血后要求严加密封,不能接触空气,立即混合均匀送检,天热可放冰壶中送检。
7.9.4标本处理和储存
7.9.5标本拒收
血气标本在采集和运送过程中,封闭的皮塞脱落或密封失败的标本应拒收;未按要求及时送检、体积不足,有凝块、标识不准确的标本应拒收。
7.10伤寒血清学实验
7.10.1患者准备
患者应遵医嘱用药,特别要告知主管医师服药情况。采集标本,以用药前为最佳。
7.10.2标本采集
均采用红头管。
7.10.3标本运送
采血后应密闭,尽快送检。
7.10.4标本处理和储存
标本应尽快处理,及时测定。
7.10.5标本拒收
试管错误标本,溶血标本,陈旧标本,标识有误标本拒收。
7.11病毒性肝炎血清标志物、HIV抗体的检测,梅毒,结核抗体、抗核抗体、自身抗体谱
7.11.1患者准备
不需要强调患者禁食。
7.11.2标本采集
使用一次性真空管采集静脉血3mL,可以使用血清或血浆,建议使用血清即红头管。
7.11.3标本运送
采血后应密闭,注意不要剧烈震荡。
7.11.4标本处理和储存
标本应尽快分离血清,及时测定。标本于4℃条件下保存5天或-70—-20℃保存数年,抗体滴度稳定。不得反复冻融。不得使用防腐剂。
7.11.5标本拒收
溶血标本、反复冻融的标本、细菌污染的标本拒收。
7.12TORCH
7.12.1患者准备
一般不需要禁食,但应忌油腻食物。
7.12.3标本采集
使用真空采血管,血清或血浆都可,建议使用血清即红头管。
7.12.4标本运送
容器密闭,避免剧烈震荡。
7.12.5标本处理和储存
7.12.6标本拒收
采集后未按要求储存及处理的标本、溶血标本、标识有误的标本拒收。
7.13HBV-DNA血清采集
7.13.1采集容器
无菌真空采血管(红头)
7.13.2标本采集
以真空采集方式采集被检测者静脉血2-3ml
7.13.3标本运送
标本采集后放入不易破碎的容器中,在30-40min内送至检验室。
7.13.4标本的处理
12000转/分离5min,吸取血清盛入另一支无菌离心管中备用,(特别注意不要吸入红血球和严禁溶血,否则易使结果出现假阴性)
7.13.5标本的保存
若标本在1-2周内检测,放2-8℃冰箱保存,若在一个月内检测放-20℃保存,若长期保存则放-70℃低温冰箱或液氮罐中保存。
7.14血液培养标本的采集、运送和验收
7.14.1采血指征
患者出现以下一种体征时可作为采血的重要指征:
(1)发热(≧38oC)或低温(≦36oC)(2)寒战;(3)白细胞增多(>10×109/L,特别有“核左移”未成熟的或带状的白细胞增多);(4)皮肤粘膜出血;(5)昏迷;(6)多器官衰竭,血压降低,CRP升高及呼吸快;(7)血液病患者出现粒细胞减少(成熟的多形核白细胞<1×109/L),血小板减少等。或同时具备上述几种体征时而临床可疑菌血症应采集血培养。新生儿菌血症,应同时做尿液和脑脊液培养。
7.14.2标本的采集
7.14.2.1皮肤消毒程序:严格执行以下三步法
a75%酒精擦拭静脉穿刺部位待30秒以上;
b碘伏作用60秒,从穿刺点向外画圈消毒,至消毒区域直径达3cm以上。
c75%酒精脱碘,对碘过敏的患者,用75%酒精消毒60秒,待酒精挥发干燥后穿刺采血。
7.14.2.2培养瓶消毒程序
75%酒精擦拭血培养瓶橡皮塞,作用60秒,然后注入血液。
7.14.2.3静脉穿刺和培养瓶接种程序
a在穿刺前或穿刺期间,为防止静脉滑动,可戴乳胶手套固定静脉,手不可接触穿刺点;
b用注射器无菌穿刺取血后,勿换针头直接注入血培养瓶,或严格按厂商推荐的方法采血。
C血标本接种到培养瓶后,轻轻混匀以防止血液凝固,立即送检,切勿冷藏。
7.14.2.4采血量
成年患者:推荐的采血量为每套不少于10ml,每瓶不少于5ml;
婴幼儿患者:推荐的采血量,每瓶不少于2ml
对怀疑菌血症的成人患者,推荐同时采集2-3套(不同部位)血培养标本。
婴幼儿患者,推荐同时采集2次(不同部位)血培养标本。
一次静脉采血注入到多个培养瓶中应视为单份培养或一套血培养。多次采血不应在同一部位进行,应更换部位。对于间歇性寒颤或发热应在寒颤或体温高峰到来之前0.5-1小时采集血液。对于某些全身性和局部感染患者采血培养的建议:
a急性发热怀疑菌血症者,应尽量在抗菌药使用之前,在10分钟内于不同部位采集两份血标本,每一份血标本接种需氧和厌氧培养瓶各一个。
b对于非急性感染,怀疑有菌血症者,应在24h内于不同部位采集2-3份血标本,每次采血的间隔不应小于3h,并应于抗菌给药前采血。
c急性细菌性心内膜炎患者,应在1-2小时内采集3份血标本,并尽量在抗菌药前采血;如果24小时培养阴性,可再采集3份以上的血标本。入院前两周内接受抗菌药物治疗的患者,连续3天,每天采集2份。可选用中和或吸附抗菌药物的培养瓶。
d亚急性细菌性心内膜炎患者,在24小时内不同部位采集血液标本2或3份,每次间隔大于1h;如果24小时培养阴性,可再采集2或3份以上的血标本进行培养。
e不明原因发热,可在24小时内不同部位采集血液标本2或3份,每次间隔大于1h;如果24-48小时培养阴性,可再采集2或3份以上的血标本。
f可疑菌血症或真菌菌血症,但血培养持续阴性,改变血培养条件和方法,以获得罕见的或柯养的微生物。
g儿童菌血症患者在24小时只需要采一次血标本进行培养,需特别注意穿刺部位的消毒,以区别感染菌和污染菌,由于儿童厌氧菌菌血症罕见,常规血培养不做厌氧培养。
7.14.3标本运送
采血后立即送检,如不能立即送检,室温保存不得大于2小时,最好置在35-37oC孵箱中,切勿冷藏。
7.14.4标本验收
(1)检查培养瓶是否有渗漏、破损或明显污染;
(2)检查瓶子上的标签与申请单是否相符;
(4)对于延迟送检的血培养瓶应注意肉眼观察微生物生长可视信号,如发现可视信号提示有微生物生长,应该立即直接涂片镜检和划线转种。
7.15血氨标本的采集运送
7.15.1患者准备:空腹血。注:吸烟对患者和标本都有氨污染,因此采血前一天午夜后应禁止吸烟。严重吸烟患者,采血前必须淋浴,穿新睡衣裤。采血医护人员也必须是非吸烟者。
7.15.2采血器具:一次性真空采血管,采集静脉血2ml,EDTA真空管(紫色帽)注:尽量不用一次性注射器采血;采血过程中尽量不打开EDTA真空管的紫色帽;采血后轻轻颠倒混匀,避免溶血,溶血标本不接收。
7.15.3标本采集后必须在30分钟内送检。注:最好用冰袋或冰桶保存运送。
8尿液常见检查项目标本采集
8.1标本采集
8.1.1采集原则
尿标本采集应在未使用抗生素之前,注意避免消毒剂污染标本,应保证尿液在膀胱内至少停留4小时以上。
8.1.2采集容器
a容器为不与尿液成分发生反应的惰性材料制成;
b清洁、无菌、加盖、封闭、防渗漏;
c不含防腐剂和抑制剂;
d广口、具有较宽的底部,容积应>50ml,盒盖易于开启。
8.1.3临床根据检测的需要选择留尿的方式
8.1.3.1首次晨尿:即留取清晨第一次尿,能真实反映肾脏病情况。(尿含铁血黄素检测
标本最好留取第一次晨尿,且不能用铁制容器盛标本)
8.1.3.2随机尿:不为条件所限,适于门诊、急诊病人,但受多种因素影响,有形成分的浓度较低。尿淀粉酶可取随机尿。
8.1.3.3午后尿:午餐后2h尿中尿胆原和糖含量高,适于这两种成分的检验,可提高阳性检出率。
8.1.3.4中段尿采集法:是临床上最多采用的方法,女性病人先以肥皂水或以1:1000高锰酸钾水溶液冲洗外阴部及尿道口;男性病人应翻转包皮,用肥皂水或1:1000苯托溴铵冲洗或消毒尿道口,再用灭菌纱布擦干,让病人排尿,弃去前段尿,收集中段尿10-20ml(半杯),盛于无菌容器中立即加盖送检。
8.1.3.512h尿:头晚8时排空膀胱并弃去此次尿液,再收集至次晨8时前的全部尿液,适用于Addis尿沉渣计数。
8.1.3.624h尿:适用于代谢产物24h定量测定,如尿蛋白、糖、钠、钾、氯、钙、尿酸、17-羟皮质醇和17-酮皮质醇等。应准确的收集24h尿液,采集方法:早上8时到次晨8时,早上8时排空膀胱并弃去此次尿液,再收集,直到次晨8时将小便全部收集在容器中,并测定尿量,从混匀尿液中采集100-200ml送检。收集24h尿液根据检验目的加入适量防腐剂。24h尿液沉渣还可以用于找抗酸杆菌。(注意事项:24小时尿的总量对检验结果的准确性有很大关系,所以尽量不要漏留小便;自备容器必须洗干净、干燥,否则会影响结果;自备容器内要加入防腐剂必须是在本院检验科所领取的特定防腐剂(不得随意加入其他无关防腐剂),并在第一次尿液后加入,混匀。尿液最好4-8℃保存,如无冷藏条件,盖上容器盖或装入密闭容器,置通风处存放。)
8.1.3.7特殊体位采集标本:如分别采集直立或运动后尿标本与平卧8h后尿标本,对体位性蛋白尿、运动性血尿诊断有帮助。
8.1.3.8下午2点钟至4点钟留取尿标本:适于尿胆原检查。
8.1.3.9清洁尿(中段尿、导尿、膀胱穿刺尿等):适于细菌培养,应注意无菌操作。
8.1.3.10尿本周蛋白:测定本—周氏蛋白只需按常规方法留取新鲜尿标本。混浊尿液须先行离心取上清液。
8.2标本运送
8.3标本验收
a检查标本标识是否与申请单相符;
b检查标本容器有无渗漏,渗出、是否加盖;
8.4采集注意事项和要求
8.4.1应用清洁、有盖、干燥的一次性容器,防止日照与污染。
8.4.2采集尿量:尿常规与一般定性检查留取尿液约30-100ml。
8.4.3尿标本要新鲜,留取后立即送检。放置2h以上尿中成分可发生变化,如红细胞、白细胞溶解等。
8.4.4尿标本要防止月经血、白带、精液、前列腺液、粪便、烟灰等异物混入。为此应避免月经期验尿。女性患者先要清洁外阴部,用0.1%苯托溴铵溶液浸过的棉球擦洗外阴部并消毒尿道口。一般检查留取晨起第一次清洁中段尿,作细菌培养者应先做尿道口局部消毒处理并注意无菌操作。
8.4.5尿胆原等化学物质因光分解或氧化,需要避光。
9粪便常见检查项目标本采集
9.1常规检查
9.1.1患者准备
病人必须清楚标本采集前严格饮食控制、标本采集和运送是保证实验结果准确的前提,应认真与医生合作。免疫法实验前无需控制饮食,化学法实验前3天严格禁食动物性食品,大量维他命C或其他抗氧化物可能会造成假阴性反应,应根据病人的病情酌情禁食维生素C等还原性药物,铁剂及含铁剂药物会造成隐血化学法出现假阳性,采检前应禁食含铁剂药物及aspirin(隐血试验)。准备干净的采集容器,并粘贴患者资料标签。
9.1.2标本采集
通常采取自然排出的粪便,无粪便排出而又必须检查时,可经肛门采便或管拭子取标本,灌肠或服油类泄剂的粪便不适合做检验标本。粪便应取新鲜标本,不得混有水、尿液和其他成分。取新鲜粪便指头大小或2ml(稀便)放入便盒内,大便不正常时,如有脓血粘液时,应选择有脓血粘液部分。不要用卫生纸或其他吸水的物质包大便送检、不能用棉花签带棉球的那头取大便。婴儿不能用尿不湿上的大便。
9.1.3标本送检
大便标本采集后应立即送检,不超过1小时。送检过程中需防止出现标本外溢。
9.1.4标本处理
粪便标本应及时送检(一般在采集后1小时内检查完毕)。试验所使用的器具必须干净,防止试验出现假阳性。标本容器一次性使用,检验后标本应无害化处理。
9.1.5标本拒收
被容器吸干了水分的标本拒收;标本量过少的标本拒收;混入了尿液或其它成分的标本拒收;采集1小时后送检的标本拒收。
9.2粪便细菌学检查
包括培养,查菌群比例,特殊细菌涂片等
9.2.1送检指征
当腹泻患者出现以下任何一种情况时建议采集粪便标本,进行细菌学检查⑴粪便涂片镜检白细胞>5个/高倍镜⑵重症腹泻⑶体温大于38.5℃⑷血便⑸便中有脓液⑹未经抗菌药物治疗的持续性腹泻患者⑺来自疫区的患者
9.2.3标本采集
⑵自然排便采集标本时,取有脓血、粘液、组织碎片部分的粪便1~3g。液体粪便择取絮状物1~3ml直接装入无菌、带盖、广口的培养杯中送检,送检的标本中不能加入防腐剂。
⑶直肠拭子采集标本:适于排便困难者或婴幼儿。可用肥皂水将肛门周围洗净,用无菌盐水保养液或增菌液湿润的棉拭子插入肛门,成人4~5cm,儿童2~3cm,与直肠粘膜表面接触,轻轻旋转,必须将拭子置于适当的运送培养基内送检。
9.2.4标本的运送
9.2.5标本验收
10其他体液常见检查项目标本采集
10.1脑脊液标本采集
10.1.1送检指征
a多数成人患者症状为发热、头痛、恶心、呕吐以及颈项强直和反射增强等脑膜刺激征的表现,脑脊液的典型改变有腰穿时压力增高,脑脊液的白细胞和蛋白增高、糖含量减低和致病菌培养阳性。b婴幼儿和老年人临床表现经常为不明确和无特异性,因此对于婴儿不明原因发热,应怀疑为脑膜炎,采集脑脊液及时送检。
10.1.2腰椎穿刺的主要禁忌症
10.1.2.1实施腰穿取脑脊液时,一定要考虑是否有颅内压升高,如果眼底检查发现视乳头水肿,一定要先做CT和MRI检查。影像学检查如脑室大小正常且没有移位,后颅凹没有占位征象,方可腰穿取脑脊液,否则不能作腰穿。
10.1.2.2对休克、哀竭或濒危状态及穿刺部位皮肤有炎症者亦不宜作腰穿。
10.1.2.4脊髓压迫症做腰穿时应谨慎,因为腰穿可以加重脊髓压迫症状。
10.1.2..5开放性颅脑损伤或有脑脊液漏者,不宜作腰穿。
10.1.3患者准备
患者应了解腰椎穿刺术的注意事项,放松心情,积极与医生合作。
10.1.4标本采集
10.1.4.2物品准备:一次性垫巾、复合碘消毒液、2%利多卡因、血管钳、无菌洞巾、无菌纱布、无菌棉签、骨髓穿刺针、口罩、帽子、一次性灭菌手套、载玻片,试管及无菌管等。
10.1.4.3采集方法:
a、脑脊液标本由临床医生进行腰椎穿刺采集,必要时可从小脑延脑池或侧脑池穿刺获得。
10.1.5标本运送
标本采集后应立即送检,不能超过1小时,以免影响检验结果。用于细菌培养的标本不可置于冰箱冷藏或低温保存,否则会使病原微生物死亡,尤其是脑膜炎奈瑟氏菌、肺炎链球菌和流感嗜血杆菌。
10.1.6标本采集的注意事项
a如只采集了一小瓶脑脊液,应首先送到微生物室;b做脑脊液培养时,建议同时做血培养;
c采集脑脊液的小瓶不需要加入防腐剂也可直接注入血培养瓶中;d进行腰穿过程中,严格无菌操作,避免污染,穿刺时患者如出现呼吸、脉搏、面色异常时,应立即停止操作,并作出相应处理;e、鞘内给药时,应先放出等量脑脊液,然后再等量置换性药液注入;f、标本采集前应核对好姓名和检验项目,明确标本要求,标本贴上条码或标签;
10.2浆膜腔积液(胸水、腹水、心包液、关节液、胆汁和鞘膜液)标本采集
10.2.1送检指征
a怀疑结核性或化脓性胸膜炎、肺炎、肺脓肿、支气管扩张等感染出现胸膜腔积液者;
b怀疑细菌性或结核性腹膜炎出现腹腔积液者;c心包炎症出现心脏压塞和未明原因的渗出性心包炎时;d滑膜腔积液采集指针包括:(1)手术中或组织病理检查发现感染证据者;(2)不明原因的关节红肿、热、痛、压痛、积水或活动受限等临床表现中任意两项,并且关节液革兰染色显微镜检查发现微生物及白细胞、或影像学提示感染,或血液、尿液或关节液抗原检测阳性,或关节液化学及细胞学检查提示感染而与原有风湿性病变无关者。
10.2.2患者准备
尽量放松心情,积极与医生配合。
10.2.3物品准备
一次性垫巾、复合碘消毒液、2%利多卡因、血管钳、无菌洞巾、无菌纱布、无菌棉签、胸腔穿刺针、一次性注射器、口罩、帽子、一次性灭菌手套、载玻片,试管及无菌管(数量跟种类根据要求选取后检查灭菌日期、有效期及有无漏气)。
10.2.3标本采集
浆膜腔积液标本由临床医生行浆膜腔穿刺术获得,如胸腔穿刺术、腹腔穿刺术、心包腔穿刺术,穿刺术必须严格无菌操作。
采集方法
胸水:
部位:通常在肩胛线或腋后线7-8肋间
方法:取坐位,两前臂置于椅背上,前额伏于前臂上;不能起床者可取半卧位,前臂上举抱于枕部。常规消毒,拿无菌手套,覆盖无菌洞巾。用2%利多卡因在下一肋骨上缘的穿刺点自皮肤至胸膜壁层进行局部浸润麻醉。术者以左手食指和中指固定穿刺部位皮肤,右手将穿刺针的三通活栓转到与胸腔关闭处,再将穿刺针在麻醉处缓缓刺入,当针锋抵挡感突然消失时,将三通活栓转至与胸腔相同,进行抽液。注射器抽满后,转动三通活栓使其与外界相同,排除液体。如用较粗的长穿刺针代替胸腔穿刺针时,先将针座后续的橡皮管用血管钳夹住,然后进行穿刺,进入胸腔后再接上注射器,松开止血钳,抽吸液体,抽满后再次夹住橡皮管,取下注射器,将液体注入弯管,计量及送检,作培养时应用无菌操作法留标本。抽液结束后拔出穿刺针,覆盖无菌纱布,稍用力压迫片刻,用胶布固定后嘱患者静卧。
10.2.4注意事项:
a、手术前向患者说明目的,消除顾虑,精神紧张者,可于术前半小时给地西泮10mg,或可待因30mg以镇静止痛。
b、术中密切观察患者反应,如有头晕、面色苍白、出汗、心悸、胸骨压迫感的反应,或出现连续性咳嗽、气促等现象,应立即停止抽液,并皮下注射0.1%肾上腺素0.3-0.5ml或进行其他对症处理。
c、一次抽液不应过多,诊断抽液50-100ml即可;减压抽液首次不超过600ml,以后每次不超过1000ml;如为脓胸,每次尽量抽净。
d、应避免在第九肋间以下穿刺,以避免穿透膈肌损伤腑脏器
e、严格无菌操作,操作中防止空气进入胸腔,始终保持胸腔负压。
f、标本采集前应核对好姓名和检验项目,明确标本要求
g、收集标本后,为防止细胞变性出现凝固或细菌破坏溶解等,必须立即送检,如不能立即检查,生化管2-8℃保持4小时,常规管室温保存4-8小时,细菌培养管2-8℃保存24小时,但某些细菌的培养必须立即接种。
h、可于每1000ml标本中加入EDTA100mg抗凝,以利于细胞涂片检测。用于常规、生化及细胞学检查的标本送检量至少10-20ml,其中做常规检测的标本应采集两份,1份需加入抗凝剂,1份不加抗凝剂。用于培养的标本量约1.0-5.0ml.
腹水:
部位:左下腹脐与髂前上棘连线的中、外1/3交点。脐与耻骨联合连线中点上方1.0厘米,偏左或偏右1.5厘米处(左右麦氏点)。侧卧位,在脐水平线腋前线或腋中线相交处。此处常用于诊断性穿刺。少量积液,尤其有包裹性分割时,需在B超指导下定位穿刺。
方法:术前需排尿以防穿刺损伤膀胱。取坐位靠背椅上,衰弱者可取半卧位、平卧位或侧卧位。常规消毒,戴无菌手套,覆盖消毒洞巾,自皮肤至壁层腹膜以2%利多卡因作局部麻醉。术者左手固定穿刺皮肤,右手持穿刺针经麻醉处垂直刺入腹壁,待针尖抵挡感突然消失时,示针尖已穿过壁层腹膜,即可抽取腹水,计量并留样送检。诊断性穿刺可直接用20ml或50ml注射器及适当针头进行;大量放液时,可用8号或9号针,并于针座接一橡皮管接容器。并留取标本送检,作培养时应用无菌操作法留标本,放液后,拔出穿刺针,覆盖消毒纱布,以手指压迫数分钟,再用胶布固定。大量放液后,需束以多头腹带,以防腹压骤降。内脏血管扩张引起血压下降或休克。
注意事项:
a、术中密切观察患者,如有头晕、心悸、脉搏增快及面色苍白等,应立即停止操作,并作适当处理。
b、放液不宜过快、过多,肝硬化患者一次放液一般不超过3000ml,过多放液可诱发肝性脑病和电解质紊乱,但在维持大量输入蛋白的基础上,也可大量放液。放腹水时若流出不畅,可将穿刺针稍作移动或要求患者变换体位;术后患者平卧,并使穿刺孔向上,以免腹水继续漏出;对腹水量较多者,为防止露出,在穿刺时应注意勿使自皮肤到腹膜壁层的针眼位于一条直线上;如仍有漏出,可用蝶形胶布或火棉胶布粘贴。
c、严格无菌操作,操作中防止空气进入腹腔,始终保持腹腔血压。
d、放液前、后均应测量腹围、脉搏、血压、检查腹部体征,以观察病情变化。
e、有肝性脑病先兆,结核性腹膜炎粘连包快、包虫病及卵巢囊肿者禁忌穿刺。
g、收集标本后,为防止细胞变性出现凝固或细菌破坏溶解等,必须立即送检。低温条件2-8℃运输或室温(18-25℃)运输。微生物检验标本不应置于冰箱内,以免细菌死亡而使培养阴性,应尽快送检。
h、可于每1000ml标本中加入EDTA100mg抗凝,以利于细胞涂片检测。用于常规、生化及细胞学检查的标本送检量至少2-3ml,其中做常规检测的标本应采集两份,1份需加入抗凝剂,1份不加抗凝剂。用于培养的标本量约3-5ml.
注意:采集标本量视检验目的而定。积液分别收集于3个无菌小瓶中,第一瓶做细菌学检查或直接注入血培养瓶中,第二瓶做化学或免疫学检查,第三瓶做细胞计数,三瓶顺序不宜颠倒。
10.2.4标本运送
a标本采集后应立即送检,不能超过1小时,以免影响检验结果。室温下最长不超过24h送到实验室;b心包积液以及用于真菌培养的体液,4℃环境下,不超过24h送到实验室。(3)运送容器中应加入抗凝剂,以防止运送过程中凝固。
10.2.5标本的验收
a检查容器是否有渗漏、破裂或明显污染,容器标签与申请单是否一致;b标本量、容器、运送条件、重复检查间隔符合相应标本采集与运送标准。
10.3骨髓细胞检查
10.3.1患者准备
标本采集前应向病人讲清操作步骤,争取病人配合,病人处于安静状态,避免情绪紧张与剧烈运动。
10.3.2物品准备
无菌骨髓穿刺包,内有:骨髓穿刺针头12-16号,注射器2ml1支、10-20ml两支、注射针头(7号)2个,洞巾、纱布等,无菌手套,1%-2%普鲁卡因溶液,拨片、推片、抗凝小试管,胶布等。
10.3.3标本采集
10.3.3.1髂骨后上棘穿刺:为目前最常用的骨髓穿刺部位。其优点为该处骨质较薄,容易穿刺,且骨髓液丰富,较少被血液稀释;此外,术者在病人背后操作可减轻病人的恐惧感。但肥胖者有时不易摸清穿刺点为其缺点。
10.3.3.2病人侧卧,其上面的腿向胸部弯曲,下面的腿伸直,使腰骶部向后突出,髂后上棘明显突出于臂部之上骶椎的两侧,或可在相当于第五腰椎水平,向上约3cm处用手探触一顿圆形突出,此处骨皮质薄,骨髓腔大,容易刺入,多被选用。
10.3.3.3局部用碘伏、75%酒精消毒,戴消毒手套将孔巾盖于已消毒的局部,孔巾口对准穿刺部位。
10.3.3.4注射2%的普鲁卡因1ml-2ml,麻醉局部皮肤,皮下组织,并深至骨膜,揉摸注射处,使药液扩大麻醉范围。
10.3.3.5将固定器固定于针尖1.5cm处,以左手拇指和食指将穿刺部位两侧皮肤压紧固定,右手持穿刺针与骨棘面垂直,悬刺入髂后上棘,达骨髓腔时有空松感,深度约为针尖达骨膜后再刺入1cm左右。
10.3.3.6拔出针芯,接10ml干燥注射器,轻轻负压抽取,抽取骨髓液不超过0.3ml,并置于玻片上推片。再取骨髓液0.5ml,置抗凝小管内,作有核细胞计数。拔出穿刺针,压迫伤口,敷以消毒纱布。对推片不熟练的医生,应在行穿刺前通知检验科来人,协同推片,一般推5-15张片。
10.3.3.7髂前上棘穿刺:为目前比较常用的骨髓穿刺部位之一。优点为操作安全,病人较不恐惧,骨面较宽,容易触之和固定位置,但骨质较硬,操作费劲,骨髓易被稀释。消毒麻醉等一般步骤同髂骨上棘穿刺。患者仰卧,穿刺点在髂前上棘顶端后约1cm-2cm处,此骨面最宽。穿刺时术者左手姆、食指压紧固定髂前上棘,右手持针与骨面垂直用力转刺而入,进入髓腔也有一空松感。
a、骨髓穿刺操作应严格按无菌步骤操作进行;
b、血友病患者绝对禁止施行本术;
c、穿刺时不可用力过猛,以免失去对针尖阻力突减的领会;
d、注意穿刺针刺入深度,例如胸骨穿刺时,若穿刺针进入达1-1.5cm尚无阻力突减感,不可盲目的继续穿入,以免伤及纵膈内重要器官。此前,应先拔出针芯,用注射器试控抽吸,若抽不出骨髓液,应将针退到0.5cm处,重新穿刺;必要时可更换穿刺点。
e、若需抽骨髓液做细菌或干细胞培养,应先抽吸0.2ml-0.3ml供涂片、细胞计数用,然后再抽吸到所需量为止。
f、抽吸动作要缓慢,勿用力过猛,否则易造成骨髓标本被血液稀释。必要时可同时做多部位穿刺,相互对照比较。
g、发生干抽或抽出血液的常见原因有骨髓纤维化,白血病细胞极度增生加之抽吸不够,不易使相互粘着的细胞分离,继发性转移癌,多发性骨髓瘤等。再生障碍性贫血,应做骨髓活体组织检查。
骨髓象检验取材满意的指标:
a、在骨髓抽吸的一瞬间,病人有一种特殊的抽空锐痛感。
b、标本中应有淡黄色骨髓小粒。
c、显微镜下观察涂片,应找到骨髓中特有的细胞如巨核细胞、浆细胞、网状细胞、组织嗜碱性细胞、幼稚红细胞和幼稚粒细胞等。
d、骨髓分类计数时,杆状核/分叶核之比,大于外周血之比。
e、骨髓标本的量以小于0.3ml为宜,细菌培养时宜取2.0-3.0ml。
f、一般不需抗凝,若需要,应使用EDTA-K2。
10.3.4标本运送
骨髓标本采集后应迅速送检。
10.3.5标本处理与存储
10.3.6标本拒收
骨髓标本稀释、凝固拒收。
10.4生殖道标本的采集、运送和验收
10.4.1送检指征
成人患者典型症状为尿道口红肿、瘙痒、烧灼感,有时尿急及排尿困难,可有稀薄粘液或粘液脓性甚至粘稠脓性分泌物。但是部分患者可无任何症状,或症状很轻微。
10.4.2标本采集
根据感染的部位和可能的病原体确定病原学诊断的标本种类、采集部位和采集方法等。由于外生殖器存在有正常菌群,所以在采集标本时应注意尽量减少或避免正常菌群的污染。
10.5阴道分泌物标本采集
10.5.1患者准备
取阴道分泌物之前应避免性生活、阴道冲洗和上药。
10.5.2标本采集
采用无菌生理盐水棉试子自阴道后穹窿、子宫颈或阴道壁上多部位取材。
10.5.3标本运送
将标本置于一次性容器内,迅速送检。如需检查滴虫,应注意保暖。
10.5.4标本处理
制备成生理盐水涂片以观察阴道分泌物。若要求找滴虫,收到标本后应迅速涂片镜检,如不能迅速镜检应将标本继续保温。制成薄涂片做革兰染色寻找线索细胞。
10.5.5标本拒收
10.6前列腺液标本采集
10.6.1患者准备
患者检查前3天禁止性活动;检查前先排尿;如做细菌培养,应先清洗尿道口,用无菌试管收集前列腺液。
10.6.2标本采集
检查者右手食指涂润滑剂后置于肛门外慢慢插入,直至食指尽量插入直肠内。摸准前列腺,用力适中、均匀,先从上向下按摩前列腺左右叶2-3次,后由中线向肛门按压2-3次,挤压会阴部尿道,前列腺液便从尿道口流出。取样时应弃去第一滴液体,再用试管或玻片收集。
10.6.3标本运送
取样后立即送检,避免标本干涸。
10.6.4标本拒收
已干涸的标本不能进行镜检,拒收。10.7痰标本的采集、运送和验收
10.7.1送检指征
a咳嗽:咳嗽、咳痰是下呼吸道感染最常见的症状,咳嗽的性质与痰的性状如脓或铁锈样痰具有鉴别诊断意义,应采集标本送检;b咯血:喉以下的呼吸道出血为咯血,包括泡沫血痰、鲜血和痰中带血等;c呼吸困难:呼吸急促或哮喘,常伴有胸痛,X线检查提示肺部有炎症性浸润或胸腔积液等;d发热伴白细胞增高尤其是中性粒细胞或CRP(超敏C反应蛋白)明显增高。
10.7.2标本采集
标本采集应在临床工作人员指导下进行,并尽可能在抗菌药物使用之前采集;对可疑烈性呼吸道传染病(如SARS、肺炭疽、肺鼠疫等)的患者采集标本时必须注意生物安全防护,一般采用以下几种方法:
⑴自然咳痰法
晨痰最佳,患者清晨起床后,用清水或牙刷清洁口腔和牙齿,有假牙者应取下假牙。用力咳痰,从气管咳出呼吸道深部的痰,痰直接吐入无菌、清洁、干燥、不渗漏的广口带盖容器中,标本量≧1ml,立即送检。对于痰量少、无痰或咳痰困难者可雾化吸入加温至45oC的100g/L无菌Nacl水溶液,使痰液易于排出。
⑵支气管镜采集法
由临床医生按相应操作规程采集。用支气管镜在肺内病灶附近用气管吸引或用支气管刷直接取得标本,该方法对患者有一定痛苦,不易接受。
⑶防污染毛刷采集法和支气管肺泡灌洗法
由临床医生按相应操作规程采集,采集标本放入痰杯中,标本量应大于1ml,立即送检,必须注意采集标本时尽可能避免咽喉部正常菌群的污染。
⑷胃内采痰法
无自觉症状的肺结核病人尤其婴幼儿不会咳嗽,且有时将痰误咽入胃内,可采集胃内容物做结核分枝杆菌培养。该法应于清晨空腹时,将胃管插入胃内,用注射器抽取胃液。
⑸小儿取痰法
用弯压舍板向后压舌,将拭子伸入咽部,小儿经压舌刺激咳嗽时,可喷出肺部或气管分泌物粘在拭子上送检。由临床医生采集。
10.7.3标本的运送
标本采集后尽快送检,不能及时送检的标本,室温保存≦2小时。
10.7.4标本的拒收
遇到不合格标本应及时与临床联系,反馈不合格标本拒收的具体理由。
a呼吸道有大量的正常菌群存在,咽拭子、咳痰吸出的分泌物厌氧菌培养无意义。
c痰标本呈水样或唾液样或混有食物残渣或纸屑灰尘或泥土拒收。
d标本涂片白细胞和鳞状上皮细胞细胞计数:白细胞数<10/低倍镜和鳞状上皮细胞>25/低倍镜,表示该标本已污染正常菌群,建议重送标本。
f同时同部位或同一天两份相同的检测标本(应与申请医师协商处理)。
10.8脓液及病灶分泌物标本的采集、运送和验收
10.8.1送检指征
包括手术部位感染、皮肤和软组织感染、骨髓感染等。
10.8.1.1手术部位感染
10.8.1.1.1切口感染:手术后30天内,皮肤、皮下组织或肌膜层以上组织出现感染征象。
10.8.1.1.2深部伤口的感染:无植入物手术后30天内;植入物手术后一年内,肌膜层以下组织出现感染征象,患者常有发热、局部疼痛或压痛等临床症状。
10.8.1.2皮肤和软组织的感染
皮肤和软组织的感染包括皮肤感染、软组织感染、褥疮感染、烧伤感染、乳房溃疡、乳房炎、肌炎等。
10.8.1.2.1皮肤感染:局部出现疼痛、压痛、红、肿或热等临床症状;
10.8.1.2.2软组织感染:坏死性筋膜炎、感染性坏疽、坏死性蜂窝组织炎、感染性肌炎、淋巴腺炎、淋巴管炎等患者出现一下任一项时,需采集标本进行病原学检查;局部出现脓性分泌物;手术或组织病理检查发现脓疡或其他感染证据:局部疼痛、压痛、红、肿或热等临床症状。
10.8.1.2.3褥疮感染:局部出现疼痛、压痛、红、肿等临床症状,或者产生脓性分泌物。
10.8.1.2.4烧伤感染:患者出现以下任一项时,需采集标本进行医学病原学检查。
①局部出现脓性分泌物;②烧伤部位发生明显变化,如:急速的焦痂剥离、颜色变深或伤口周围肿胀,且组织病理检查发现微生物侵犯至邻近组织;③无明确的感染存在,但血液培养分离出微生物。④骨骼感染
10.8.1.3骨髓炎:或者出现以下情况之一者,需采集标本进行病原学检查。
①手术或组织病理检查发现骨髓炎征象;②未明原因的发热,局部肿、红、压痛或有引流物等临床症状任两项,血液培养分离出微生物或血液抗原检测阳性或影像学提示感染者。
10.8.1.4椎间盘感染:患者出现以下情况之一者,需采集标本进行病原学检查。
①手术或组织病理检查发现局部有感染征象者;②未明原因的发热、病灶部位疼痛且血液或尿液抗原检测阳性者;③未明原因的发热或病灶部位疼痛且影像学提示感染者。
10.8.2标本的采集
10.8.2.1组织(脓肿周围或感染部位下组织)
经手术或活检获得的组织是最好的检测标本,应尽快送微生物室,以便及时、正确地处理。
10.8.2.2开放性脓肿
以无菌生理盐水或75%乙醇擦去表面分泌物,尽量抽吸深部脓液送检,标本量≧1ml。
10.8.2.3闭合性脓肿
以无菌生理盐水或75%乙醇擦去表面分泌物,再抽吸脓肿壁,无菌操作置入厌氧运送系统。
10.8.2.4分泌物
组织和脓液优于拭子,若必须使用拭子采集标本,则深入伤口,取邻近新生组织处标本,置运送培养基运送。
10.8.2.5常见皮肤软组织感染标本采集
10.8.2.5.1蜂窝组织炎
以无菌生理盐水或75%乙醇清洁局部后,用注射器自炎症中央(而非边缘)抽吸。未形成脓肿时,标本难以采集,可用少量无菌生理盐水洗,注入无菌杯送检。
10.8.2.5.2口腔感染(拭子)
口腔感染包括牙龈、牙周、根尖周感染及溃疡坏死性口炎。仔细清洁牙龈及齿缘,去除唾液、碎屑、斑点,用牙周刮仔细刮取齿缘损伤物质置厌氧运送系统运送。以相同方法采集标本涂片、染色。
10.8.2.5.3耳部感染
包括内耳及外耳感染。鼓膜穿刺术适用于复杂的、复发的或慢性持续性中耳炎。
①鼓膜完整时,用肥皂液清洗耳道,鼓膜穿刺术抽吸脓液置无菌杯或厌氧运送系统;
②鼓膜破裂时,通过反射镜,用柔软拭子采集标本,置运送培养基。
③外耳炎时,以湿棉签清洁耳道,用力转动拭子采集标本,以免漏检链球菌。
10.8.2.5.4眼部感染
包括结膜、角膜、玻璃体感染。由于标本量小,推荐在床边接种平板及涂片。
①以无菌生理盐水湿润拭子,两侧分别以不同的拭子在结膜上滚动,直接接种血平板及巧克力平板,也可将拭子送实验室接种。应注意即使只有一侧发生结膜炎,亦尽量采集双侧标本,以确定局部菌群,与患侧分离菌比较。
②角膜刮取物由眼科医生在麻醉下采取(麻醉剂可能抑制某些细菌生长,尽量在麻醉前采集结膜标本)。用无菌刮匙刮取溃疡或损伤处,刮取物直接接种血平板及巧克力平板及真菌培养基。
③玻璃体抽吸液注入无菌杯送检,若标本量少,可直接接种培养基。
10.8.3标本的保存和运送
10.8.3.1脓液、拭子或厌氧运送系统,室温下2h内,最长不超过24h送到实验室。厌氧培养标本以无菌、无氧容器及时运送,若不能及时运送,应置室温,不可置冰箱保存。
10.8.3.2组织置厌氧运送系统或无菌杯送检。标本量少时,加几滴无菌生理盐水保湿。室温下最长不超过24h送达实验室。
10.8.3.3蜂窝组织炎标本:无菌杯(不推荐注射器直接运送)室温下15min内,最长不超过24h送达实验室。
10.8.3.4口腔感染标本:厌氧运送系统室温下2h内,最长不超过24h送达实验室。
10.8.3.5耳部感染标本:室温下2h内,最长不超过24h送达实验室。外耳标本若不能在2小时内送达实验室,可于4oC保存,不超过24h。
10.8.3.6眼部感染标本:培养基或标本室温下15min内,结膜拭子2h内,最长不超过24h送达实验室。
10.8.3.7导管:室温下15min内送达实验室。否则,4oC环境下,2h内送达实验室。
10.8.9标本的验收
a检查容器是否有渗漏、破裂或明显污染,容器标签与申请单是否一致。
b标本量、容器运送条件、重复检查间隔符合相应标本采集与运送标准。
c表浅伤口感染标本革兰染色显微镜检查,鳞状上皮细胞<2+,见多形核白细胞,方可接受标本。反之,鳞状土皮细胞>2+,无多形核白细胞,为不可接受标本。
d标本显微镜检查发现大量鳞状上皮细胞,提示正常菌群污染,为不可接受标本。
10.9各种标本运送方式及可疑致病菌的保存条件
防护措施a
4℃保存
25℃保存
直接接种于培养基
角膜刮取物
需氧运送培养基
烧伤活检组织,弯曲菌属,外耳材料,志贺氏菌属,弧菌属,耶尔森氏菌属
骨髓,关节液,结膜拭子,棒状杆菌属,内耳取材,生殖器标本,鼻炎标本,奈瑟氏菌属,沙门氏菌,上呼吸道标本
10.10无菌体液的标本处理
体液
采集容器
浓集
染色
注释评估
透析液
Isolatortube。尿杯或血培养瓶或无菌管
离心或过滤
Gram染色
白细胞<100个为正常,使用1/3的滤膜接种1-3个培养基
心包液
血培养瓶或无菌管
细胞离心制备
对细胞离心物进行Gram染色
正常液体中几乎无白细胞
腹水
白细胞<300个/ml为正常
胸水(渗出液,漏出液,胸腔穿刺液,脓胸液)
无菌管
>5ml,需做真菌学检查,无WBC为正常,积脓可有许多白细胞
滑膜液
血培养或无菌管
细胞离心
有很少一些白细胞为正常
10.11微生物标本采集指南
采集
重复采样限制
注释
指南
装置和最低量
运送b
保存
脓肿:
开放性的
封闭性的
用无菌生理盐水或70%的酒精擦洗去表面渗出物
尽量能抽取标本或将或将拭子插入伤口深处确保采集到伤口前沿的标本
用针头及注射器抽取脓肿壁部位的标本,用无菌手段将所有的取材转入运送装置
拭子运送管
用一次性注射器抽取直接由病灶处抽取标本
≤2h,室温
≤24h,室温
1次/天/感染源
组织或脓液优于拭子标本。如果不得不用拭子,则采集两份标本,一份作细菌培养一份作Gram染色。
底部和脓肿壁上的取样其检出率最高。
取样时,可能会带入与感染过程无关的定植细菌
咬伤伤口血液培养
参见脓肿部分
消毒培养瓶:70%酒精擦拭血培养橡皮皮赛,作用一分钟或用70%异丙基乙醇消毒橡皮塞1分钟
要触诊找到静脉
静脉穿刺消毒:
1、70%异丙醇(70%酒精)清洁所选部位;传承部位:用清洁所选部位
2、主要消毒剂(葡萄糖氯酸氯已定)消毒并待干
3、不能再触摸消毒部位
细菌:血培养瓶
采血量:儿童1-3ml/套,再多一些量检出率会更高
婴幼儿:1-1ml每套
真菌:
1、双相培养
2、细胞溶解-离心
≤24h,室温,
或按说明书
3套/24h
≤12h的咬伤伤口标本不需做培养(通常不能检出病原体)除非伤口在面部或手上,或者出现有感染的指针
急性脓毒病:10分钟内从不同部位采集2-3套
急性心内膜炎:1-2小时内从不同部位采血3套
亚急性心内膜炎:从3个分离部位采血3套,间隔≥15分钟。如果24小时培养阴性,再采血3套
发热待查:从不同部位采血2-3套,间隔≥1h,若培养24小时阴性,再采血2-3套
一些资料表明,添加一份需养瓶或真菌瓶要比使用厌氧瓶的效果更好。
采完血后用酒精将皮肤脱碘
在穿刺一侧做好准备如同外科切口
接种于血培养瓶中或溶解-离心管中
≤24h,室温,如果已接种入血培养瓶或离心溶解管中
≤24h,室温,,
1次/天
骨髓量太少,可直接接种在培养天平上
烧伤标本
在采集标本之前清洁并清除烧伤创面
组织放入带螺帽的容器中或拭子取渗出物
要做定量培养,一块3-4mm的活检组织最佳。
只能做需氧培养。
定量培养或许没有价值。烧伤表面标本的培养会产生误导作用,不易采用。
导管:i.v.
1、酒精消毒导管周围皮肤
2、以无菌手段取出导管,在其末端剪取5cm直接放入无菌试管
3、直接放到微生物实验室以防干燥
螺旋无菌试管或小杯
≤15
min室温
≤24h,4℃
无
对于半定量培养,导管是可以接受的,如静脉导管(Maki法):中心的,CVP,Hickma,Broviac,外围的,动脉的,脐的,高营养导管,Swan-Ganz导管
蜂窝组织炎标本
1、无菌生理盐水或70%的酒精擦拭清洁染部位。
2用细针头和注射器抽取发炎最严重的区域(一般在中心而不是边缘)
3/注射器吸入少量无菌生理盐水再抽取标本注入带帽无菌试管内。
无菌试管(不推荐使用注射器运送)
≤24h,室温
培养出了潜在的病原体只有25-35%
脑脊液
1、用2%的碘酊消毒采集部位
2、用带有型号为L3-L4,L4-L5,L5-S1通管丝的针头插入
3、进入蛛网膜下腔后,移去通丝管,采集CSF1-2ml,分别放入3个防漏管中
带螺帽的无菌试管
最低要求量:
细菌检测,≥1ml,
真菌检测,≥2ml
抗酸杆菌(AFB)≥2ml
病毒检测≥1m置于冰上
细菌检测:决不能冷藏;
同时也作血培养。如果只有一管CSF,应先将其送微生物实验室;要不就送两管
脑脓肿的抽吸物或活检组织有必要检测厌氧菌或寄生虫
褥疮溃疡
不宜选用拭子(见注释)
1、用无菌生理盐水清洗表面
2、如果没取得活检取材,可用拭子用力采集伤口底部标本
3、将拭子放入适当的运送系统中
拭子运输培养基(需氧菌)
由于褥疮溃疡拭子没有多少临床价值,不宜采用。
选择组织活检或针头抽取标本。
耳:
内耳
外耳
对于复杂的,反复的或慢性顽固的中耳炎作骨膜穿刺术
1.接触耳鼓室先用肥皂水清洗耳道,再用注射器收集液体
2.对于破裂的鼓室,借助耳科听诊器,用柔软杆拭子采集液体
1.用湿润拭子将耳道内的任何碎屑或痂皮和外皮清除
2.在外耳用力旋转拭子采取标本
无菌试管,拭子运输培养基
拭子运送
咽拭子或鼻炎拭子的培养结果不足以诊断中耳炎的病原体,而且咽拭子或鼻炎拭子不能用作培养
对于外耳,拭子采样要用力,因为表面拭子采样可能会漏诊链球菌性蜂窝组织炎
眼部:
结膜
分别用拭子于双眼采样(预先要用无菌盐水湿润),拭子在芥末上滚动采样
床旁接种标本于培养基涂两张片作染色
直接接种于:血平板和巧克力平板或拭子运送培养基转运
琼脂平板:≤24h,室温
拭子:≤2h,室温
如果可能,即使只有一个结膜感染也要取两个结膜的标本,以排除原有菌的干扰。如果费用有困难,就只有靠Gram染色来协助解释培养结果,以排除原有菌的干扰。
1,。如上所述方法取拭子标本
2.抵住两滴麻醉剂局部麻醉
3.用无菌刮刀在溃疡或损害处刮取样本,直接接种在培养基中
4.用余下的标本在两张干净的在玻片上作染色用
直接接种培养:BHI+10%羊血,巧克力平板和含抑制剂的霉菌琼脂培养基
用拭子采集标本最好在使用麻醉剂之前,而刮取角膜样本可以在麻醉之后
液体或抽取物
备眼,以用针头抽吸液体
带螺帽的无菌试管或直接接种少量液体在培养基(同上)上
包括真菌培养基。麻醉剂对有些病原体有抑制作用
粪便:
常规培养
直接将粪便装入一个干净、干燥的容器中。1小时内送到微生物实验室,或用拭子挑取一块可见粪便转入运输培养基中,如Stuart,s或Amies
清洁、防漏、广口的容器取有脓血、粘液部分的粪便1-3g或拭子运送培养基。液体粪便则取絮状物,取1-3ml,装入无菌管内送检。
不防腐:≤1h室温
对于住院>3天而且入院诊断为非胃肠炎的不作常规大便培养。对于这些患者应考虑作艰难梭菌培养和毒素检测。除了婴幼儿和有活动性腹泻症状的患者,不推荐拭子采样作常规病原体的检测(见直肠拭子)。
艰难梭菌
直接将水样便或软便装入一个干净、干燥的容器中。软便应能呈现所盛容器的形状,拭子标本不宜用于毒素检测
≥5ml
≤1h,室温
1-24h,4℃;
>24h,-20℃
用于培养:
2天
1/2天
患者应该是每24小时排稀便或软便≥5次。从成形便或硬便中检出检出艰难梭菌也属于正常携带。-20℃冷冻会使细胞毒性快速丢失。
大肠埃希世菌
O157:H7
直接将水样便或血便排入一个干净、干燥的容器中。
干净、防漏、广口的容器或拭子运送管;≥2g
未防腐:≤1h,室温;拭子运送管
≤24
h,4℃;≤48
h,室温
针对频繁腹部痉挛发病6天内的患者,采集血便和水样便
脓细胞(不推荐采用)
将粪便直接排入清洁、干燥的容器中,在1h内运送到微生物实验室或转入寄生虫及虫卵的运送系统中(10%的甲醛液或聚乙烯醇固定剂[PVA]中)
无菌、防漏、广口的容器或10%的甲醛液或聚乙烯醇固定剂[PVA];
未防腐:≤1h,室温;
甲醛液/PVA:不限时,室温
h,4℃
不限时,室温
这种处理方式不令人满意,因为其结果没有什么临床价值,还会误导诊治。革兰氏或简单的美兰染色可用于观察白细胞。也有一些商品检测试剂可用。
直肠拭子
1.将拭子小心插入肛门约2.5cm处,超过扩约肌。
2.轻轻转动拭子,在直肠隐窝采取标本。
3.取出的拭子可见到粪便,用于检测腹泻病原体。
≤2h,室温
H,室温
用于检测淋病奈瑟氏菌、志贺氏菌、弯曲菌、及复合疱疹病毒和直肠携带的B群链球菌,或者用于为不能排便的患者获取标本。
瘘管
体液:腹部的,腹水,胆汁,关节液,穿刺液,心包液,腹腔液,胸水,滑液,胸腔穿刺液体
见脓肿
1.用2%的碘酒充分消毒皮肤
2.经皮肤穿刺抽吸或外科手术中获取标本
3.立即送往实验室
4.尽量多送检体液;绝不可送检蘸取液体的拭子
用于细菌和酵母菌培养的血培养瓶或螺帽无菌试管或厌氧运送系统。
细菌培养,≥1ml,
真菌,≥10ml,
分支杆菌,≥10ml,
≤15min,室温
h,,室温
心包液或用于真菌培养的液体:≤24h,4℃
羊水和后穹窿穿刺液应该用厌氧运送系统送检:而且Grame染色前不需要离心。其他的液体最好用细胞离心制备Grame染色(见表4)
坏疽组织
胃标本:
洗液或灌洗液
采样时机:早晨患者未进食,未起床时将鼻胃管从口腔或鼻腔插入胃中用25-50ml冷却无菌蒸馏水灌洗。回收样本放入一个无菌、防漏的容器中,在取出插管前停止抽吸,并将其钳紧。
无菌、防漏容器
≤15min,室温,或在1h内中和
不宜采集表面或浅表组织;首选活检组织或抽吸物标本应立即迅速处理,因为分支杆菌在胃洗液中会很快死掉。
每35-50ml胃洗液要用1.5ml的40%无水Na2HPO4液体予以中和
女性尿道标本
在患者小便1h后采集
1.擦去尿道口渗出物
2.经阴道靠着耻骨联合处按摩尿道用拭子采集排出物
如果没能获取排出物,用聚烯吡酮碘肥皂(局部抗感染药)清洗外尿道并用水清洗。将一泌尿生殖道拭子插入尿道内2-4cm,转动拭子2秒。
阴道标本
1.擦去多余的分泌物或排出物
2.用无菌的拭子或吸管从阴道穹窿粘膜采取分泌物
3.如果要作涂片,则用另一根拭子
对于子宫内的装置,要将其整个放入无菌容器中,室温下送检。
建议作一份Gram染色以确定是否为细菌性阴道炎。培养往往不准确并容易误导。
尿道标本
将一泌尿生殖道拭子插入尿道内2-4cm,转动拭子,至少停留2秒促使标本吸附
毛发、真菌病标本
1.用镊子夹取至少10-12根具完整柄部的感染头发
2.放入一清洁试管或容器内
清洁容器、10根毛发
1/天/感染源
在活性病灶边缘刮取标本时,若有头皮屑,将其收集。应注意近期是否进行了任何抗真菌治疗。
指甲、脚癣
1.用蘸有70%的酒精的纱布擦拭指甲(不是用棉签)。
2.将感染的大部分剪除掉,采集指甲下的样本或碎屑
3.将标本放入清洁容器中
清洁的容器刮取标本量应足够覆盖图钉头
藏毛囊肿
下呼吸道支气管肺泡灌洗液,支气管刷取物或清洗液,气管抽吸物
1.抽吸物或洗出液放入痰采集器中
2.将刷取物放入装有盐水的无菌容器中
无菌容器
,>1ml
作定量分析,需要40-80ml的液体.作刷取物的定量分析,将刷取物放入0.5ml的胰豆肉汤中。
痰,咳出的
1.要在护士或医生的监视、指导下取标本。
2.先要让患者用清水清洗或漱口以清除口腔内的正常菌群。
3.指导患者深咳嗽以获得下呼吸道的标本(不要鼻后液)。放入一无菌容器中。
最低量:
细菌,>1ml
真菌,3-5ml
分支杆菌,5-10ml
寄生物,3-5ml
室温
一次/天
儿科患者不会咳出痰,医生应该采用抽吸方式获取标本。标本在镜下最好≤10个鳞状上皮细胞/100视野
痰,诱导的
1.要让患者刷洗了牙龈和舌之后再用清水漱口,清除口腔内的正常菌群;
2.使用真空负压采集患者深部痰液于真空采集管内,立即送检;
3.指导患者深咳嗽以获得下呼吸道的标本(不要鼻后液),放入一无菌容器中。
无菌容器,送检量为吸痰液
2-3>1ml.
寄生物,3-5m
上呼吸道口腔标本
1.用棉签清除口腔病灶表面的分泌物和碎屑,扔掉。
2.用第二根拭子用力采取病灶的标本,避免碰到其他正常组织。
呼吸道发现的真菌主要为隐球菌和丝状真菌,其他的酵母菌很少引起下呼吸道感染。表面组织的的标本不利于细菌学评价,不宜采集。
应选择活检组织或抽吸物作为检测标本
鼻
鼻咽标本
1.用经盐水湿润的拭子插入鼻孔约2cm.
2.将拭子贴着鼻粘膜转动。
1.将一藻酸钙拭子经鼻腔轻轻插入鼻咽后部
2.缓慢转动拭子5秒钟以吸收分泌物
3.取出拭子并床旁接种或将拭子放入培养基送检
直接接种于培养基或拭子运送
接种于平板,≤15min,室温
拭子,≤2h,室温
前鼻标本的培养,用以检测葡萄球菌和链球菌携带者或鼻损伤者的检测。
使用扩鼻器会更好。
咽喉
1.用一压舌板压住舌
2.用无菌拭子在后咽部,扁桃体,及发炎部位采集标本
咽拭子培养禁忌用于会厌发炎患者,作淋球菌培养的拭子要用含碳粉运送培养基送检并于12小时内接种于平板,JEMBEC,Biobags,&GonoPak就适用于在室温下运送
皮肤,皮肤真菌病
用70%酒精清洁患处
2.轻轻刮取皮肤边缘,勿刮出血
3.将标本放入清洁容器中或夹在两张干净载玻片之间
清洁容器,刮取的量足以覆盖图钉头
玻片捆扎起来装入纸袋
组织
1.装入无菌容器中送检
2.对于少量的标本要加无菌盐水保持湿润
3.防止组织标本干涸
厌氧运送系统或无菌带螺盖的广口瓶,需要加入盐水保湿
1.通常送检标本要尽量多。若有可能则留取一些外科组织标本于-70℃保存,以备将来研究之用
2.仅通过表面摩擦所取的拭子,不能送检
3.用作定量分析的,在2×1cm大小,即约500mg标本适宜
4.盐水对菌团菌可能有抑制作用
女性中段尿
男性中段尿
直导尿管尿
留置导管
创伤伤口
1.用肥皂和水彻底清洗尿道口
2.用湿纱布块漂洗
3.分开阴唇,排尿
4.在排除几毫升尿后,不要停止,接取中段部分的尿液
1.用肥皂和水清洗龟头
2.用湿润纱布块漂洗
3.回拉开皮包排尿
1.肥皂和水彻底清洗尿道口
3.采用无菌手段将导管插入膀胱
4.在留出约15ml后,采集尿液约入无菌容器中。
1.用70%的酒精消毒导管的采集部分
2.用针头或注射器无菌采集5-10ml尿
3.转入无菌试管或容器中
无菌、广口容器,10ml直接排入专用的无菌容器或尿液转运成套器具
无菌防漏的容器
未防腐:≤2h,室温
防腐:≤24h,室温
女性尿液衣原体抗原可能难以检出。尿液对细胞系有毒性并不适宜作衣原体的培养。中段尿用作细菌培养。
此过程肯能会将尿道的菌群带入膀胱中并增加医源性感染的危险。
注:a缩略语:AFB,抗酸杆菌;BPA,血琼脂平板;BHI,心脑浸液;CHOC,巧克力琼脂;CSF脑脊液;CVP,中心静脉压;EtOH,乙醇;i.v.静脉内;PVA,聚乙烯乙醇固定液;RT,室温。b
所有标本必须放入有分割空间的防漏塑料袋内运送。
10.12标本接收与拒收
拒收原因
采取措施
标本量不足
采取正确采血量
凝血
使用正确抗凝管,并进行正确颠倒次数
溶血
查找溶血产生原因,重新采集,并避免再次溶血
抗凝剂血量比例错误
请按照试管标记刻度采集样品量
标本容器错误
请用正确容器盛放标本
标本污染
请按照检测项目对应的标本采集规范,正确采集标本
条码粘贴位置错误
请将条码竖贴于试管帽下0.5cm位置处,ID号和患者信息朝上,数字朝下
标本类型错误
请按医嘱要求采集正确标本
其他
11检验流程及注意事项
1检验项目的申请
1.1同一仪器上的组合项目尽量生成一个条码。如心梗三项+BNP+PCT;电解质+生化或电解质+肾功+肝功+血脂+心肌酶谱。
2条码打印
打印的条码需完整,否则可能无法接收、录入或影响上机扫码。
3标本采集
3.1采血量一定足够,尤其是凝血图、血沉、血分析、血气分析、血型要抽到刻度线,抗凝管一定颠倒混匀5-8次。
3.2采集顺序:培养→免疫(红或黄)→凝血(蓝)→血沉(黑)→血气/生化(绿)→血分析(紫)→血糖/乳酸(灰)
3.3告知义务:对于住院的病人主管护士一定告知采血要求;尿常规取中断半杯晨尿为佳,大便常规木棍取外观异常部分拇指或者蚕豆大小,不能用吸水性材料如棉花签、卫生纸采集等。
4条码粘贴
4.1粘贴规范:横平竖直,下端条码不可超过试管底部,侧面留观察窗口。
4.2一个条码对应一管血,尽量避免一管血上粘贴多个条码。若系统问题导致组合项目不能生成一个条码,请及时联系LIS工程师。
4.3特殊病人检查,如没有条码,请一定将试管上的标签贴在申请单上再送检。
5标本运输
5.1标本运输需及时,大便1h内、小便2h内送达检验科,血气、生化需立即送检,血培养室温(25度)保存不超过24h,其他标本也需尽快送达检验科。
5.2运输工人需具备一定的标本检查拒收能力:如血标本盖子是否盖好,是否漏血;小便杯盖子是否盖紧,量是否明显不足;大便是否用棉花签或卫生纸采集。如果有以上明显错误应视为不合格,直接向护士站拒收。确认标本无明显错误后装入专用转运箱离科。
5.3住院病人大小便标本,请告知患者放在科室的指定地点,定期统一送检或由患者直接送达检验科大小便窗口。
6移交检验科
送达检验科后,通过条码扫描录入电脑,方结束移交检验科的工作。特殊体检标本由运送工作人员自己扫描录入。
12住院病人标本运送流程
1双方核对内容包括病人条码信息是否完整清晰,检查项目与所用容器是否相符,标本量是否充足,标本是否被污染等。
2血气、心肌酶、心梗三项、Pro-BNP默认为急查项目,如其它项目需急查请医护人员做好急查标记,工友送到检验科要做好急查登记,医生可在his上查看病人结果。
3标本运送注意事项:(1)信息完整性:所有标本都要注意防止标本标签的丢失和混淆(2)生物安全:防止标本容器的破损、防止标本泄露污染工作人员及环境
容),对急诊标本及时送检,快速检测,快速报告(4)特殊标本特别注意:血液标本运输过程中要防止过度震荡以免引起溶血;血气标本不能开盖,必须保证密闭送