近年来,由于日常生活水平的提高,饮食上过多摄入高脂食品的患者不断增多,日常标本中乳糜血屡见不鲜。什么是乳糜血呢?人体摄入的脂肪经过在小肠消化、吸收后,变成细小的乳糜微粒进入血液,乳糜微粒多到一定程度时,血清就由清澈透明的淡黄色变成乳白色,这时,我们称它叫做乳糜血或“脂血”。当血清样本为乳糜血时,检测项目会受干扰。
一
干扰机制
血容量改变/溶剂排斥:在乳糜血清中大量脂蛋白“挤占”了原本属于一部分水的体积,而被脂蛋白占据的体积内并不含电解质,即发生了电解质排斥效应,这就导致采用间接ISE时检测值偏低。如:钠Na、氯Cl。
溶血:乳糜血中的脂肪颗粒能够降低红细胞表面活剂的溶血速度,引起红细胞破坏,从而加速溶血。且红细胞破裂后释放的血红蛋白会使最终反应的吸光度增加,从而引起检结果偏高。如:乳酸脱氢酶LDH、钾K。
二
常用处理方法
一般情况下,实验室会要求该患者素食三天后重新空腹采血,大部分患者素食后采血,血清状态正常。但是在日常工作中我们还是能遇到经多次采血,仍为乳糜血,患者也为此而抱怨。还有一些因无法进食靠输脂肪乳摄取营养或是胰腺炎造成乳糜血的患者显然不可能达成。目前检验科生化室所用生化仪器多为分光光度法,乳糜血中含有乳糜微粒,使浊度增加,透光度下降,吸光度升高,产生正干扰,从而影响检测的结果。
为解决这一问题。可以用不同处理方法对乳糜血进行检测:
1、生理盐水稀释法:随着科学的进步,很多全自动生化分析仪都有自动稀释、换算的功能,对于一些条件不足的小型医院,也可以先手工稀释样本,再进行测定,最后结果乘以稀释倍数。这种方法可以在一定程度上降低样本空白而提高测定的准确性,但是该法并不能完全消除脂浊对测定结果的影响,特别是要注意样本稀释后由于基质效应而导致测定结果出现一定的误差。
2、乙醚抽提法:在高脂血样本中加入有机溶剂乙醚,震荡混匀后离心,可有效地将样本中的甘油三酯等脂溶物质萃取出来。但因乙醚抽屉样本时易使蛋白质酶类发生变性,使检测结果偏低,从而影响有些检验项目的测定。
4、高速离心法:离心机转速≥10000r/min的称为高速离心机,将脂浊血清加盖密封,经高速离心后,血清可以分成两层,吸取下层的血清进行临床生化测定,适用大部分临床生化测定指标的测定。但该法设备要求较高,中小医疗机构没有高速离心机,限制了该法的使用。
三
方法比较
为了找到检测乳糜血的更好方法,我们选择了靠输脂肪乳摄取营养的病房患者,患者5天前样本正常情况下检测过血清,此次为输脂肪乳后乳糜情况下待检测的样本。下面我们就通过高速离心和生理盐水稀释两种方法对乳糜血进行检测。样本一,用原乳糜血对标本进行检测。样本二,用高速离心机离心后对标本进行检测。样本三,将原乳糜血样本用生理盐水稀释后进行检测。
样本一:原乳糜血清
样本二:高速离心机15000转离心10分钟后(取下层血清)
从左向右顺序为:原乳糜血清,高速离心血清,原乳糜血清稀释5倍
样本三:原乳糜血稀释5倍
分别对三种不同血清进行检测,与该患者5天前血清正常情况下检测的历史结果比较如下:
分析对比后发现个别项目原乳糜血清和稀释法都存在乳糜微粒,影响生化仪吸光度,从而影响检验结果。稀释法AST、TBA、ADA、CREA、TG稀释后存在较大误差,高速离心法离心后乳糜微粒会到液面的上层,而我们检测的是下层的血清,与该患者5天前血清正常情况下检测的历史结果相差不大,均在可允许误差内。采用高速离心法可以较明显消除乳糜血标本对生化检测检测结果的影响。
通过以上方法的比较不难发现高速离心法是处理特殊患者乳糜血清的较好方法。不向待检血清标本中加入任何化学试剂、不稀释待检血清、方法快速、可靠。但高速离心后的血清,上层有乳糜微粒,取下层血清时,会吸取少许乳糜微粒,而造成误差。所以,高速离心法适用于持续乳糜血的特殊患者标本检测,大部分患者我们仍然建议素食三天后空腹采血。
四、注意事项
为避免患者因乳糜血而造成重新采血的困扰,如遇高脂血症、胰腺炎恢复期等容易产生乳糜血的患者,请临床医生在开检验申请单的同时告知患者抽血前一天应清淡饮食控制总热量。其次收到患者报告单时也应注意患者信息栏中标本状态有无备注浑浊或乳糜。此外,输脂肪乳的患者,也请护士在输完脂肪乳12小时后抽血。
收到乳糜血的标本我们会根据科室以及临床诊断,对持续乳糜血的特殊患者采用高速离心法检测血清,对于首次严重乳糜血的门诊患者,我们会发出不合格标本检验报告,建议您素食三天后空腹采血。
五、干扰指数
国内临床生化检测中并没有一个准确的血清外观状况衡量标准或体系,目测判断这些指标,主观性强,造成偏差大,判定程度无法一致,并且不便全面监测血清标本。目前,本科生化室采用罗氏702全自动生化仪,具备分析前标本血清指数的测定,对脂血有量化的标准。特别是对一些肉眼无法识别的轻度混浊血清指数测定结果更客观、准确,可减少主观性偏差,在控制检验项目的误差方面发挥重要作用。
以下简要摘取我科现用仪器所给出的脂血对各检测项目的干扰指数