倪金金1，王裕玉2，徐钢春1、2，聂志娟2，孙毅2，李全杰2，徐跑1、2*
(1.上海海洋大学水产科学国家级实验教学示范中心，上海201306；2.中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业农村部淡水渔业和种质资源利用重点实验室，江苏无锡214081)
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关键词:大口黑鲈；池塘工程化循环水养殖；养殖密度；生长；生理指标；基因表达
池塘循环流水槽养殖(in-pondracewaysystem,IPRS)是中国从美国大豆出口协会引进的一种新型养殖模式，由2%～5%的池塘水面建设具有气提推水增氧和集排污装备的系列水槽作为养殖区，剩余水面作为净化区对养殖尾水进行净化处理，此模式具有节水节地、产量高、渔药使用量低、养殖全程可控等优点，已被列入《农业绿色发展技术导则(2018—2030年)》，成为中国农业农村部主推的绿色健康养殖技术之一，目前对该模式研究主要集中在系统构建优化、养殖品种的筛选、肉质评价与浮游生物群落特征分析等[1-3]。国内已采用这种养殖模式成功养殖了大口黑鲈Micropterussalmoides、斑点叉尾鮰Ictaluruspunctatus、罗非鱼Oreochromisniloticus、黄颡鱼Pelteobagrusfulvidraco等鱼类，并获得了良好的经济效益和生态效益[1]。
水产养殖过程中，提高养殖密度被认为是集约化养殖模式中提高鱼产量的重要手段之一。然而，大量研究表明，养殖密度过高会导致鱼类释放应激激素，进而改变鱼类的生长、血液参数及免疫功能[4-6]，此外，养殖密度还会影响鱼类生长基因(生长激素GH和胰岛素样生长因子IGF-I)的表达,如王晓梅等[7]在革胡子鲶Clariasgariepinu幼鱼养殖密度试验中发现，养殖密度越高，鱼垂体GH基因的表达量越低。目前，有关养殖密度对鱼类生长性能影响的研究较多，但养殖密度对鱼体GH/IGF轴基因表达影响的研究较少。
养殖试验在中国水产科学研究院淡水渔业研究中心扬中基地工程化循环流水槽内进行，系统结构和水槽剖面图分别如图1和图2所示。在池塘环沟内建造的2排流水槽呈对角线布置，形成对角循环对流、能耗最低的循环流水设计模式。流水槽分为气提推水增氧区、养殖区(22.0m×5.0m×2.5m)和集污区。流水槽前端安装气提推水增氧装置，底部安装微孔增氧装置。流水槽养殖区域面积合计为1320m2，占池塘环沟总面积的3.19%，剩余的池塘区域为净化区域，通过物理沉淀法，种养空心菜、薄荷和鱼腥草，以及放养花白鲢和三角帆蚌对养殖尾水进行净化处理。养殖水源为长江水，水质清新无污染，符合《渔业水质标准》。
图1池塘工程化循环水养殖系统结构示意图Fig.1Diagramofthein-pondracewaysystems(IPRS)
图2流水养殖槽剖面示意图Fig.2Profilediagramofin-pondracewaysystems(IPRS)
1.2.1试验设计及饲养管理将同一批次、健康活跃、大小一致的大口黑鲈幼鱼(初始体质量为4.50g±0.23g)随机分配到流水槽中。试验设置3个养殖密度组，记为SD1、SD2、SD3，初始养殖密度分别为0.2、0.4、0.6kg/m3，每个密度组设3个重复，共设置9个水槽。不同养殖密度组的初始放养量分别为10000、20000、30000尾，养殖试验持续120d。
试验期间，投喂膨化颗粒饲料(粗蛋白质含量≥47%，粗脂肪含量≥5%，浙江欣欣天恩水产饲料有限公司)，根据鱼体质量的变化投喂不同规格的饲料。采用饱食投喂法，每天投喂4次(6:00、10:00、14:00和17:00)，并根据鱼体质量的增加、天气状况、生理状态、水质情况等，适当调整投喂量和投喂次数以满足鱼体生长的需求。每天观察并记录鱼的摄食及死亡情况。试验期间，24h连续推水增氧以保证水体中溶解氧>5mg/L，水流速度为2～3cm/s，水温为22.6～30.5℃，氨氮含量为0.06～0.62mg/L，pH为7.5～8.22，亚硝酸氮含量为0.18～0.33mg/L。
1.2.2样本采集分别于试验的第30、60、90、120天采集样本。从每个水槽随机捞取20尾鱼，立即用MS-222(100mg/L)麻醉，准确测量其湿质量、体长。然后取10尾鱼从尾静脉采血，分装于1.5mL的离心管中，4℃冰箱中静置4h后，以4500r/min离心15min，吸取上清液，-80℃超低温冰箱中保存，用于血清生化指标测定。随后将鱼解剖，取其肝脏、脑、肌肉、肠道等组织，迅速放入液氮罐中带回实验室于-80℃冰箱中保存，用于后期组织生化指标和基因表达分析。另取10尾鱼于-30℃下保存，用于营养成分分析。
1.2.3指标的测定与计算
1)生长性能指标。试验鱼的存活率(SR，%)、增重率(WGR，%)、特定生长率(SGR，%/d)、日摄食量(FR,g)、肥满度(CF，%)、肝体指数(HSI，%)和脏体指数(VSI，%)计算公式如下：
SR=nt/n0×100%，
WGR=(Wt2-Wt1)/Wt1×100%，
SGR=(lnWt2-lnWt1)/t×100%，
FR=F/[n0(t2-t1)]，
CF=W/L3×100，
HSI=WL/W×100%，
VSI=WI/W×100%。
2)体成分。将全鱼样品放入烘箱中，烘干至恒重，根据烘干前后质量的变化计算水分含量。采用马弗炉550℃灼烧法(GB/T5009.4—1985)、索氏抽提法(T5009.6—1985，济南海能仪器有限公司，SOX500脂肪测定仪)、凯氏定氮法(GB/T5009.5—1985，济南海能仪器有限公司，K1100全自动凯氏定氮仪)分别测定灰分、粗脂肪、粗蛋白质含量。
3)血清生化指标和免疫参数。采用全自动生化分析仪(迈瑞BS-400，深圳)测定血清总蛋白(TP)、总胆固醇(TC)、血糖(Glu)、甘油三酯(TG)含量等指标；采用酶联免疫检测法(ELISA)测定血清皮质醇和溶菌酶含量。
GH、IGF-I、β-actin与18S的表达量使用TaKaRa公司的SYBRPrimeScriptTMRT-PCRKit进行PCR反应。反应体系为：TBGreenFastqPCRMix7.5μL，上、下游引物各为0.6μL，cDNA1μL，灭菌水5.3μL。反应程序为：95℃下预变性30s；95℃下循环变性5s，58.6℃(或58℃)下退火复性10s，共进行40个循环。熔解反应条件为65℃到95℃，读板30s记录荧光量。以β-actin与18S为内参基因，对得到的各样本的Ct值做均一化处理，应用2-ΔΔCt法计算低、中、高密度组鱼脑GH、肝脏IGF-I基因mRNA相对表达量。
表1实时荧光定量PCR引物Tab.1Gene-specificreal-timequantitativePCRprimers
引物primer引物序列(5'～3')primersequence(5'-3')产物长度/bplengthofproduct退火温度/℃annealingtemperatureβ-actin-FATCGCCGCACTGGTTGTTGACβ-actin-RCCTGTTGGCTTTGGGGTTC18758.018S-FGGACACGGAAAGGATTGACAG18S-RGGACACGGAAAGGATTGACAG18258.0GH-FGAGCAGCGTCAACTCAACAAGH-RTCAAACGATACGAGATAGACAACA13058.6IGF-I-FCGGAGTCTCGTTCGTTATCGGIGF-I-RGCCTCTATCTCCACACACAAACT13658.6
试验数据以平均值±标准误(means±S.E.)表示。采用SPSS19.0软件对试验数据进行单因素方差分析(One-wayANOVA)，用LSD法进行组间多重比较，差异显著性水平设为0.05。
120d的养殖试验结束时，各养殖密度组存活率(91.45%～93.33%)无显著性差异(P>0.05)(图3A)；30d时，SD2组试验鱼的体质量、增重率和SGR均显著高于SD1组和SD3组(P<0.05)，而SD1组与SD3组间无显著性差异(P>0.05)；60～120d时，各密度组大口黑鲈体质量、增重率、SGR随养殖密度的增加而降低；60～120d时，SD1组鱼体质量均显著高于SD3组(P<0.05)，而SD2与SD3组间无显著性差异(P>0.05)(图3B)；60～90d时，增重率变化趋势与体质量一致，而在120d时，各养殖密度组间无显著性差异(P>0.05)(图3C)；60d时各密度组SGR有显著性差异(P<0.05)，而在90d和120d时，各密度组间无显著性差异(P>0.05)(图3D)；30d时，SD3试验鱼日摄食量显著高于其他两组(P<0.05)，而在90d和120d时，SD3组日摄食量则显著低于其他两组(P<0.05)(图3E)。试验结束时，3个密度组试验鱼平均产量分别为5.64kg/m3(SD1)、8.79kg/m3(SD2)和11.21kg/m3(SD3)。
从表2可见：不同养殖密度对大口黑鲈体水分、灰分与粗蛋白质含量无显著性影响(P>0.05)，而SD1和SD2组粗脂肪含量显著高于SD3组(P<0.05)；SD1组试验鱼的肥满度显著高于SD2和SD3组(P<0.05)，而肝体指数与脏体指数在各处理组间无显著性差异(P>0.05)。
表2不同养殖密度对大口黑鲈体成分和形体指标的影响
Tab.2EffectsofstockingdensityonthebodycompositionandsomaticparametersoflargemouthbassMicropterussalmoidesinIPRS
注：同列中标有不同字母者表示组间有显著性差异(P<0.05)，标有相同字母者表示组间无显著性差异(P>0.05)。
Note:Themeanswithdifferentletterswithinthesamecolumnaresignificantlydifferentinthegroupsatthe0.05probabilitylevel,andthemeanswiththesameletterwithinthesamecolumnarenotsignificantdifferences.
养殖密度显著影响大口黑鲈血清皮质醇、血糖、甘油三酯和溶菌酶含量。前90d内，大口黑鲈血清皮质醇与血糖含量未受养殖密度的影响(P>0.05)，120d时，SD3组皮质醇含量和血糖含量显著高于SD1组(P<0.05)(图4A、B)；甘油三酯含量的变化趋势与血糖类似，120d时，SD3组甘油三酯含量显著高于其他两组(P<0.05)，其在整个养殖周期内变化幅度不大，维持在1.80～2.10mmol/L(图4C)；30d时，大口黑鲈血清溶菌酶含量未受到养殖密度的影响(P>0.05)，60～120d时，SD1组显著高于SD3组(P<0.05)(图4D)。
图4不同养殖密度对大口黑鲈血清生化和免疫指标的影响Fig.4EffectsofstockingdensityontheserumbiochemicalandimmuneindicesoflargemouthbassMicropterussalmoidesinIPRS
图5不同养殖密度对大口黑鲈脑GH和肝脏IGF-I基因相对表达量的影响Fig.5EffectsofstockingdensityonrelativeexpressionlevelinbrainGHandhepaticIGF-1oflargemouthbassMicropterussalmoidesinIPRS
在集约化水产养殖生产中，养殖密度被认为是决定鱼类生长和盈利的重要因素之一。高养殖密度作为一种慢性应激源，会使鱼类产生一级、次级、三级应激反应，其中，三级反应会引起个体生长速率、抗病能力、繁殖能力及行为等发生改变[12]。本试验中，120d的养殖试验表明，池塘工程化循环水系统中养殖密度对大口黑鲈生长性能产生了显著的影响。30d时，SD2组试验鱼的体质量、增重率、特定生长率均显著高于SD1与SD3组(P<0.05)；60～120d时，试验鱼的体质量、增重率和特定生长率变化规律均为SD1>SD2>SD3，这与对大菱鲆Scophthalmusmaximus幼鱼[13]和厚唇鲻Chelonlabrosus幼鱼[14]等的研究结果类似。虽然在试验结束时，试验鱼的平均产量变化规律均为SD3>SD2>SD1，但SD3组的高产量是以大的种群数量为基础，而不是以高的生长性能为前提[15]，因此，结合试验结果和效益，建议此阶段的大口黑鲈合理的养殖密度为0.2～0.4kg/m3。
1)养殖前30d，养殖密度为0.4kg/m3组大口黑鲈生长率优于0.2kg/m3和0.6kg/m3组，而在养殖后期，养殖密度增加会引起大口黑鲈的生长下降、免疫性能降低。
2)养殖密度对大口黑鲈生长的影响与GH/IGF-1轴的调控有关。
参考文献：
[1]WANGYY,XUGC,NIEZJ,etal.Growthperformanceofbluntnoseblackbream,channelcatfish,yellowcatfish,andlargemouthbassrearedinthein-pondracewayrecirculatingculturesystem[J].NorthAmericanJournalofAquaculture,2019,81(2):153-159.
[2]HARIMANAY,TANGX,LEGW,etal.Qualityparametersofblackcarp(Mylopharyngodonpiceus)raisedinloticandlenticfreshwatersystems[J].LWT,2018,90:45-52.
[3]孟顺龙,徐跑,李丹丹,等.团头鲂池塘工业化生态养殖系统中浮游植物群落结构分析[J].上海海洋大学学报,2018,27(1):79-90.
MENGSL,XUP,LIDD,etal.Communitystructureofzooplanktoninanindustrialeco-aquaculturesysteminablunt-snoutbreamMegalobramaamblycephalaculturepond[J].JournalofShanghaiOceanUniversity,2018,27(1):79-90.(inChinese)
[4]庄平,李大鹏,王明学,等.养殖密度对史氏鲟稚鱼生长的影响[J].应用生态学报,2002,13(6):735-738.
ZHUANGP,LIDP,WANGMX,etal.EffectofstockingdensityongrowthofjuvenileAcipenserschrenckii[J].JournalofAppliedEcology,2002,13(6):735-738.(inChinese)
[5]LUPATSCHI,SANTOSGA,SCHRAMAJW,etal.EffectofstockingdensityandfeedinglevelonenergyexpenditureandstressresponsivenessinEuropeanseabassDicentrarchuslabrax[J].Aquaculture,2010,298(3/4):245-250.
[6]TOLUSSICE,HILSDORFAWS,CANEPPELED,etal.Theeffectsofstockingdensityinphysiologicalparametersandgrowthoftheendangeredteleostspeciespiabanha,Bryconinsignis(Steindachner,1877)[J].Aquaculture,2010,310(1/2):221-228.
[7]王晓梅,陈成勋,邢克智,等.不同养殖密度下革胡子鲶幼鱼的生长和垂体GH基因mRNA表达分析[J].南方水产科学,2015,11(3):35-40.
WANGXM,CHENCX,XINGKZ,etal.AnalysisofdailyweightgainandGHmRNAexpressioninjuvenileClariasgariepinurearedatdifferentstockingdensities[J].SouthChinaFisheriesScience,2015,11(3):35-40.(inChinese)
[8]朱择敏,马冬梅,白俊杰,等.配合饲料、冰鲜杂鱼对大口黑鲈生长和LPL基因mRNA表达的影响[J].大连海洋大学学报,2014,29(4):360-363.
ZHUZM,MADM,BAIJJ,etal.EffectsofformulateddietsandfrozentrashfishongrowthandexpressionofLPLgenemRNAinlargemouthbassMicropterussalmoides[J].JournalofDalianOceanUniversity,2014,29(4):360-363.(inChinese)
[9]陈乃松,周洁,靳利娜,等.禁食对大口黑鲈生长和肝脏IGF-ImRNA表达丰度的影响[J].中国水产科学,2010,17(4):713-720.
CHENNS,ZHOUJ,JINLN,etal.EffectsoffastingongrowthandexpressionabundanceofIGF-ImRNAinlargemouthbass(Micropterussalmoides)[J].JournalofFisheryScienceofChina,2010,17(4):713-720.(inChinese)
[10]樊佳佳,白俊杰,李小慧,等.大口黑鲈生长激素促分泌素cDNA结构和早期发育阶段表达谱分析[J].水产学报,2010,34(11):1656-1663.
FANJJ,BAIJJ,LIXH,etal.GhrelincDNAstructureandexpressionprofileinearlydevelopmentoflargemouthbass(Micropterussalmoides)[J].JournalofFisheriesofChina,2010,34(11):1656-1663.(inChinese)
[11]施培松.匙吻鲟和鳙的生长、肌肉品质比较及FAS基因克隆与表达[D].武汉:华中农业大学,2013.
SHIPS.Cloningandexpressionoffattyacidsynthasegeneandcomparisonongrowth,musclequalityofPolyodonspathulaandAristichthysnobilis[D].Wuhan:HuazhongAgriculturalUniversity,2013.(inChinese)
[12]YARAHMADIP,MIANDAREHK,FAYAZS,etal.Increasedstockingdensitycauseschangesinexpressionofselectedstress-andimmune-relatedgenes,humoralinnateimmuneparametersandstressresponsesofrainbowtrout(Oncorhynchusmykiss)[J].Fish&ShellfishImmunology,2016,48:43-53.
[13]IRWINS,O’HALLORANJ,FITZGERALDRD.Stockingdensity,growthandgrowthvariationinjuvenileturbot,Scophthalmusmaximus(Rafinesque)[J].Aquaculture,1999,178(1/2):77-88.
[14]DELASHERASV,MARTOS-SITCHAJA,YúFERAM,etal.Influenceofstockingdensityongrowth,metabolismandstressofthick-lippedgreymullet(Chelonlabrosus)juveniles[J].Aquaculture,2015,448:29-37.
[15]罗江,杜江,冷小茜,等.不同养殖密度对长江鲟稚鱼生长的影响[J].淡水渔业,2018,48(3):107-111.
LUOJ,DUJ,LENGXQ,etal.EffectofdifferentstockingdensitiesongrowthofAcipenserdabryanusjuveniles[J].FreshwaterFisheries,2018,48(3):107-111.(inChinese)
[16]薛宝贵,楼宝,徐冬冬,等.密度胁迫对黄姑鱼幼鱼生长、代谢及非特异性免疫的影响[J].渔业科学进展,2013,34(2):45-51.
XUEBG,LOUB,XUDD,etal.Impactofdensitystressongrowth,metabolismandnon-specificimmunefunctionsofjuvenileNibeaalbiflora[J].ProgressinFisherySciences,2013,34(2):45-51.(inChinese)
[17]MARCHANDF,BOISCLAIRD.Influenceoffishdensityontheenergyallocationpatternofjuvenilebrooktrout(Salvelinusfontinalis)[J].CanadianJournalofFisheriesandAquaticSciences,1998,55(4):796-805.
[18]ZAHEDIS,AKBARZADEHA,MEHRZADJ,etal.Effectofstockingdensityongrowthperformance,plasmabiochemistryandmusclegeneexpressioninrainbowtrout(Oncorhynchusmykiss)[J].Aquaculture,2019,498:271-278.
[19]MECHALYAS,RICHARDSONE,RINKWITZS.Activityofetv5aandetv5bgenesinthehypothalamusoffastedzebrafishisinfluencedbyserotonin[J].GeneralandComparativeEndocrinology,2017,246:233-240.
[20]BRECKJE.Bodycompositioninfishes:bodysizematters[J].Aquaculture,2014,433:40-49.
[21]宋志飞,温海深,李吉方,等.养殖密度对流水池塘系统中俄罗斯鲟幼鱼代谢机能的影响[J].大连海洋大学学报,2017,32(4):393-398.
SONGZF,WENHS,LIJF,etal.InfluenceofstockingdensityonphysiologicalmetabolismfunctionofjuvenileRussiansturgeonAcipensergueldenstaedtiinrunningwatercultivation[J].JournalofDalianOceanUniversity,2017,32(4):393-398.(inChinese)
[22]OKéV,GOOSENNJ.TheeffectofstockingdensityonprofitabilityofAfricancatfish(Clariasgariepinus)cultureinextensivepondsystems[J].Aquaculture,2019,507:385-392.
[23]王秋实,孙大江,赵春刚.放养密度对池塘养殖施氏鲟幼鱼生长和肌肉成分的影响[J].水产学杂志,2015,28(2):22-25.
WANGQS,SUNDJ,ZHAOCG.EffectsofstockingdensityongrowthandmuscularcompositioninAmursturgeonAcipenserschrenckiiinpondculture[J].ChineseJournalofFisheries,2015,28(2):22-25.(inChinese)
[24]PICCOLOG,MARONOS,BOVERAF,etal.Effectofstockingdensityandprotein/fatratioofthedietonthegrowthofDoversole(Soleasolea)[J].AquacultureResearch,2008,39(16):1697-1704.
[25]SUREZMD,GARCA-GALLEGOM,TRENZADOCE,etal.Influenceofdietarylipidsandculturedensityonrainbowtrout(Oncorhynchusmykiss)fleshcompositionandqualityparameter[J].AquaculturalEngineering,2014,63:16-24.
[26]BARTONBA.Stressinfishes:adiversityofresponseswithparticularreferencetochangesincirculatingcorticosteroids[J].IntegrativeandComparativeBiology,2002,42(3):517-525.
[27]ZAHEDIS,MIRVAGHEFIA,RAFATIM,etal.CadmiumaccumulationandbiochemicalparametersinjuvenilePersiansturgeon,Acipenserpersicus,uponsublethalcadmiumexposure[J].ComparativeClinicalPathology,2013,22(5):805-813.
[28]GREGORYTR,WOODCM.Theeffectsofchronicplasmacortisolelevationonthefeedingbehaviour,growth,competitiveability,andswimmingperformanceofjuvenilerainbowtrout[J].PhysiologicalandBiochemicalZoology,1999,72(3):286-295.
[29]DEMERSNE,BAYNECJ.Theimmediateeffectsofstressonhormonesandplasmalysozymeinrainbowtrout[J].Developmental&ComparativeImmunology,1997,21(4):363-373.
[30]BAYUNOVAL,BARANNIKOVAI,SEMENKOVAT.Sturgeonstressreactionsinaquaculture[J].JournalofAppliedIchthyology,2002,18(4/5/6):397-404.
[31]曹阳,李二超,陈立侨,等.养殖密度对俄罗斯鲟幼鱼的生长、生理和免疫指标的影响[J].水生生物学报,2014,38(5):968-974.
CAOY,LIEC,CHENLQ,etal.Effectsofstockingdensityongrowth,physiologicalandimmuneresponsesinjuvenileRussiansturgeon[J].ActaHydrobiologicaSinica,2014,38(5):968-974.(inChinese)
[32]程佳佳,李吉方,温海深,等.养殖密度对杂交鲟幼鱼生长、肌肉组分和血液生理生化指标的影响[J].中国水产科学,2015,22(3):433-441.
CHENGJJ,LIJF,WENHS,etal.Effectofstockingdensityongrowth,musclecompositionandbloodparametersofhybridsturgeonjuveniles[J].JournalofFisherySciencesofChina,2015，22(3)：433-441.(inChinese)
[33]林琳,孙学亮,邢克智,等.养殖密度对豹纹鳃棘鲈生长和血液生化指标的影响[J].水产科学,2017,36(1):83-87.
LINL,SUNXL,XINGKZ,etal.EffectsofstockingdensityongrowthandbloodbiochemicalparametersinPlectropomusleopardus[J].FisheriesScience,2017,36(1):83-87.(inChinese)
[34]ROTLLANTJ,PAVLIDISM,KENTOURIM,etal.Non-specificimmuneresponsesintheredporgyPagruspagrusaftercrowdingstress[J].Aquaculture,1997,156(3/4):297-290.
[35]MONTEROD,MARREROM,IZQUIERDOMS,etal.EffectofvitaminEandCdietarysupplementationonsomeimmuneparametersofgiltheadseabream(Sparusaurata)juvenilessubjectedtocrowdingstress[J].Aquaculture,1999,171(3/4):269-278.
[36]李胜杰,白俊杰,叶星,等.加州鲈生长激素和胰岛素样生长因子IcDNA的克隆及序列分析[J].广东海洋大学学报,2007,27(3):1-5.
LISJ,BAIJJ,YEX,etal.CloningandsequenceanalysisofcDNAencodinggrowthhormoneandinsulinlikegrowthfactorIinlargemouthbass(Micropterussalmoides)[J].JournalofGuangdongOceanUniversity,2007,27(3):1-5.(inChinese)
[37]PéREZ-SNCHEZJ.Theinvolvementofgrowthhormoneingrowthregulation,energyhomeostasisandimmunefunctioninthegiltheadseabream(Sparusaurata):ashortreview[J].FishPhysiologyandBiochemistry,2000,22(2):135-144.
[38]REINECKEM,BJRNSSONBT,DICKHOFFWW,etal.Growthhormoneandinsulin-likegrowthfactorsinfish:whereweareandwheretogo[J].GeneralandComparativeEndocrinology,2005,142(1/2):20-24.
[39]VALENZUELACA,ZULOAGAR,MERCADOL,etal.Chronicstressinhibitsgrowthandinducesproteolyticmechanismsthroughtwodifferentnonoverlappingpathwaysintheskeletalmuscleofateleostfish[J].AmericanJournalofPhysiology-Regulatory,IntegrativeandComparativePhysiology,2018,314(1):R102-R113.
[40]LONGL,ZHANGHG,NIQ,etal.Effectsofstockingdensityongrowth,stress,andimmuneresponsesofjuvenileChinesesturgeon(Acipensersinensis)inarecirculatingaquaculturesystem[J].ComparativeBiochemistryandPhysiologyPartC:Toxicology&Pharmacology,2019,219:25-34.
NIJinjin1,WANGYuyu2,XUGangchun1,2,NIEZhijuan2,SUNYi2,LIQuanjie2,XUPao1,2*
(1.NationalDemonstrationCenterforExperimentalFisheriesScienceEducation,ShanghaiOceanUniversity,Shanghai201306,China;2.KeyLaboratoryofFreshwaterFisheriesandGermplasmResourcesUtilization,MinistryofAgricultureandRuralAffairs，FreshwaterFisheriesResearchCenter,ChineseAcademyofFisherySciences,Wuxi214081,China)
Keywords：Micropterussalmoides;in-pondracewayrecirculatingculture;stockingdensity;growth;physiologicalindex;geneexpression
收稿日期：2019-11-17
基金项目：现代农业产业技术特色淡水鱼体系(CARS-46)；中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(2018JBFR01)
作者简介：倪金金(1994—)，女，硕士研究生。E-mail:nijj84652167@163.com
通信作者：徐跑(1963—)，男，研究员。E-mail:xup@ffrc.cn