所有动物研究均按照伦理准则进行，并经江南大学动物福利委员会批准。动物实验按照美国国立卫生研究院实验室动物护理和使用指南进行。68周龄雄性C57BL/6J小鼠购自南京大学模型动物研究中心。本研究中使用的所有小鼠都被置于控制温度和湿度的环境中，光照/黑暗周期为12h，可以自由获得饮用水和食物。
链脲佐菌素，Sigma公司；兔源Anti-FXR抗体和兔源Anti-TGR5抗体，武汉爱博泰克(ABclonal)生物科技有限公司；鼠源Anti-GAPDH抗体，Abcam公司；粪便基因组DNA提取试剂盒、蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂，康为世纪生物科技股份有限公司；特异性引物，生工生物工程(上海)股份有限公司；甘油三酯、总胆固醇、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、游离脂肪酸、糖原和总胆汁酸试剂盒，南京建成生物工程研究所；BCA蛋白浓度测定试剂盒和特超敏ECL化学发光试剂盒，上海碧云天生物技术有限公司。
全功能微孔板检测仪，BioTek公司；电泳仪和全能型凝胶成像分析系统，Bio-Rad公司；尼康正置显微镜，尼康公司；全自动荧光定量PCR系统，Roche公司；细胞超声破碎仪，Sonics公司。
小鼠回肠组织固定、脱水、石蜡包埋、切片。采用苏木素-伊红染色试剂盒和AB-PAS染色试剂盒进行染色，然后在光学显微镜下观察。
使用含有蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂混合的RIPA缓冲液提取总蛋白。采用BCA检测试剂盒检测蛋白浓度。提取的蛋白经聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)分析后转移到硝酸纤维素膜上。4℃一抗孵育过夜，TBST缓冲液洗3次(20min/次)，二抗孵育1h。使用增强的化学发光检测试剂对信号进行可视化。免疫反应条带用ImageJ软件处理，并以GAPDH作为归一化参考。
THE END