临床常见传染病及检测方法

2、中国丙型病毒性肝炎医院感染防控指南中国丙型病毒性肝炎医院感染防控指南中要求:进行外科手术及侵入性诊疗操作中要求:进行外科手术及侵入性诊疗操作(所有涉及外科操作所有涉及外科操作的内科、内镜以及妇科、产科、牙科等的常规医疗操作的内科、内镜以及妇科、产科、牙科等的常规医疗操作)患者患者在进行操作前筛查丙肝病毒抗体;血液透析患者首次血液透在进行操作前筛查丙肝病毒抗体;血液透析患者首次血液透析前析前应进行丙肝病毒抗体检测,丙肝病毒抗体阴性者在血透应进行丙肝病毒抗体检测,丙肝病毒抗体阴性者在血透中建议中建议定期定期(半年半年)进行丙型病毒性肝炎的筛查进行丙型病毒性肝炎的筛查这对于避免医源性

3、感染、预防医务人员的职业感染,这对于避免医源性感染、预防医务人员的职业感染,防止出防止出现医疗纠纷有积极意义。现医疗纠纷有积极意义。属嗜肝DNA病毒科完整的HBV颗粒(Dane颗粒)呈球形,有双层衣壳(抗原)和含病毒DNA的核心HBsAgHBcAgHBsAg用于构建病毒子,并以小球形或小管状的形式而分泌入血液中血液中,HBV颗粒:HBsAg约为1:1,000-10,000HBsAg逆转录肝脏细胞血液中血液中前基因组的RNAHBcAgp22crAgHBeAg完整的完整的HBVssRNA不完整dsDNA空心粒子空心粒子HBeAg核HBs

4、Ag临床潜伏期45-180天,平均60-90天类型:急性,重症肝炎,慢性及病毒携带者30-50%5岁或者5岁以上感染者产生黄疸,5岁以下的黄疸发生率少于10%临床表现为厌食,疲劳,恶心,呕吐,腹痛,关节肌痛,低热,皮疹和黄疸大多数成人感染后半年内会恢复且产生免疫力.感染HBV后,30-90%的5岁以下儿童和2-10%5岁以上会演变成慢性感染15-25%慢性感染者因为慢性肝病过早死亡在患者出现症状之前,在患者出现症状之前,HBs抗原即出现于血液中。急性感染抗原即出现于血液中。急性感染6个月内缓解。个月内缓解。急性感染恢复期急性感染恢复期HBsA

5、g值很低,但还是有传染性,如灵敏度不够未能检值很低,但还是有传染性,如灵敏度不够未能检测出来,献血、输血、手术、口腔治疗、怀孕分娩等存在风险测出来,献血、输血、手术、口腔治疗、怀孕分娩等存在风险抗-HBcHBs抗原HBe抗原抗-HBe抗-HBsYears在受到感染的在受到感染的1岁的婴儿或围产期的婴儿中,大约岁的婴儿或围产期的婴儿中,大约90%的发展为慢性感染。他们成为的发展为慢性感染。他们成为无症状的无症状的HBV携带者,在十多岁至二十多岁的年龄期间,会发生短暂的肝炎。他们可携带者,在十多岁至二十多岁的年龄期间,会发生短暂的肝炎。他们可能发展为慢性肝炎或肝硬化或肝癌。有些

6、病例可能发生能发展为慢性肝炎或肝硬化或肝癌。有些病例可能发生HBsAg的清除。的清除。HBeAgs血清转换HBV携带者维持高水平的抗-HBc和HBsAgHBsAg血清转换急性感染急性感染慢性携带者慢性携带者缓解缓解3050年年慢性肝炎慢性肝炎稳定稳定疾病进展疾病进展肝硬化肝硬化代偿性肝硬化代偿性肝硬化肝癌肝癌死亡死亡非代偿性肝硬化非代偿性肝硬化12Inc.筛查筛查诊断诊断治疗方法的治疗方法的选择选择监测治疗的监测治疗的反应反应治疗目标治疗目标HBsAgALTHBeAg抗-HBeHBVDNAHBV基因型CBC肝硬化AL

7、THBeAg抗-HBeHBVDNAHBsAg伴有肝炎症状的个体妊娠妇女手术之前供血生化HBeAg抗-HBe抗-HBcHBVDNAHBsAg定定量量检测检测HBsAg定定量量检测检测ALTHBeAg抗-HBeHBVDNAHBsAg定定量量检测检测HBsAg定定量量检测检测HBsAg是急性感染是急性感染第一个可检测第一个可检测的标记物,也是的标记物,也是早期诊断早期诊断的重要指标之一;的重要指标之一;乙肝病毒感染时产生的表面抗原是完整病毒颗粒的乙肝病毒感染时产生的表面抗原是完整病毒颗粒的100010000倍,

8、这种自然扩增放大效应使倍,这种自然扩增放大效应使表面抗原表面抗原检测灵敏度比核酸扩增技术(检测灵敏度比核酸扩增技术(NAT)好;好;台湾:台湾:NAT检测检测HBV献血者时,献血者时,HBVDNA滴度非常低的慢性或隐性病人,其滴度非常低的慢性或隐性病人,其HBVDNA有可能波动到有可能波动到NAT检检测低限以下。测低限以下。NAT混合样品测试混合样品测试漏检了漏检了15.8%HBsAg阳性携带者阳性携带者;WolframGerlich,2010EASLAbbottSymposiumPresentation丙型肝炎(丙肝)是由丙肝病毒(丙型肝炎(丙肝)是由丙肝病毒(

9、HCV)引起的,以肝脏损害为)引起的,以肝脏损害为主的一组全身性传染病。其急性感染期症状不明显,易慢性化,主的一组全身性传染病。其急性感染期症状不明显,易慢性化,比例可达比例可达50.0%-85.0%;10.0%-20.0%的的HCV感染者在感染感染者在感染20年年后发展为肝硬化,后发展为肝硬化,1.0%-3.0%的人在感染的人在感染30年后发展为肝癌。年后发展为肝癌。在我国健康人群抗在我国健康人群抗HCV阳性率约为阳性率约为3.2%以长江为界,北以长江为界,北3.6%,南,南2.9%全世界慢性全世界慢性HCV患者中,有患者中,有24%左右生活在左右生活在中国中国(

10、DatamonitorDec2005)中国的流行率是美国的十倍中国的流行率是美国的十倍(DecisionResourcesDec6th2006)少数地区(宁夏、少数地区(宁夏、河南)流行率在河南)流行率在9.6%以上以上2000年年(/eid11(1):Jan2005)社会调查显示社会调查显示在在80年代到年代到90年代:年代:27.7%是由是由于于血液捐献引起血液捐献引起;只有只有2.6%非血液传播非血液传播.(CIPRA,2005)332nt54nt150010001500aminoacids2000250

11、03010CE1E2/NS1NS2NS3NS4NS5结构区域结构区域非结构区域非结构区域60nm60nmGlycoprotein糖蛋白糖蛋白Envelope包膜包膜ViralRNACore核衣壳核衣壳6种主要基因型种主要基因型(Genotypes1to6):每个基因型又有若干不同亚型每个基因型又有若干不同亚型不同基因型对治疗效果的反应不一不同基因型对治疗效果的反应不一分析试剂必须具有对不同基因型的检测能力分析试剂必须具有对不同基因型的检测能力我国现状:我国现状:1b,2a多见,多见,1b为主;为主;1a,2b,3b可见;可见;6型主要见于

12、港澳地区及南方边境省份型主要见于港澳地区及南方边境省份2004HCVaudiowebconference,Dr.ERSchiff,MiamiUniversity,FloridaSymptoms+/-TimeafterExposureTiteranti-HCVALTNormalYearsMonthsHCV-RNAHCVCoreAgSymptoms+/-TimeafterExposureTiteranti-HCVALTNormalYearsMonthsHCV-RNAHCVCoreAgPersistentCase:70

13、%CuredCase:30%急性急性HCV感染被完全治愈感染被完全治愈急性急性HCV感染转为慢性感染感染转为慢性感染急性急性HCV感染的两种临床结果(血清学模式):感染的两种临床结果(血清学模式):100806040200Anti-HCVTimeHCVRNAWindow=approximately1113daysHCVAgWindow=1214daysAnti-HCVWindow=70days(3rdGen)=82days(2ndGen)HCV-RNAHCV-Ag82天天140-150天天(70天)天)HCV

14、感感染染3rdgen慢性感染,伴有轻微或间歇性病毒血症假抗HCV反应性结果“被动”获得的抗体Anti-HCVIgG检测检测快速检测技术快速检测技术-金标法金标法酶联免疫吸附实验酶联免疫吸附实验-大批量大批量处理处理化学发光技术化学发光技术-封闭式全自动化封闭式全自动化补充确补充确认实验认实验-重组免疫印迹实验重组免疫印迹实验(RIBA)Anti-HCV检测检测HCVRNA的检测的检测HCV分型分型艾滋病艾滋病HIV(HumanImmunodeficiencyVirus人类免疫缺陷病毒人类免疫缺陷病毒)AIDS(AcquiredI

15、mmuneDeficiencySyndrome获得性免疫缺陷综获得性免疫缺陷综合症合症):由人类免疫缺陷病毒(HIV)感染免疫细胞并破坏引起后天性免疫缺乏的症状,俗称“艾滋病”Retroviridae逆逆转录转录病毒病毒科科Lentivirus慢病毒慢病毒属属HIV-1/2种种HumanImmunodeficiencyVirusHIVp24抗原单体在体内容易诱导产生抗体反应的部位HIV-1:gp41(gp120)/(HIV-2:gp36)p24(gag):核蛋白感染初期以及血中病毒增加的时候作为HIV抗原可被查出RNAp66/p51(RT):

16、逆转录酶gp31(整合酶)0.1m0.1mProviralDNA前病毒前病毒DNAHIVRNA逆转录逆转录ViralDNA进入宿主基因组进入宿主基因组逆转录酶逆转录酶整合酶整合酶病毒蛋白病毒蛋白蛋白酶裂解蛋白酶裂解融合的方式融合的方式进进入细胞入细胞病毒颗粒病毒颗粒衣壳装配,衣壳装配,&出芽方式到出芽方式到胞外胞外转录和加工转录和加工病毒病毒mRNA&基因组基因组RNA翻译翻译Viralprecursorprotein病毒前蛋白病毒前蛋白HIV存在存在HIV-1和和HIV-2两种类两种类型型HIV-1在全世界范围内流

17、行,在全世界范围内流行,占全部感染者占全部感染者90%以上;以上;HIV-2主主要流行于西非各国,其他要流行于西非各国,其他地区感地区感染率很低染率很低HIV-1已知有几种亚型组,其已知有几种亚型组,其中中M组占世界分布范围内的组占世界分布范围内的大多大多数。数。M组分组分10种亚型种亚型,而且相而且相互之间还存在重组体。互之间还存在重组体。亚型的分亚型的分布地域性较为明显。布地域性较为明显。截至截至2013年年9月,联合月,联合国艾滋病规划署国艾滋病规划署(UNAIDS)公布中)公布中国国HIV感染人数感染人数850,0

18、00中国艾滋病每天死中国艾滋病每天死8000人,每天新患人,每天新患1.5万万HIV特异性抗体检测特异性抗体检测酶联免疫吸附实验酶联免疫吸附实验-大批量处理大批量处理化学发光技术化学发光技术-封闭式全自动封闭式全自动化化快速检测技术快速检测技术-试纸条试纸条确认实验确认实验-蛋白印迹试验蛋白印迹试验(WesternBlot)HIV特异性抗原检测特异性抗原检测Ag+Ab联合检测联合检测(同时定性检测(同时定性检测HIVp24抗原和抗原和HIV-1或或HIV-2抗体)抗体)05040302070608010090IgG

19、HIV1病毒裂解病毒裂解产产物物敏感性敏感性特异性特异性无无IgM无无HIV21983-85Sensitivity%2002P24+IgG+IgMHIV1&HIV2重组抗原重组抗原合成多肽合成多肽敏敏感性感性99.9%特异性特异性99.9%第第4代代IgG+IgMHIV1&HIV2重组抗原重组抗原合成多肽合成多肽1994P24抗原抗原敏感性敏感性特异性特异性无无IgM1987-90第第3代代第第2代代IgGHIV1+HIV2重组抗原重组抗原第第1代代敏感性敏感性特异性特异性HIV-1O组组0

20、1070809010036520301代抗体检测代抗体检测3代抗体检测代抗体检测P24抗原检测抗原检测4代代Ag+Ab检测检测172231窗口期窗口期:3-5天天灵敏的灵敏的联检联检3代代HIV抗体抗体EIAHIVp24Ag405060抗抗HIV抗体抗体p24AgEIA1代代HIV抗体抗体EIAAdaptedfrom:FiebigetalAIDS,17:1871-1879(2003)感染早期,在感染早期,在HIV抗体产生之前就可以检出抗体产生之前就可以检出HIVp24抗原。抗原。HIV抗原抗体抗原抗体(Ag+Ab)联检检出联检检

22、种“全身性慢性感全身性慢性感染症染症”。1905年,德国的年,德国的细细菌学者夏菌学者夏乌乌登和赫夫曼登和赫夫曼发现发现了梅毒的病原体(了梅毒的病原体(苍苍白螺白螺旋体)。旋体)。TP菌不能在体外菌不能在体外(invitro)培养,而只能在老鼠的睾丸内培养。培养,而只能在老鼠的睾丸内培养。梅毒螺旋体梅毒螺旋体((长长6-20m直径直径0.1-0.2m))Spirochaetaceae螺旋体螺旋体科科Treponema螺旋体螺旋体属属T.Pallidum种种Nichols株株诊诊察察临临床症状床症状初期硬结、硬性下疳、扁平湿疣等病原学病原学检查检查原理:原理:一期、二期梅毒时,取硬下疳、扁平湿疣、黏膜斑等皮损部位组织液或淋巴结穿刺术得到的组织液,在暗视野显微镜下,光线从聚光器的边缘斜射到涂片上的梅毒螺旋体而发出亮光,从而根据其特殊形态和运动方式进行检测。方法:方法:(1)暗)暗视显视显微微镜检查镜检查(2)镀镀银银染色法染色法(3)核酸)核酸

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