本发明涉及微生物检测，尤其涉及一种猫杯状病毒灭活抗原的毒价检测方法及应用。
背景技术：
1、猫杯状病毒(felinecalicivirus,fcv)是一种导致猫传染性鼻结膜炎的病毒，会导致猫的轻度至重度呼吸道感染和口腔疾病。fcv具有高度传染性，发生率较高。由fcv引起的幼猫死亡率高达30％。目前认为，fcv呈世界性分布，并可能感染所有猫科动物，我国猫群中亦存在fcv抗体。针对fcv病毒，免疫疫苗是最好的选择。
2、灭活是在需要进行微生物灭活的生物制品生产中最关键的技术之一，不仅可防止病原体的扩散，还可提高生物制品的安全性。灭活疫苗是通过一定方法使病原微生物失去活性，进而使其丧失致病能力的同时保存免疫原性，接种后即可产生相应的抗体，避免感染相应病原体引起疾病。在制备灭活苗时，常用的灭活剂有甲醛、β-丙内酯(β-propionolactone,bpl)、烷化剂和双氧水等。在众多灭活剂中，甲醛因其成本低廉，灭活效果好，成为最广泛的灭活剂。
技术实现思路
2、本发明提供了猫杯状病毒灭活抗原的毒价检测方法，包括如下步骤：使用灭活剂处理猫杯状病毒液，得到灭活抗原液；使用透析袋去除所述灭活抗原液中的灭活剂，得到纯化灭活抗原；测定所述纯化灭活抗原的毒价。
5、在本发明提供的更具体的优选实施方案中，以甲醛为灭活剂处理猫杯状病毒液，处理28h后即可使抗原毒价(logtcid50/ml)降至0。
6、进一步的，以甲醛为灭活剂处理猫杯状病毒液后，优选使用规格为100kd的透析袋4℃透析10h，可极大程度的降低甲醛残留，进而消除甲醛在病毒灭活检测中对宿主细胞活性的影响。
7、在本发明中，所述纯化灭活抗原的毒价测定方法包括：将所述纯化灭活抗原接入宿主细胞，培养，观察所述宿主细胞是否出现病变。
8、优选的，在所述培养的过程中，所述宿主细胞无需继代培养，即可直接测定所述宿主细胞猫杯状病毒灭活抗原的毒价。由于前述透析袋处理后的灭活抗原中，灭活剂残留量极少，不会影响宿主细胞生长。因此，将透析后灭活抗原接入宿主细胞后，无需继代培养，可直接观察所述宿主细胞的形态特征，并据此判断宿主细胞是否因抗原灭活程度不够而出现病变。
14、s3、测定所述纯化灭活抗原的毒价；所述毒价记为y；
18、有益效果：
2.根据权利要求1所述猫杯状病毒灭活抗原的毒价检测方法，其特征在于，所述灭活剂包括甲醛、β-丙内酯、烷化剂和双氧水中的一种或者多种。
4.根据权利要求1所述猫杯状病毒灭活抗原的毒价检测方法，其特征在于，所述透析袋的透析温度为2-6℃。