狂犬病毒抗体检测试剂盒(酶联免疫法)
编辑:深圳恒昊生物
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[原理]
本试剂盒采用亲和素-生物素化Ra纯化抗原预包被板ELISA原理,检测人血清/血浆中存在的狂犬病毒IgM抗体,并配以酶标记抗人IgM单克隆抗体作为标记物。加入底物TMB显色后终止反应,在450nm波长测各孔O.D值,O.D值的大小与待检抗体含量成正比。生物素系统(biotin-avidinsystem)的稳固级联放大作用,使试剂的特异性、灵敏度、稳定性极大地提高是本试剂含有的独特优点。
[用途]
本试剂盒用于定性检测人血清/血浆中的狂犬病毒(RABIESVIRUS)IgM抗体,对因动物咬伤而致感染了狂犬病毒的诊断、流行病学调研和疫苗监测有重要意义。
适应范围:
动物咬伤致狂犬病毒感染的诊断和监测。
[操作步骤]
1.将试剂盒平衡至室温后取出反应板拆封。
1.加样:将待检标本用标本稀释液作1:101(2ul—200ul)稀释,分别加待检标本及阴阳性对照100ul各一孔于反应板中,设空白对照一孔轻拍混匀。
2.37℃温育30分钟。甩去孔内液体,用洗涤液洗板3次并在吸水纸上拍干。
3.加酶结合物:每孔2滴,混匀后置37℃温育30分钟。同上法洗涤3次并拍干。
4.显色:每孔加显色剂A、B各一滴,轻拍混匀(或震荡器混匀)后置37℃10分钟。
[结果判断]
1.目测:在白色背景下观察各孔显色情况,兰色者为阳性,无色者为阴性。
2.酶标仪测定:每孔加终止液一滴,混匀后在450nm下测定各孔O.D值。
①P/N=标本O.D值/阴性对照O.D值。
②P/N≥2.1为阳性;
③1.5≤P/N<2.1为可疑标本;P/N<1.5为阴性。
④阴性对照(NC)小于0.10时以0.10计,大于0.1小于0.21时以实际O.D值计算;若大于0.21时,实验可能出现了较大误差,需重复实验。
⑤阳性对照(PC)值通常≥0.4,实验成立,否则需重做。
[注意事项]
1.微孔板须密封防潮,从冷藏环境中取出时,应置室温平衡至潮气尽干后方可开启使用,余者封存置2-8℃。
2.滴加试剂前应将液体翻转数次混匀,滴加时保持瓶身垂直。
3.洗涤时每孔均须加满,防止孔内有游离酶不能洗净。
4.试剂置2-8℃存放,不能冻结,有效期10个月。
5.避免用溶血、混浊或脂血标本。
6.最好用新鲜标本,如需保存,可于2-8℃冷藏48小时或-20℃冻存4周(样本应避光)。