还在使用紫外吸收法进行蛋白质定量分析？告别低灵敏度、对样品纯度要求高（如体系中残留的核酸干扰吸光度）的蛋白质定量！
现在，仅需一台Duetta荧光及吸收光谱仪，操作简单、超低检测限、杜绝残留核酸的干扰，快速实现蛋白质/抗体的定量分析。
摘要
本文介绍了Duetta在检测极低浓度转铁蛋白时所展现出的高灵敏度特性。Duetta荧光及吸收光谱仪能够同步进行荧光光谱和吸收光谱的测量，灵敏度较紫外吸收法提高33倍。
*转铁蛋白是一种在肝脏中合成的糖蛋白，分子量为80kDa。测量血清中的转铁蛋白铁水平是铁代谢研究的重要组成部分。
图1转铁蛋白三维结构
实验方法
使用10mMPBS，配制浓度范围为0.75μg/mL至50μg/mL的转铁蛋白溶液，用于荧光和吸收光谱测量。使用相同的缓冲液（不含蛋白）作为空白对照。
结果
01.吸收光谱模式
可见，在相同的紫外吸收模式下，Duetta独特的光路设计使它的灵敏度比台式分光光度计提高了一倍。
图2两种仪器的吸收光谱对比
02.荧光光谱模式
使用Duetta荧光光谱模式检测转铁蛋白溶液的荧光光谱，如图3所示。对最低浓度的放大结果显示，检测限约为0.75μg/mL。
图3转铁蛋白在0.75μg/mL-50μg/mL的荧光发射光谱
这证实了Duetta在检测蛋白质时具有远高于传统紫外吸收法的灵敏度，因此非常适合用于低浓度蛋白质的定量分析。
图4使用Duetta和分光光度计检测转铁蛋白浓度的比较
结论
在蛋白质表征中，某些氨基酸（色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸）的内源荧光使科学家可以在无标记的前提下，实现对蛋白质的表征。
Duetta荧光及吸收光谱仪可以同步进行荧光光谱和吸收光谱测量，其蛋白浓度检测的灵敏度高于台式分光光度计。Duetta的双重用途和绝佳的光路布局是研究蛋白质光谱和低浓度溶液的理想选择。
仪器推荐
本文使用HORIBADuetta荧光及吸收光谱仪进行荧光光谱和吸收光谱的测量。Duetta可以同步检测荧光光谱与吸收光谱，是蛋白质定性、定量、聚集分析利器。
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