永远的“女超人”艾丽丝（从左至右依次为第1部到第5部）
艾丽丝（Alice）：永恒不变的铁血女主角
饰演者：米拉·乔沃维奇MillaJovovich（乌克兰）
身份：《生化危机》系列中的绝对女主角，末日世界的女救世主、人类的终极武器
出现于：《生化危机》系列电影中
在《生化危机》系列中，艾丽丝以原创人物身份空降电影中成为绝对女主角，从头到尾都是冷着一张脸，手持各种枪械杀僵尸、打怪兽、捡妹子。在前三部的电影中，艾丽丝是卷入“浣熊市事件”的特别行动组成员，一路杀出个黎明之后，才赫然发现自己因为是感染了T病毒后唯一没有丧尸化的人，而成为了伞公司的新实验对象！而从第四部开始，因为T病毒的效益而拥有像超人一般能量的艾丽丝，开始更加彪悍的英勇杀敌，而伞公司也因为无法控制住病毒的能量而破产，各种生物产生了大规模的变异，形成了真正的世界末日，所以，“女超人”艾丽丝在第五部的结尾处，正式被赋予了“人类终极武器”的使命。而第六部电影版的启动消息也已经传来，这个愈发扯淡的故事也将迎来第二个“三部曲”的尾声
虽然人物个性稍显苍白，但是名模出身的米拉·乔沃维奇那一款款集时尚元素与拉风酷帅于一身的造型，却成功让艾丽丝这个角色成为宅男心中的偶像。而作为米拉现实生活中的老公，《生化危机》系列电影的导演保罗·安德森，几乎将电影变成了献给老婆的情书，整个系列的宗旨就是将米拉作为镜头永恒的中心任务，怎么耍帅怎么来，说《生化危机》系列就是名模兼歌手出身的米拉·乔沃维奇的个人MV，都不嫌为过。大概也因为这个原因，艾丽丝几乎就没有在电影里遇到过像样的感情线，即使和男角色有点暧昧，最后这些男人也都不得好死，看来，直到这个系列终结，Alice都只好和自己的女儿以及一群形形色色的妹子们作伴了。
李冰冰饰演的艾达王对游戏还原度很高
艾达·王（AdaWong）：来无影去无踪的华裔特工
饰演者：李冰冰（中国）
身份：伞公司的背叛者威斯克组织中的特工，华裔美国人
出现于：电影版第五部（初登场）
在《生化危机》系列当中，除了贯穿始终的女主角艾丽丝是电影中的原创人物之外，绝大部分登场的主要角色均是历代游戏中拥有高人气的角色。而艾达-王正是游戏中最受玩家追捧的女角之一，具有冷艳睿智、亦正亦邪的气质。而华裔身份的设定，更为艾达-王一角增添了别样的异域魅力。
盖尔利饰演的吉尔大受游戏玩家欢迎
吉尔·瓦伦蒂安（JillValentine）：亦正亦邪的英伦御姐
扮演者：西耶娜·盖尔利SiennaGuillory（英国）
身份：原是浣熊市的特别警队S.T.A.R.S成员，曾与艾丽丝是并肩战斗的亲密伙伴；但后被伞公司捕获控制住，与艾丽丝重逢时已经变成了伞公司的爪牙。
出现于：第二部（初登场），第四部（结尾彩蛋处），第五部（以主要反派身份）
电影中初次登场的吉尔穿着热裤，手持双枪，身手和身材一样漂亮，更兼具了不输给艾丽丝的强悍霸气，杀僵尸打怪物绝不手软。英国演员们的独特气质也让西耶娜饰演的吉尔举手投足间还带着些许的知性魅力。然而秉性正直的吉尔却在第二部尾声处下落不明，而第五部时重新现身的她，头脑已经被伞公司控制住，变身成了追杀艾丽丝的反派BOSS，更在近身格斗时把艾丽丝揍到不成人形！若不是最后万能的女主角开外挂偷跑把吉尔脖子上的“红蜘蛛”拔掉，让她恢复了神智，那么电影版的生化危机就该以伞公司方面的绝对胜利而结束了……
与第二部初登场时相比，第五部中的吉尔头发变得更长、衣服穿得更多、但胸前的开衩却变得更深、整个人闪烁着一种严肃邪恶的魅力，却比当年更加秀色可餐。
在第一部丧生的瑞恩在第五部奇迹“复生”
瑞恩（Rain）：彪悍的肌肉派拉丁猛女
饰演者：米歇尔·罗德里格兹（拉丁裔美国）
身份：曾是前往“蜂巢”实验室救援的特别行动小组成员，后来在行动中感染T病毒变成僵尸，被艾丽丝等杀死。后来重生，成为伞公司的爪牙
出现于：第一部（初登场）、第五部（以重要反派打手的身份登场）
和艾丽丝一样，瑞恩也是电影中的原创人物。在第一部中，位于浣熊市地下的伞公司生化实验室“蜂巢”中发生了病毒泄露事件，所有感染病毒的实验室成员都变成了僵尸，她与艾丽丝均为前往“蜂巢”调查的行动组成员，更是与艾丽丝惺惺相惜的亲密战友，不管是外形还是个性，都是豪爽的肌肉派拉丁猛女一枚，由此也给观众们留下了极其深刻的印象。只是第一部里，瑞恩被以“感染病毒后被艾丽丝大义灭亲”的方式处理掉，这个退场方式当时甚至还赚的了不少人眼泪，成了第一部中的名场面之一。
拉特和米勒饰演的克莱尔兄妹掀起了一阵热潮
克莱尔·雷德菲尔德（ClaireRedfield）：温柔坚毅的美国大妞
饰演者：艾丽-拉特AliLarter（美国）
身份：被核武器毁灭的浣熊市幸存市民，艾丽丝坚定的追随者
出现于：第三部（初登场），第四部（继续追随着艾丽丝）
相比于艾丽丝身边其他妹子的亦正亦邪，也贵为系列游戏中的女主角之一的克莱尔在电影里倒是女主角较为坚定的追随者。她本是浣熊市的普通市民，但因为第二部中从“蜂巢”实验室泄露出来的病毒让全市受到感染变异，所以伞公司不得不在最后用核武器毁灭城市来“灭口”。而克莱尔就成为了逃出来的幸存者之一。
第三部登场时，克莱尔就迅速的被艾丽丝迅速折服，而第四部时虽然一度受到伞公司的控制，但很快恢复了记忆，继续陪伴着艾丽丝闯荡江湖打僵尸。尽管美貌指数在“妹子们”当中处于中下游，但是论对女主角的忠诚度，她可是堪称第一呢！顺便说一句，游戏中她还有个哥哥克里斯，而克里斯也在第四部中亮相与她们一起冒险，而饰演他的，竟是美剧《越狱》中的万人迷温特沃斯·米勒！
洛克饰演的马特虽然戏份不多，但让猛女当道的电影有了一点别样的清新气息
K·马特（K-Mart）：纯真无辜的小萝莉
饰演者：史宾赛·洛克SpencerLocke（美国）
身份：被艾丽丝救下的小女孩
出现于：第三部（初登场），第四部（又被艾丽丝救了一回）