WBC:6.59*10/L,N%:69.7%，LDH:248U/L,Urea:24.61mmol/L,Cr:1269umol/L,P:1.82mmol/L。腹透液白细胞216/ul,多个核60%。
患者腹透液被注入血培养需氧瓶、厌氧瓶后，放入梅里埃VirtuO全自动血培养仪中培养，需氧瓶在36.7小时后报阳。将报阳培养液在血平板、伊红平板上进行转种，并制备涂片。涂片直接进行革兰染色，镜下可见细菌呈多形性，球形、球杆状、杆状（如图1）。转种的血平板、伊红平板放37℃，5%CO2培养，24小时后平板上生长灰白色细小菌落，无溶血环。48小时后，菌落呈白色中等菌落。72小时后，菌落呈白色大圆菌落，且中央呈皱缩状，凸起，高度卷曲（如图2—图4）。伊红平板无菌落生长。
图1：需氧瓶报阳后直接涂片，革兰氏染色，镜下细菌形态呈多形性。
图2：24h，5%CO2，细小菌落
图3：48h，5%CO2，中等菌落
图4：72h，5%CO2，大圆菌落
将生长3天的菌落边缘和中央进行涂片，边缘菌落整齐，表面光滑，革兰染色多呈球状、球杆状（如图5）。中央菌落凸起、高度卷曲，革兰染色多呈杆状、长杆状（如图6）。
图5：边缘菌落多成球状、球杆状
图6：中央菌落多呈杆状、长杆状
纯菌落用MALDI-TOfMS进行质谱鉴定。质谱鉴定为空气罗氏菌（Rothiaaeria），评分为2.122分。同时，提取DNA后送16SrRNA进行测序，结果为Rothiaaeria,一致率为98%。肾内科门诊送腹透液测序回报结果为Rothiaaeria，与培养结果一致。根据WS/T639-2018，空气罗氏菌药敏参照棒状杆菌属。
治疗经过
3.该病人在5月14日、7月2日做维持性腹膜透析时，送腹透液常规和微生物培养，见表1：
三次腹透液培养，需氧瓶均检测出空气罗氏菌，空气罗氏菌为需氧兼性厌氧菌，生长缓慢。腹透液培养出空气罗氏菌后，临床给予抗生素抗感染治疗，患者临床症状缓解，腹透液清亮，复查腹透液常规无异常。因腹透液反复检测出空气罗氏菌，且用抗生素抗感染治疗有效，考虑为腹透管处细菌定植可能性大。
4.空气罗氏菌因形态与诺卡菌相似，容易被误认为是诺卡菌属。可对菌落进行弱抗酸染色，空气罗氏菌弱抗酸阴性（-），诺卡菌属弱抗酸（+）。因此,对两者可以采用MALDI-TOFMS和16SrRNA测序进行鉴别。空气罗氏菌很少能引起呼吸道感染，但在与诺卡菌属的鉴别诊断中应予以考虑，特别是易受诺卡菌感染的免疫功能低下的患者中。
5.与此同时，在7月27日痰培养标本中我们分离到一株黏滑罗氏菌。镜下革兰氏染色黏滑罗氏菌为革兰阳性球菌,多呈四联状排列，也可成双排列（图7），因此黏滑罗氏菌曾为黏滑口腔球菌，微球菌属，微球菌科。现被划归为罗氏菌属，放线菌科。在血琼脂平板上，黏滑罗氏菌呈灰白色中等圆形，干燥菌落。菌落黏性强,多牢固黏附于血琼脂平板上,不易刮取（图8）。菌落及形态与许多近缘菌如微球菌属及奈瑟菌属十分相似,若不加以染色,往往凭经验当作奈瑟菌处理。该菌触酶试验阴性，用MALDI-TOfMS进行质谱鉴定为R.mucilaginosa。黏滑罗氏菌是人类呼吸道的常居菌种，为条件致病菌，可引起免疫力低下患者伤口严重感染和心内膜炎。但需要注意的是因本菌为上呼吸道寄居菌,呼吸道标本检出本菌应结合临床症状及检出菌量综合考虑其致病性。
图7：显微镜下菌落形态
图8：血平板菌落形态
6.随后几天我们在痰标本里面又发现了几例黏滑罗氏菌，说明黏滑罗氏菌在痰培养中常可见。只是由于其菌落形态与奈瑟氏菌属及其相似，在未进行革兰氏染色的情况下，我们常常把它误认为是奈瑟氏菌属。如在免疫功能低下，菌落多且纯的情况下，它可能会致病，也可能会漏检。在日常工作中，我们如果遇到这种多且纯、干燥、粘平板的细菌还是应该多涂片镜检，确定细菌的种类，以防漏检。
参考文献(上下滑动）
[1]Rothiaaeriaendocarditisinapatientwithabicuspidaorticvalve:casereport.brazjinfectdis.2014;18(5):561–564
[2]RothiaaeriaasaCauseofSepsisinaNativeJoint.JOURNALOFCLINICALMICROBIOLOGY,July2010,p.2648–2650
[3]RothiaaeriaNeckAbscessinAPatientwithChronicGranulomatousDisease:CaseReportandBriefReviewoftheLiterature.JClinImmunol.2012December;32(6):1400–1403
[4]临床微生物学手册第12版第一卷原著者:KarenC.Carroll［美］、MichaelA.Pfaller［美］主译:王辉、马筱玲、钱渊、李若瑜、曹建平
作者简介
张媛媛
任职于重庆市急救医疗中心检验科微生物组，主管技师，现在在北京大学人民医院检验科微生物组进修。长期从事临床微生物检验工作，研究方向：临床微生物学检验和细菌耐药机制的研究。