说起生物医药科研界的让人撕心裂肺的实验，动物实验肯定是其中一大块。裸鼠成瘤，各种疾病造（zuo）模（nie），让我们饱尝与鼠小弟的相爱相杀。
既然有牺牲，除了有尊严，还得有价值。如何让鼠小弟们的牺牲换来的数据逼格更高？自然少不了时下最火爆的动物体内基因转染技术。
其实，多脏器注射方式，说难也确实难，说不难也确实不难。
难！这么多脏器，这么多方法，都是精细操作，稍有不慎，鼠弟归天数据报销。
为啥又说不难呢？因为你要踩的坑，汉恒都帮你踩了！
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限于篇幅，下文详细介绍了3种注射方式，想要查看全部注射视频，请至汉恒公众号-推荐-视频专区。
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汉恒多脏器AAV注射方式及注意点：
部分注射视频详解：
尾静脉注射
感染部位：心脏、肝脏、AAV-BBB感染全脑
1、把小鼠放入尾静脉注射的装置中（如果没有该装置，可以用50ml的离心管自己制备一个，注意通气、固定即可）。
2、用70%的酒精消毒小鼠尾部。注意保持下属尾部温暖，太冷的话血管会收缩。
3、用左手食指拇指拉住小鼠尾巴，稍用力拉直，然后食指稍微向前向上，使尾巴稍微弯折。可以在弯折处进针注射病毒（27-30G胰岛素针，100ul/小鼠）。
4、缓缓注射，完成后保持5-10秒防止病毒回流。
5、拔针，用手指或者干的无菌棉球或纱布按压几秒。
鞘内注射
感染部位：脊髓神经
1、麻醉-皮下注射麻醉剂Xylazin/Ketamine混合液（10mg/kg,100mg/kg）（Xylazin/Ketamine，Sigma-AldrichX1251,K2753）。
2、在小鼠的眼睛上涂上眼药膏（Oculentumsimplex，TevaPharmachemie），防止眼睛干掉。
3、靠近小鼠的尾部根部约2cm2皮肤去毛，以利于清晰看见下针部位。
4、把小鼠放到一个特殊的架子上，在小鼠下本身用一根15ml离心管垫起，从而使下针部位稍微拱起。
5、把病毒吸入25微升的hamilton，配30G针头。
6、定位脊椎的L6（最突出的一个），并用手指轻轻按压使之平缓。
7、小心将针头插入L5椎骨和L6椎骨的凹槽之间，并注意小鼠尾部会稍微上翘，这标志针头成功插入
髓鞘。
8、一旦成功插入，用手指固定针头，另一只手缓慢注射5-10微升病毒。注意注射体积要适当，太小会加大实验误差，体积太大会增加鞘内压力。
9、如有需要，24hr之后可重复注射一次。
10、实验完毕需要保持小鼠身体足够温暖（比如37度加热灯、温箱等），以利于苏醒。
脑立体定位注射
感染部位：脑部
2、剃除小鼠头部眼睛到耳朵之间的毛发，放到立体定位仪的保暖托盘上。
3、归零牙齿和耳朵的标尺。并在小鼠的眼睛上涂上眼药膏（Oculentumsimplex，TevaPharmachemie），防止眼睛干掉。
4、将小鼠上门牙固定到固定板的槽内，确保头部保持固定。调节Bregma和Lambma在同一矢状线上和水平面。务必确保小鼠鼻子居中、稳定。
5、用手术刀花开小鼠头部皮肤，用手术刀刮掉表面硬脑膜，如有血迹请用棉签擦干，确保bregma和lambda位置清晰可见（加示意图）。
6、把bregma坐标归位0（X，Y，Z=0），确保lambda位置与bregma位于同意水平面上。
7、根据目的脑区设定好坐标。一旦坐标固定，用marker笔在颅骨做出标记，并在10秒内在颅骨钻出一个约0.015mm的孔。钻的过程务必小心，以防损伤脑组织。
8、把带注射AAV吸入针内，根据上一步设好的坐标进针。进针完成后以0.05-0.1微升/min的速度缓缓注射病毒，通常一只小鼠注射体积在0.05-2微升之间。