CHL中国仓鼠肺细胞

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CHL中国仓鼠肺细胞

本公司所有产品仅供科学实验,不做其他科学实验外的使用!

商品详情:

细胞培养操作:

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4mL培养基混合均匀。在1000rpm条件下离心3min,弃去上清液,加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中,加入约4mL培养基,培养过夜)。第三天换液并检查细胞密度。

2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

b、加1mL消化液(0.25%Trypsin-0.02%EDTA)于培养瓶中,使消化液浸润所有细胞,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-3min(视细胞消化情况而定),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加2-3ml培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000rpm离心5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。

c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。

3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例;

a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000rpm条件下离心4min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。

b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。

c、将冻存管放入-80℃冰箱,24h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

细胞培养注意事项:

三、用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片,是正常现象。观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置2-4h。

四、贴壁细胞可以消化,悬浮细胞直接混匀收集细胞,900rpm-1000rpm离心3min,弃上清。加5mLPBS重悬细胞,再900rpm-1000rpm离心3min,,用新鲜的培养基重悬细胞,并接种到新的培养瓶或培养皿中,置于培养箱中进行培养。

五、请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

六、建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。

七、该细胞仅供科研使用。

八、备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的培养基来培养细胞。收到细胞后第一次传代建议1:2传代。

九、注意:1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿。

THE END
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