如下图在新药申报时，评价候选抗肿瘤化合物有效性的实验中，主要包括实验的设计、药物实施及药效评价等3个方面：
图1.药效学研究的路线图[1]
从伦理学的角度出发，一个新的细胞毒类抗肿瘤药物最初的临床受试者均应是晚期的、其他手段治疗无效的患者。与之对应，临床前试验也应该在动物肿瘤生长至一定程度时开始给药，并且若肿瘤体积太小，动物体内残留的NK细胞可能抑制肿瘤的生长，干扰对药效的观察，故不主张动物接种肿瘤细胞后即刻开始给药。通常待移植肿瘤至少生长至约100mm3后将动物随机分组。并于当天给药[1]。若是转移模型，一般是一旦发生转移立即给药。
二、给药频率及周期
应根据受试物的药代动力学特点、毒性反应等确定给药频率及周期，如果多次给药的话，一般要结合药物代谢特点，通过血药浓度来判定药物在体内的稳态时的给药间隔，且稳态浓度需要在治疗窗内，一般间隔1-2天给药一次。
三、人道终点的设定
考虑动物福利与伦理，必须设置适当的人道终点，主要包括：肿瘤负担应小于10%体重；在成年小鼠中，任何一个维度肿瘤不应该超过20mm（大鼠中为≤40mm）；肿瘤转移或快速增长造成溃烂、坏死或感染，干扰进食或妨碍行走；若发生以上任何一种情况时必须终止实验，实行安乐死。
四、观察指标
动物体重等安全性指标：在试验中还应该观测与药物安全性有关的指标，如每次测量肿瘤体积时应记录动物体重和死亡率，将治疗组的这些数据与标准治疗对照组进行比较，对于判断药物的安全性和开发前景具有重要的意义。
肿瘤转移情况：对于原位荷瘤模型，我们还需要实时观察肿瘤转移情况。
五、评价标准
以裸鼠皮下移植瘤模型为例，主要包括相对肿瘤增殖率、肿瘤生长曲线、瘤重、动物体重等评价指标。
1.绘制相对肿瘤增殖率T/C图表或曲线
根据测量结果计算出相对肿瘤体积（relativetumorvolume,RTV），RTV=Vt/V0。其中V0为分笼给药时(即d0)测量所得肿瘤体积，Vt为每一次测量时的肿瘤体积。抗肿瘤活性评价指标为相对肿瘤增殖率T/C（%）如下：
举例：如下图2为检测药物MONCOT对异种移植瘤生长的影响，当肿瘤生长体积约为110mm3时开始给药，MONCPT（受试药物）和Irinotican(阳性药物)每2天肌肉注射一次，共15天，并于第16天处死小鼠。如下为动态记录的相对肿瘤增殖率（T/C）：
图2.MONCPT对人膀胱癌5637移植瘤的治疗效果[4]
2.小鼠瘤重
为了有更加直观的数据结果，试验结束后，可以通过剥离瘤块，称量，并拍照来表现治疗效果；或将小鼠处死后摆放并拍整鼠（带瘤子）照片，并计算肿瘤生长抑制率：治疗组平均瘤重—模型对照组平均瘤重/模型对照组平均瘤重＞40%则代表药物有效。如下图3左为前列腺癌皮下荷瘤后剥离的瘤块：
图3.前列腺癌荷瘤小鼠的瘤重（左）及生长曲线（右）[5]
3.绘制肿瘤生长曲线
4.小鼠体重曲线
小鼠体重曲线可以体现药物的安全性。如下图4所示，实验组（i.p.2mg/kg）与对照组相比，小鼠体重无明显差异（主要指下降趋势），而实验组（o.p.5mg/kg）时，却导致小鼠体重明显下降，说明高浓度的口服给药会存在一定的毒副作用[5]。
图4.前列腺癌荷瘤小鼠体重[5]
5.受试物与阳性对照药物的效果比较
在毒性相当（主要表现为动物体重下降相当）的情况下，对受试物治疗组应与阳性对照组相比，是否更具有安全性及有效性，是评价是否有必要进入临床试验的指标之一。
6.绘制生存曲线
生命延长率是评价抗肿瘤药物的重要标准，但是小鼠皮下荷瘤几乎很难死亡，并且考虑到动物福利与伦理学，所以生命延长率并不是理想的观测指标。若需要绘制生存曲线，现在文献多是人为设置某个人道终点，如皮下肿瘤体积到1000mm3时，认为动物死亡，进而绘制生存曲线。对于原位荷瘤一般以发生转移绘制生存曲线。
图5.以肿瘤体积1000mm3为人道终点绘制生存曲线[6]
参考文献：
[1]药品审评中心,《细胞毒类抗肿瘤药物非临床研究技术指导原则》，《抗肿瘤药效学指导原则》.
[2]FestingMF,AltmanDG.GuidelinesfortheDesignandStatisticalAnalysisofExperimentsUsingLaboratoryAnimals[J].IlarJournal,2002,43(4):244-258.
[3]TomaykoMM,ReynoldsCP.Determinationofsubcutaneoustumorsizeinathymic(nude)mice[J].CancerChemotherapyandPharmacology,1989,24(3):148-154.
[4]杨晓春.新型抗肿瘤化合物MONCPT的药效学及机制研究[D].浙江大学,2010.
[5]He,Y.,etal.Ailanthonetargetsp23toovercomeMDV3100resistanceincastration-resistantprostatecancer.Naturecommunications7,13122(2016).
[6]JinH,WanC,ZouZ,etal.TumorAblationandTherapeuticImmunityInductionbyanInjectablePeptideHydrogel,ACSNano2018,12,32953310.