阿苯达唑（ABZ）又名丙硫咪唑，是苯并咪唑类驱虫药物，因其治疗效果好、毒性小等方面的优势，被广泛用于治疗动物的肠道寄生虫感染病，是目前兽医临床使用最广泛药物之一。阿苯达唑进入动物体内后会快速代谢为阿苯达唑亚砜（ABZSO），阿苯达唑亚砜进一步转化为阿苯达唑砜（ABZSO2），最终代谢为2-氨基阿苯达唑砜（ABZSO2-2-NH2）。因此，为监控阿苯达唑药物的使用情况，保障动物源性食品的安全，我国农业农村部和国家市场监督管理总局2019年发布的GB31650-2019《食品安全国家标准食品中兽药最大残留限量》中明确规定了阿苯达唑在所有食品动物靶组织中的残留标志物及残留限量。
检测项目：阿苯达唑、阿苯达唑亚砜、阿苯达唑砜、2-氨基阿苯达唑砜
应用范围：水产品（虾、蟹、鱼）
高效液相色谱法方法原理：试料中残留的阿苯达唑及代谢物，用乙酸乙酯提取，正己烷除脂，乙酸乙酯反萃取，高效液相色谱-荧光检测器测定，外标法定量。
前处理仪器：
分析天平（感量0.01g和0.00001g）；均质机；离心机；旋转蒸发器；氮吹仪；梨形瓶（100mL）；滤膜（有机相0.45μm）。
检测仪器：HPLC-FLD
试样的制备与保存
取适量新鲜或冷冻的鱼，去鳞、去皮，沿脊背取肌肉；虾，去头、去壳，取肌肉部分。绞碎，并使均质。
取均质后的供试样品，作为供试试料。
取均质后的空白样品，作为空白试料。
取均质后的空白样品，添加适宜浓度的标准工作液，作为空白添加试料。
试料于零下20℃以下保存。
前处理方法
1.虾、蟹类
提取：称取试料2g±0.02g，于50mL离心管中，加乙酸乙酯15mL，均质30s，振荡5min，4000r/min离心10min，取上清液于100mL梨形瓶中，残渣备用。另取一50mL离心管，加乙酸乙酯15mL，清洗均质机30s，洗涤液于残渣中，振荡5min，4000r/min离心10min，上清液合并至100mL梨形瓶中，于35℃旋转蒸发至干，用20%甲醇溶液1.0mL溶解残渣。
除脂：将上述溶液移入10mL离心管中，再向梨形瓶中加入正己烷1mL，洗涤，正己烷转入离心管中，振荡1min，4000r/min离心5min，弃正己烷层液，再加入正己烷1mL，重复操作两次，取下层液备用。
净化：备用液中加0.04mol/L磷酸1mL，混匀，加二氯甲烷1.5mL，混合1min，4000r/min离心5min，取二氯甲烷液于10mL离心管中，再加二氯甲烷1.5mL，重复提取两次，合并三次二氯甲烷液于10mL离心管中，于35℃氮气吹干；用0.02mol/L磷酸氢二钠溶液1.0mL溶解残余物，加乙酸乙酯2mL，混合1min，4000r/min离心5min，将乙酸乙酯液移入另一10mL离心管中，再向磷酸氢二钠溶液中加乙酸乙酯2mL，重复提取两次，合并三次乙酸乙酯液，于40℃氮气吹干，用20%甲醇-水1.0mL溶解残留物，滤膜过滤，供液相色谱测定。
2.鱼类
提取：称取试料2g±0.02g，于50mL离心管中，加乙酸乙酯15mL，均质30s，振荡5min，4000r/min离心10min，取上清液于100mL梨形瓶中，残渣备用。另取一50mL离心管，加乙酸乙酯15mL，清洗均质机30s，将此液倒入上述残渣中振荡提取5min，4000r/min离心10min，上清液合并至100mL梨形瓶中，于35℃减压旋转蒸发至干，加入20%甲醇溶液1.0mL溶解残渣。
除脂：将上述溶液移入10mL离心管中，再向梨形瓶中加入正己烷1mL，洗涤，正己烷转入离心管中，振荡1min，4000r/min离心5min，去除正己烷层，再加入正己烷1mL，依法重复操作两次。下层溶液过0.45μm有机相滤膜，供液相色谱测定。
国标解读及注意事项
1.标准物质用甲醇配成100μg/mL的标准储备液，在零下18℃以下避光保存，可使用3个月。
2.本方法中鱼类的提取净化方式为：乙酸乙酯提取两次，正己烷除脂三次；虾和蟹的提取净化方式为：乙酸乙酯提取两次，正己烷除脂三次，二氯甲烷和乙酸乙酯反萃取三次。所有基质均相当于2g试料上机检测。
3.由于虾蟹基质中会混入蟹黄等杂质，油脂含量高，颜色较深，所以需要通过使用二氯甲烷和乙酸乙酯进行反萃取，达到去除杂质，提高目标物回收率的效果。
4.根据基质中含油脂量的多少，调整正己烷除脂的次数。
5.本方法采用多次提取的方式提高目标化合物的回收率。
6.本方法使用基质流程曲线进行定量，根据实际样品选择适合的基质种类进行加标。
参考文献
GB29687-2013食品安全国家标准水产品中阿苯达唑及其代谢物多残留的测定高效液相色谱法
图1虾和蟹中阿苯达唑及其代谢物残留量测定的前处理流程图
图2鱼中阿苯达唑及其代谢物残留量测定的前处理流程图
阿苯达唑及其代谢物标准品信息表
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