目前，猴痘对公众的感染风险低，建议积极了解猴痘预防知识，做好健康防护。
近日，北京市医疗机构报告两例猴痘病毒感染病例，其中一例为境外输入病例，另一例为境外输入病例的关联病例，两名病例均是通过亲密接触感染。
发现病例后，市、区卫健疾控部门迅速开展了流调溯源、医疗救治等工作。目前两病例正在定点医院进行隔离治疗，情况稳定。
北京市疾控发布健康提示
猴痘的传染源及传播方式
猴痘的潜伏期及临床表现
猴痘的治疗方法
猴痘为自限性疾病，大部分预后良好。目前国内尚无特异性抗猴痘病毒药物。治疗主要是对症支持治疗和并发症治疗。大多数情况下，猴痘症状在2-4周内自行消失。
猴痘的预防
避免和罹患猴痘的人密切接触。
性接触、特别是男男性接触具有较高的风险。
避免在高发国家与野生动物直接接触。避免捕捉、宰杀、生食当地动物。
养成良好的卫生习惯。经常清洁和消毒，做好手卫生。
做好健康监测
若在国内外有可疑动物、人员或猴痘病例接触史，出现发热、皮疹等症状，应及时到正规医院就诊，一般可以选择皮肤科，并告知医生流行病学史，结痂前避免和他人密切接触。
猴痘防控指南和诊疗指南
猴痘重点内容和防控知识汇总，包括《猴痘防控技术指南（2022年版）》和《猴痘诊疗指南（2022年版）》等内容。
02、猴痘防控技术指南
国家卫生健康委办公厅关于印发猴痘防控技术指南（2022年版）的通知
各省、自治区、直辖市及新疆生产建设兵团卫生健康委,中国疾控中心：
为进一步指导各地做好猴痘疫情防控工作，规范猴痘流行病学调查、接触者判定和管理、实验室检测等工作，我委组织专家在原卫生部《猴痘流行病学调查原则（试行）》等三个技术方案的基础上整合修订形成了《猴痘防控技术指南（2022年版）》。现印发给你们，请遵照执行。执行过程中的有关问题和建议，请及时反馈我委。
国家卫生健康委办公厅
2022年6月27日
（信息公开形式：主动公开）
猴痘防控技术指南（2022年版）
猴痘是由猴痘病毒（Monkeypoxvirus,MPXV）感染所致的一种病毒性人兽共患病，临床表现主要为发热、皮疹、淋巴结肿大。其既往主要发生在中非和西非，病死率为通过接种疫苗可获得有效保护。由于在1980年消灭了天花并随后停止接种天花疫苗，猴痘已成为公共卫生领域最重要的正痘病毒。2022年5月初以来，已有20多个非地方性流行国家发现多例猴痘病例，且已出现人际传播。为指导各地规范处理猴痘疫情，特制定本防控技术指南。
一、疫情概况
猴痘病毒于1958年在绿猴中被发现，1970年在刚果民主共和国一名疑似天花患者的标本中首次分离到猴痘病毒，为首例确诊的人类猴痘病例。
人类猴痘病例主要分布在非洲中、西部热带雨林地带。自1970年以来，已有11个非洲国家（贝宁、刚果民主共和国、刚果共和国、喀麦隆、中非共和国、尼日利亚、科特迪瓦、利比里亚、塞拉利昂、加蓬和南苏丹）报告人类猴痘病例。1996至1997年，刚果民主共和国曾发生一次大规模暴发疫情，累计报告511例，死亡5人。2001年和2002年，刚果民主共和国再次报告猴痘暴发疫情，确诊病例485例，死亡25人。2017年和2018年，尼日利亚报告该国历史上规模最大的猴痘疫情，累计报告122例病例，死亡7人。2022年非洲共有5个国家报告猴痘病例，分别为刚果民主共和国（1月1日至5月8日报告1238例，死亡57人）、尼日利亚（1月1日至5月30日报告46例，无死亡）、喀麦隆（2021年12月15日至2022年5月1日报告25例，死亡9人）、中非共和国（3月4日至5月17日报告8例，死亡2人）和刚果共和国（5月21日至5月23日报告2例，无死亡）。
二、疾病概述
（一）病原学
猴痘病毒存在西非和刚果盆地两个分支，两者具有明确的流行病学和临床转归差异，西非分支猴痘患者的病死率约为3.6%,刚果盆地支猴痘患者病死率可达10.6%o2022年5月以来的猴痘疫情经测序分析，病毒属于西非分支。
猴痘病毒耐干燥和低温，在土壤、痂皮和衣被上可生存数月。该病毒对热敏感,加热至56℃30分钟或60℃10分钟即可灭活,紫外线和一般消毒剂均可使之灭活，对次氯酸钠、氯二甲酚、戊二醛、甲醛和多聚甲醛等敏感。
（二）流行病学
1.传染源
猴痘病毒的主要宿主为非洲啮齿类（非洲松鼠、树松鼠、冈比亚袋鼠、睡鼠等），灵长类（多种猴类和猿类）由于与感染的啮齿类动物接触偶可感染。感染动物及猴痘病毒感染者是主要传染源。
2.传播途径
3.人群易感性
既往接种过天花疫苗者对猴痘病毒存在一定程度的交叉保护力，因此，未接种过天花疫苗的人群对猴痘病毒普遍易感。
（三）临床表现
潜优期5-21天，多为6-13天。
发病早期出现发热、寒战、头痛、嗜睡、乏力、背部疼痛和肌痛等前驱症状。90%患者出现明显的浅表淋巴结肿大，如颈部、腋窝、腹股沟等。
发病后1-3天出现皮疹。首先出现在面部，逐渐蔓延至四肢,手心和脚掌均可出现皮疹。皮疹经历从斑疹、丘疹、疱疹、脓疱和结痂几个阶段，不同形态的皮疹可同时存在。疱疹和脓疱疹多为球形，直径约0.5-1厘米，质地较硬，可伴明显痒感和疼痛。疱疹数量从几个到数千个不等，多呈离心性分布。可累及口腔黏膜、消化道、生殖器、结膜和角膜等。病程约2-4周。
部分患者可出现并发症，包括皮损部位继发细菌感染、呕吐和腹泻引起的严重脱水、支气管肺炎、脑炎、角膜感染等。
三、预防
（一）宣传教育
在猴痘地方性流行地区，尽量避免与啮齿类动物和灵长类动物（包括患病或死亡的动物）发生接触，不直接接触动物的血和肉，必须彻底煮熟后才能食用。处理染病动物或感染组织以及在屠宰过程中，应配戴手套及其他适当的防护用品。同时加强个人手卫生。海关、卫生健康等部门可采取多种形式，积极、广泛地宣传猴痘病毒病防治知识，使公众及时、有效地釆取预防手段；并正确引导舆论，避免社会恐慌。
（二）疫苗接种
由于既往猴痘流行地区局限，且是一种自限性疾病，临床症状通常较轻，猴痘预防一般采取以管理传染源为主的综合性防治措施，但亦有疫苗可以对特定人群进行预防。
由于存在交叉免疫，接种天花疫苗可预防猴痘，我国既往的天花疫苗为复制型组织培养痘苗，暴露前接种可有效保护人群免受感染，而暴露后2周内，尤其是最初4天内接种者，约85%可产生免疫力，减轻症状严重性。
2019年美国批准了一款可用于职业暴露风险人群的非复制型猴痘疫苗Jynneos（MVA-BN）,国内非复制型痘苗正在研发中。
（三）主动就医和及时报备
疫区归国人员需注意自我健康监测，出现皮疹等症状时，应主动就医，并告知接诊医生疫区旅行史，以助于诊断和治疗。若在国外有过接触史和暴露史，尚未出现症状，可主动联系当地疾控中心进行咨询和报备。
（四）限制动物贸易
限制非洲啮齿类动物和灵长类动物的进口贸易，减少病毒向我国扩散风险。建议将感染动物与其他动物隔离，并立即实施检疫。对任何可能与感染动物有接触的动物，应进行检疫隔离；根据标准预防措施处理，观察症状30天。
四、诊断
（一）疑似病例
出现发热、淋巴结肿大伴有皮肤黏膜皮疹表现者，同时具备以下流行病学史中的任何一项：
1.发病前21天内有境外猴痘病例报告地区旅居史；
2.发病前21天内与猴痘确诊病例有密切接触；
3.发病前21天内接触过啮齿类、非人类灵长类等猴痘病毒感染动物的血液、体液和分泌物。
（二）确诊病例
符合疑似病例定义者，经实验室检测，猴痘病毒核酸阳性或病毒分离阳性者。
（三）鉴别诊断
主要和其他发热出疹性疾病鉴别，如水痘、带状疱疹、单纯疱疹、麻疹、登革热等。大部分猴痘病毒感染者伴有明显的浅表淋巴结肿大，皮疹呈离心性分布。此外，还要和皮肤细菌感染、疥疮、梅毒和过敏反应等鉴别。
五、疾病控制
疾病控制旨在实现早发现、早报告、早诊断、早调查、早处置。其中，病例发现、病例报告、流行病学调查和实验室检测等部分内容，在《国家卫生健康委办公厅关于做好猴痘病例监测工作的通知》（国卫明电〔2022）224号）文件要求的基础上进一步细化了工作内容和要求。
（一）病例发现
各级各类医疗卫生机构日常接诊发热伴出疹病人时，应注意询问病例流行病学史，同时进行病原学筛查，排除水痘、风疹、麻疹或其他明确病因引起。
（二）病例报告
各县（区）出现首例猴痘病例或者聚集性病例（32例），辖区疾控中心应当通过突发公共卫生事件报告管理信息系统在2小时内进行网络直报，事件级别选择“未分级”；并根据风险评估结果，及时进行事件级别调整并报告。
（三）流行病学调查
县（区）级疾控机构接报后要立即按照《猴痘疫情流行病学调查指南》、《猴痘接触者判定及管理指南》的要求（附件1和2）,组织开展流行病学调查，完成病例个案调查表，搜索密切接触者和一般接触者。
（四）病例和密切接触者管理
疑似和确诊病例应由当地卫生健康行政部门指派的专用交通工具，运送到指定专业传染病治疗机街进行严格隔离观察和治疗。对疑似和确诊病例应严格单人单间隔离，落实污染物处置，并尽快采样开展实验室病原学检测以明确诊断。对疑似和确诊病例的密切接触者要进行登记、集中隔离和医学观察，医学观察期限为21天。
（五）实验室检测
原则上，病例标本先由省级及以下疾控机构符合上述实验室生物安全要求的实验室进行初步检测，猴痘阳性标本送中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所复核。省级疾控机构不具备猴痘病毒检测条件的，应立即送病毒病所进行检测。各省首例需经国家卫生健康委组织专家会诊后确认。
（六）院内感染控制
疑似病例和确诊病例应安置在隔离病房。疑似病例单间隔离。确诊病例需隔离至结痂完全脱落。
医务人员执行标准预防，佩戴一次性乳胶手套、佩戴医用防护口罩、防护面屏或护目镜、一次性隔离衣等，同时做好手卫生。经专家评估后，可考虑为一线诊疗人员及时安排接种天花疫苗。
（七）消毒
按照猴痘病毒的传播途径，重点消毒患者的衣物、毛巾、床单、餐具等个人用品，被患者分泌物污染的物品及其他可能污染的环境和物体表面。接触患者或其污染的物品和环境时，应加强个人手卫生。具体消毒措施参见《猴痘消毒技术指南》（附件4）0
六、治疗和预后
（一）治疗
目前国内尚无抗猴痘病毒药物。治疗主要包括对症支持治疗和继发性细菌感染的治疗。
（二）预后
猴痘为自限性疾病，大部分预后良好。严重病例常见于年幼儿童、免疫功能低下人群，预后与感染的病毒株、病毒暴露程度、既往健康状况和并发症严重程度等有关。
附件：1.猴痘疫情流行病学调查指南
2.猴痘接触者判定和管理指南
3.猴痘病毒实验室检测技术指南
4.猴痘消毒技术指南
附件1
猴痘疫情流行病学调查指南
—、目的
流行病学调查是传染病预防控制的关键措施和重要工作环节。做好猴痘流行病学调查对于猴痘疫情的预防和控制至关重要,其主要目的是：
1.核实诊断；
2.查找传染源和传播途径；
3.追踪和管理患病的人和动物的接触者，阻断传播；
4.监测和评价疫情预防和控制措施落实情况及效果。
二、工作内容
1.猴痘病例个案调查；
2.接触者追踪和调查。
三、工作程序和方法
(―)病例个案调查
2.开展个案调查时，要认真、详细了解和记录患者发病前的国外旅游史和患病野生动物接触史等情况，发病后的密切接触者和一般接触者情况，以及疫苗接种史等信息。调查内容详见《猴痘个案调查表》（表1）。
（二）接触者追踪和调查
疾病预防控制机构根据猴痘病例个案调查获得的信息，及时开展猴痘病例或可疑动物的密切接触者和一般接触者的追踪和调查。接触者判定和处理原则详见《猴痘接触者判定和管理指南》（附件2）o密切接触者调查内容详见《猴痘密切接触者调查表》（表2）o
附表：1.猴痘个案调查表
2.猴痘密切接触者调查表
附件2
猴痘接触者判定和管理指南
—、判定标准
（一）密切接触者
1.日常生活、学习、工作中密切接触者
（2）接触2过有病症（如：结膜炎、呼吸系统症候、和/或皮疹）的进口哺乳动物类宠物3的人。
（3）接触过进口的有或没有临床病症的哺乳动物类宠物的人，但该哺乳动物类宠物曾接触过有猴痘临床症状的人或哺乳动物类宠物4。
2拥有宠物，曾抚摩、照顾过宠物，去过宠物店、兽医诊所或宠物批发处。
3进口哺乳动物类宠物包括土拨鼠（草原犬鼠）、冈比亚袋鼠、松鼠等。接触过其他进口或非进口的哺乳动物类宠物按照病例具体情况定。判定依据应包括接触过感染猴痘或有猴痘临床病症的哺乳动物。
4哺乳动物类宠物之间的接触包括与患猴痘动物共用饲养设施，或该设施内曾饲养过患猴痘动物。
（4）职业事故中（飞溅、锐器或气溶胶暴露等）暴露于含病毒样品的实验室工作人员。
2.飞机、公共汽车、火车和轮船等交通工具
（二）一般接触者
2.飞机、火车、公共汽车、轮船等交通工具中，座位在病例的前后三排且不是密切接触者的乘客。
3.为病例提供诊疗服务且正确使用个人防护设备的医务人员。
二、处理原则
（一）密切接触者处理原则
1.交通工具中的密切接触者和日常生活、学习、工作中曾接触猴痘病人或疑似病人或可疑动物的密切接触者，需进行医学观察。具体观察地点可以根据具体情况安排在统一地点隔离观察。如果密切接触者曾有过二次痘苗接种史，可按一般接触者处理。
2.医学观察期限为21天（自最后接触之日算起），医学观察期间应采取如下措施：
（1）由当地卫生健康行政部门指定的医疗卫生人员每日对病人的健康状况进行视察并给予健康教育和指导。
（2）密切接触者应每天观察的症状包括发热（337.4C）、浅表淋巴结肿大皮疹等，每天测体温两次。
（二）一般接触者的处理原则
一般接触者原则上可正常工作、学习和生活。
1.对交通工具中的一般接触者，疾控工作人员应登记有关信息，并通报旅行者目的地疾病预防控制机构。同时应向一般接触者讲明情况，告知其回到家中或住地后，应及时与当地疾病预防控制机构联系。
2.—般接触者需在接触后的21天内实行自我健康监测。观察期间内，尽量减少与他人接触，每天早晩各测量1次体温，一旦出现以下症状，包括发热（N37.4C）、浅表淋巴结肿大和皮疹等，应及时与当地疾病预防控制机构联系。
附件3
猴痘病毒实验室检测技术指南
—、检测对象
（一）猴痘确诊和疑似病例；
（二）密切接触者；
（三）感染或疑似感染猴痘病毒的动物；
（四）环境或其它生物材料。
二、技术人员基本要求
三、标本采集、保存和运输
（一）标本采集要求
1.从事猴痘病毒标本采集的技术人员应经过生物安全培训（培训合格）并具备相应的实验技能。釆样人员个人防护装备要求：N95或以上防护口罩、护目镜或面罩、连体防护服、双层乳胶手套、防水靴套；如果接触了患者血液、体液、分泌物或排泄物，应及时更换外层乳胶手套。
2.住院病例的标本由所在医院医护人员在当地疾控机构专业人员指导下采集。
3.密切接触者标本由当地疾控机构负责釆集。
4.感染或疑似感染猴痘病毒的动物由兽医部门专业采样人员负责采集。
5.环境或其它生物材料根据检测需要由专业采样人员负责采集。
6.根据实验室检测工作的需要，可结合病程多次采样。
（二）标本采集种类
用于实验室确认猴痘的推荐标本类型是皮肤病变标本，包括病变皮疹、痘疱表面和/或渗出物的拭子、痘疱液、痘疱表皮或痘痂。
其他研究材料如直肠和/或生殖器拭子、尿液、精液根据需要采集。
（三）标本采集方法
1.皮肤病变标本：视病变情况进行相应病变标本采集，需后期进行病毒分离的样本，收集管不含样本保存液。
（1）病变皮疹、痘疱表面和/或渗出物的拭子:使用无菌聚酯或涤纶拭子用力涂抹病变部位，以确保收集足够的病毒DNA,将拭子放置无菌收集管中。
（2）痘疱液：用酒精棉球对皮损处进行消毒，并自然干燥。用无菌针头和注射器吸取液体,放置于1.5至2毫升的无菌带0型橡胶圈的螺旋盖塑料管。
（3）皮疹或痘疱表皮、皮疹内液体拭子釆集：用酒精棉球对皮损处进行消毒，并自然干燥。用一次性手术刀（或无菌26号针头）打开并移除小泡或脓疱的顶部皮肤，将小泡顶部皮肤放置于1.5至2毫升的无菌带0型橡胶圈的螺旋盖塑料管中。用无菌聚酯或涤纶拭子擦拭皮损底部，将拭子放置于无菌收集管中。
（4）痘痂或硬皮：用酒精棉球对皮损处进行消毒，并自然干燥。用无菌26号针头或剪刀取至少4块痂皮，每块痂皮要来自不同的身体部位。将痂皮放置于1.5至2毫升的无菌带0型橡胶圈的螺旋盖塑料管中。
注意：可以将两个相同类型的病变标本收集在一个管中，最好是从身体的不同部位收集的，且外观不同。不同类型病变（如痘疱液和痘痂）不能放在同一管中。尽量每种类型标本收集两份,检测时先对其中一份进行检测，仅在第一份结果不确定时再对第二份进行检测。
2.咽拭子：用2根聚丙烯纤维头的塑料杆拭子同时擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁，将拭子放入无菌采样液管中，尾部弃去，旋紧管盖。
3.血液标本：尽量釆集急性期、恢复期双份血清。第一份血清应尽早（最好在发病后7天内）釆集，第二份血清应在发病后第34周釆集。采集量5ml,以空腹血为佳，建议使用含有EDTA抗凝剂的真空釆血管采集血液标本5ml后，室温静置30分钟，15002000rpm离心10分钟,分别收集血浆和血液中细胞于无菌螺口塑料管中。
4.血清标本：用真空负压采血管采集血液标本5ml,室温静置30分钟，15002000rpm离心10分钟，收集血清于无菌螺口塑料管中。
5.其他材料：依据设计需求规范采集。
（四）标本保存
标本应在收集后一小时内冷藏（2至8。0或冷冻（-20°C或更低），并尽快进行检测。能在一周以内检测的标本可置于4笆保存;无法检测的标本，短期可在-20C中保存，长期应置于-70笆以下保存（收集后＞60天）o全血分离血浆前冷藏（2至8C）,然后-20笆或以下保存。应设立专库或专柜单独保存标本。标本应避免反复冻融
（五）标本送检
标本采集后应尽快送往实验室，如果需要长途运输标本，建议采用冷冻运输方式进行保藏。
1.上送标本：病例标本先由省级及以下疾控机构进行初步检测，猴痘阳性标本送中国疾控中心病毒病所复核。省级疾控机构不具备猴痘病毒检测条件的，应立即送中国疾控中心病毒病所进行检测，样本送检单见附表。
2.病原体及标本运输
（1）国内运输。猴痘毒株或其他潜在感染性生物材料的运输包装分类属于A类，对应的联合国编号为UN2814,包装符合国际民航组织文件Doc9284《危险品航空安全运输技术细则》的PI602分类包装要求，通过其他交通工具运输的可参照以上标准包装。猴痘毒株或其他潜在感染性材料运输应按照《可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定》（原卫生部令第45号）办理《准运证书》。
四、实验室管理基本要求
（一）实验室资质要求
开展猴痘病毒核酸检测的实验室，应当符合《病原微生物实验室生物安全管理条例》（国务院令第424号）和《医疗机构临床基因扩增检验实验室管理办法》（卫办医政发〔2010）194号）有关规定，具备国家卫生健康委备案的生物安全三级（BSL-3）实验室及以上实验室条件，并获得从事猴痘病毒实验活动的批准，具备临床基因扩增检验实验室条件。独立设置的医学检验实验室还应当符合《医学检验实验室基本标准（试行）》《医学检验实验室管理规范（试行）》等要求。
（二）实验室生物安全要求
根据《人间传染的病原微生物名录》中的有关规定，猴痘病毒生物危害分类为第一类，是一种高致病性病毒。涉及活病毒的样本灭活操作需在BSL-3及以上实验室的生物安全柜内进行。灭活样本中的病毒DNA提取可在生物安全二级（BSL-2）实验室或PCR检测的专门区域或房间进行，严格按照分区操作原则操作。
（三）实验室分区要求
原则上开展猴痘病毒核酸检测的实验室应当设置以下区域：试剂储存和准备区、标本制备区、扩增和产物分析区。三个区域在物理空间上应完全相互独立，不能有直接空气流通。各区功能分别是：
1.试剂储存和准备区：贮存试剂的制备、试剂的分装和扩增反应混合液的制备，以及离心管、吸头等消耗品的贮存和准备。
2.标本制备区：转运桶开启、标本灭活，核酸提取及加入至扩增反应管等。
3.扩增和产物分析区：核酸扩增和产物分析。
根据使用仪器的功能，区域可适当合并。如釆用标本处理、核酸提取及扩增检测为一体的自动化分析仪，标本制备区、扩增和产物分析区可合并。
（四）主要仪器设备
实验室应当配备与开展检验项目相适宜的仪器设备，包括：二级生物安全柜、高速台式离心机、干浴恒温器、荧光定量PCR仪、计时器、组织匀浆仪、移液器(1OOuL,200uL,1000uL)。
五、实验室猴痘病毒核酸检测
实验室接到标本后，应当在BSL-3及以上实验室的生物安全柜内对标本进行清点核对，并对标本进行灭活处理。按照标准操作程序进行试剂准备、标本前处理、核酸提取、核酸扩增、结果分析及报告。实验室应当建立可疑标本和阳性标本复检流程。
(一)试剂与材料
1.标本：包括痘疱液、病变皮疹、痘痂、全血或血清、咽拭子、皮疹和痘疱表面或渗出液拭子和其它可疑标本。
2.核酸提取试剂盒(基因组DNA提取试剂盒)：组织基因组DNA提取试剂盒或血液/细胞/组织基因组DNA提取试剂盒。
3.核酸检测试剂：
（1）试剂：DNA聚合酶或预混的PCR反应试剂(PCRMasterMix)。
（2）猴痘病毒检测引物、探针：
（3）阳性对照：涵盖检测部位序列的质粒。
2.灭菌去离子水、无水乙醇
3.消毒液
（1）75%医用酒精：用于手部和物体表面常规消毒，整瓶开启有效期1周。
（2）含氯消毒液：每次现用现配，含有效氯1000mg/L的消毒液用于手部和物体表面常规消毒，含有效氯5000mg/L的消毒液用于感染性材料溢洒时的应急处理。
4.耗材：包括带滤芯的吸头、螺旋口的离心管、非螺旋口的离心管、含错珠的粉碎管、PCR反应板和透明封膜或PCR反应管和透明盖。
5.BSL-3个人防护用品：包括医用防护口罩、医用连体防护服、防护眼罩、一次性帽子、鞋套、靴套和手套。
6.BSL-2或PCR室个人防护用品：包括反穿衣、一次性手套、口罩、帽子、鞋套(或工作鞋)。
(二)实验前的样品接收
1.核对被检样本编号、姓名、性别、年龄及检测项目；
2.待检样本的状态如有异常，需注明；
3.待检样本长期存放在-70C,短期存放可在-20℃,避免反复冻融。
(三)核酸检测操作步骤及注意事项
1.病毒核酸(DNA)的制备
需注意：未灭活样本必须在BSL-3及以上实验室的生物安全柜内进行，至病毒灭活后方可从实验室中取出进行下一步操作。操作方法按DNA提取试剂盒相应说明书进行操作，具体如下：
（1）提取试剂准备：第一次开启试剂盒，在使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上标签。所有试剂在使用前应平衡至室温；所有离心步骤应在室温下进行。
（2）处理样本：
A.痘疱液：将痘疱液用适当体积的含PS的PBS或DMEM重悬，取100uL样本，加入80uL缓冲液，总量为180uL；样本不足100卩L时用缓冲液补足至总量180uL；
B.病变皮疹或痘痂：取1块痂皮按质量/体积(lmg：5uL)加入相应体积含PS的PBS,研磨或匀浆处理，取80uL,然后加入100卩L缓冲液；
C.咽拭子、其它拭子：若拭子在样本保存液中可直接取20011L样本，若为干拭子可用3ml含PS的PBS或DMEM重悬，然后取200uL样本；
D.全血或血清：直接取200uL样本。
（3）加入20uL蛋白酶K溶液，混匀，溶液会变清亮。若样本为病变皮疹或其它组织时，加入蛋白酶K混匀后，在56℃放置，直至组织溶解，再进行下一步骤。
（4）加200LiL裂解缓冲液,充分混匀，70℃放置10min,或至溶液应变清亮，简短离心以去除管盖内壁水珠。
需注意：加入裂解缓冲液后可能会出现白色絮状沉淀，在70℃放置后会消失。如溶液未变清亮，说明细胞裂解不彻底，可能导致提取DNA量少或提取出的DNA不纯。
（5）加200uL无水乙醇，充分混匀，此时可能会出现絮状沉淀，简短离心以去除管盖内壁水珠。
（6）通过以上操作，病毒灭活。若需要从BSL-3及以上实验室取出继续其它操作,可将样本管表面用含有效氯1000mg/L的消毒液擦拭，从生物安全柜中取出，放入样本盒中。对样本管表面及样本盒(内外)完全消毒后带出BSL-3实验室。
（7）将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入吸附柱中(吸附柱放入废液收集管中)，8000rpm/min离心Imin,弃掉废液。
（8）加入500uL漂洗缓冲液1(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，8000rpm/min离心lmin,弃掉废液。
（9）加入500UL漂洗缓冲液2(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),最大转速13000rpm/min离心3min,弃掉废液。
（10）将吸附柱放回废液收集管中，最大转速13000rpm/min离心Imin,尽量去除漂洗液。
（11）将吸附柱转入一个干净的离心管中(需自己准备，试剂盒中未提供)，加入50uL洗脱缓冲液或灭菌去离子水，室温放置2-5min,8000rpm/min离心lmin。收集滤出液，做好标记，4℃或-20℃(短期)保存备用，-70℃长期保存。
2.核酸检测：实时荧光定量PCR(qPCR)方法检测猴痘病毒核酸(PCR实验室进行)。
(1)反应体系的准备：每孔20uL,加入5uL样本DNA,共计25uL；每次PCR反应，除了检测样本外，应加无DNA对照(用水代替DNA)、阳性对照；所有样本，包括对照，应设复孔。
(2)加样：每反应管中加入核酸或对照各5uL,盖紧管盖或封好透明膜,置于荧光定量PCR检测仪上。
(3)扩增条件设定：
备注：*若用的试剂不是ABI的试剂可省略此步骤。
(4)仪器检测通道选择:使用荧光定量PCR检测仪，选择Fam荧光信号检测通道，收集设在60℃。具体设置方法请参照各仪器使用说明书。
(5)结果分析阈值设定:使用荧光定量PCR检测仪进行结果分析时，基线取3-10或6-15个循环的荧光信号，阈值设定原则为阈值线刚好超过正常阴性对照品扩增曲线最高点，也可根据仪器噪音情况调整阈值。
3.核酸检测结果判断
（1）RealtimePCR反应系统的质量控制:反应结果应同时符合以下2个条件，否则试验结果无效，应重新开展检测。阴性对照无扩增，为阴性。阳性对照未出现阴性结果。
（2）结果判定：
A.阴性：双孔Ct＞37,或无Ct值;
B.灰区:一孔Ct值＞37；
C.阳性:双孔Ct值＜37。
所有阳性和处于灰区的样本应重复检测或经序列分析进行确诊。需注意：当样本仅为咽拭子或血清、血浆时，且检测结果为阴性时，应结合临床症状，慎重做出阴性诊断。
4.记录表格
做好荧光定量实时PCR方法检测猴痘病毒核酸原始记录。
附表：猴痘病毒检测样本送检表
附表:
猴痘病毒检测样本送检表
附件4
猴痘消毒技术指南
—、适用范围
本指南适用于对猴痘病例（包括疑似和确诊病例）可能污染的场所和物品进行的随时消毒和终末消毒。
二、消毒原则
（―）范围和对象确定
根据流行病学调查结果，确定现场消毒的范围和对象。对猴痘病例在住院、转运期间可能污染的环境和物品，进行随时消毒。对猴痘病例居住或活动过的场所，如居住场所、工作场所、学习场所、诊疗场所、转运工具，及其他可能受到污染的场所，在其离开后（如住院、转院、出院、死亡）应进行终末消毒。
（二）方法选择
1.诊疗用品消毒：尽量选择一次性诊疗用品，非一次性诊疗用品应首选压力蒸汽灭菌，不耐热物品可选择化学消毒剂或低温灭菌设备进行消毒或灭菌。
2.手消毒：建议使用手消毒剂揉搓双手进行消毒，也可选择75%乙醇、过氧化氢等消毒剂。
3.环境和物体表面消毒：可选择含氯消毒剂、二氧化氯、过氧乙酸、过氧化氢等消毒剂擦拭、喷洒或浸泡消毒。
4.衣物、床单等纺织品消毒：可选择热力消毒、含氯消毒剂或季緩盐类消毒剂浸泡等消毒方式。
三、常见污染的消毒方法
（一）手消毒
可选用速干手消毒剂，或直接用75%乙醇进行擦拭消毒；醇类过敏者，可选择季铉盐类等有效的非醇类手消毒剂。有肉眼可见污染物时，应先使用洗手液（或肥皂）在流动水下按照六步洗手法清洗双手，然后按上述方法消毒。
（二）皮肤、黏膜
皮肤被污染物污染时，应立即清除污染物，再用一次性吸水材料沾取0.5%碘优或过氧化氢消毒剂擦拭消毒3分钟以上，使用清水清洗干净；粘膜应用大量生理盐水冲洗或0.05%碘优冲洗消毒。
（三）衣服、床单、毛巾等纺织品
病例使用的衣服、床单、毛巾等纺织品，无肉眼可见污染物时，若需重复使用，可用流通蒸汽或煮沸消毒30分钟；或用有效氯500mg/L的含氯消毒剂或1000mg/L的季皎盐类消毒剂浸泡30分钟后，按照常规清洗；或其他有效的消毒方法。怕湿的衣物可选用环氧乙烷或干热方法进行消毒处理。
有血液、体液、分泌物、排泄物等污染物时，建议均按医疗废物集中处理。
（四）餐（饮）具
病例用后的碗、盘、筷、杯等餐（饮）具清除食物残渣后,煮沸消毒30分钟，或使用有效氯500mg/L的含氯消毒剂浸泡30分钟后，再用清水洗净。
（五）污染物
对病例的血液、体液、分泌物、排泄物等少量污染物，可用一次性吸水材料（如纱布、抹布等）沾取有效氯5000mg/L-10000mg/L的含氯消毒剂（或能达到高水平消毒的消毒湿巾/干巾）小心移除。
对病例的血液、体液、分泌物、排泄物等大量污染物，应使用含吸水成分的消毒粉或漂白粉完全覆盖，或用一次性吸水材料完全覆盖后，用足量的有效氯5000mg/L-10000mg/L的含氯消毒剂浇在吸水材料上，作用30分钟以上（或能达到高水平消毒的消毒干巾），小心清除干净。清除过程中避免接触污染物,清理的污染物按医疗废物集中处置。
病例的分泌物等应采用专门容器收集，用有效氯20000mg/L的含氯消毒剂，按物、药比例1：2浸泡消毒2小时。
清除污染物后，应对污染的环境物体表面进行消毒。盛放污染物的容器可用有效氯5000mg/L的含氯消毒剂溶液浸泡消毒30分钟，然后清洗干净。
（六）地面、墙壁
（七）物体表面
诊疗设施设备表面以及床围栏、床头柜、家具、门把手和家居用品等有肉眼可见污染物时，应先完全清除污染物再消毒。无肉眼可见污染物时，用有效氯1000mg/L的含氯消毒剂或500mg/L的二氧化氯消毒剂、不耐腐蚀的物体表面也可用2000mg/L的季铉盐类消毒剂进行喷洒、擦拭或浸泡消毒，作用30分钟后清水擦拭干净。
（八）污水和粪便
具有独立化粪池时，在进入市政排水管网前需进行消毒处理，消毒后污水应当符合《医疗机构水污染物排放标准》（GB18466-2005）。
无独立化粪池时，使用专门容器收集排泄物，消毒处理后排放。用有效氯20000mg/L的含氯消毒剂，按粪、药比例1：2浸泡消毒2小时；若有大量稀释排泄物，应用含有效氯70%80%漂白粉精干粉，按粪、药比例20：1加药后充分搅匀，消毒2小时。
（九）室内空气
如经科学评估，需对室内进行空气消毒，则在无人情况下,可选择5000mg/L过氧乙酸、3%过氧化氢、二氧化氯（按产品说明书）等消毒剂，按20mL/m3用超低容量（气溶胶）喷雾法进行消毒。也可采用经验证安全有效的其他消毒方法。
（十）患者生活垃圾
患者生活垃圾按医疗废物处理。
（十一）医疗废物
医疗废物的处置应遵循《医疗废物管理条例》和《医疗卫生机构医疗废物管理办法》的要求，规范使用双层黄色医疗废物收集袋封装后按照常规处置流程进行处置。
四、注意事项
消毒实施单位应具备现场消毒能力，操作人员应经过消毒专业培训，掌握消毒和个人防护基本知识，熟悉消毒器械的使用和消毒剂的配制等。
03、猴痘诊疗指南
猴痘诊疗指南（2022年版）
猴痘是一种由猴痘病毒（Monkeypoxvirus，MPXV）感染所致的人兽共患病毒性疾病，临床上主要表现为发热、皮疹、淋巴结肿大。该病主要流行于中非和西非。2022年5月以来，一些非流行国家也报道了猴痘病例，并存在社区传播。为提高临床医师对猴痘的早期识别及规范诊疗能力，特制定本诊疗指南。
一、病原学
猴痘病毒（MPXV）归类于痘病毒科正痘病毒属，是对人类致病的4种正痘病毒属之一，另外3种是天花病毒、痘苗病毒和牛痘病毒。电镜下猴痘病毒颗粒呈砖形或椭圆形，大小为200nm×250nm，有包膜，病毒颗粒中有结构蛋白和DNA依赖的RNA多聚酶，基因组为双链DNA，长度约197kb。猴痘病毒分为西非分支和刚果盆地分支两个分支。本次非流行国家部分病例病毒测序结果为西非分支。
猴痘病毒的主要宿主为非洲啮齿类动物（包括非洲松鼠、树松鼠、冈比亚袋鼠、睡鼠等）。
猴痘病毒耐干燥和低温，在土壤、痂皮和衣被上可生存数月。对热敏感，加热至56℃30分钟或60℃10分钟可灭活。紫外线和一般消毒剂均可使之灭活，对次氯酸钠、氯二甲酚、戊二醛、甲醛和多聚甲醛等敏感。
二、流行病学
（一）传染源
主要传染源为感染猴痘病毒的啮齿类动物。灵长类动物（包括猴、黑猩猩、人等）感染后也可成为传染源。
（二）传播途径
病毒经黏膜和破损的皮肤侵入人体。人主要通过接触感染动物病变渗出物、血液、其它体液，或被感染动物咬伤、抓伤而感染。人与人之间主要通过密切接触传播，也可通过飞沫传播，接触被病毒污染的物品也有可能感染，还可通过胎盘垂直传播。尚不能排除性传播。
（三）易感人群
人群普遍易感。既往接种过天花疫苗者对猴痘病毒存在一定程度的交叉保护力。
三、临床表现
猴痘为自限性疾病，大部分预后良好。严重病例常见于年幼儿童、免疫功能低下人群，预后与感染的病毒分支、病毒暴露程度、既往健康状况和并发症严重程度等有关。西非分支病死率约3%，刚果盆地分支病死率约10%。
四、实验室检查
（一）一般检查
外周血白细胞正常或升高，血小板正常或减少。部分患者可出现转氨酶水平升高、血尿素氮水平降低、低蛋白血症等。
（二）病原学检查
1.核酸检测：采用核酸扩增检测方法在皮疹、疱液、痂皮、口咽或鼻咽分泌物等标本中可检测出猴痘病毒核酸。
2.病毒培养：采集上述标本进行病毒培养可分离到猴痘病毒。病毒培养应当在三级及以上生物安全实验室开展。
五、诊断和鉴别诊断
（一）诊断标准
1.疑似病例
出现上述临床表现者，同时具备以下流行病史中的任一项：
（1）发病前21天内有境外猴痘病例报告地区旅居史；
（2）发病前21天内与猴痘病例有密切接触；
（3）发病前21天内接触过猴痘病毒感染动物的血液、体液或分泌物。
2.确诊病例
疑似病例且猴痘病毒核酸检测阳性或培养分离出猴痘病毒。
（二）鉴别诊断
主要和水痘、带状疱疹、单纯疱疹、麻疹、登革热等其它发热出疹性疾病鉴别，还要和皮肤细菌感染、疥疮、梅毒和过敏反应等鉴别。
六、治疗
目前国内尚无特异性抗猴痘病毒药物，主要是对症支持和并发症的治疗。
（一）对症支持治疗。卧床休息，注意补充营养及水分，维持水、电解质平衡。体温高者，物理降温为主，超过38.5℃，予解热镇痛药退热，但要注意防止大量出汗引发虚脱。
保持皮肤、口腔、眼及鼻等部位清洁及湿润，避免搔抓皮疹部位皮肤，以免继发感染。皮疹部位疼痛严重时可予镇痛药物。
（二）并发症治疗。继发皮肤细菌感染时给予有效抗菌药物治疗，根据病原菌培养分离鉴定和药敏结果加以调整。不建议预防性应用抗菌药物。出现角膜病变时，可应用滴眼液，辅以维生素A等治疗。出现脑炎时给予镇静、脱水降颅压、保护气道等治疗。
（四）中医治疗。根据中医“审因论治”、“三因制宜”原则辨证施治。临床症见发热者推荐使用升麻葛根汤、升降散、紫雪散等；临床症见高热、痘疹密布、咽痛、多发淋巴结肿痛者推荐使用清营汤、升麻鳖甲汤、宣白承气汤等。
七、出院标准
符合以下标准可以出院：体温正常，临床症状明显好转，结痂脱落。
八、医疗机构内感染预防与控制
疑似病例和确诊病例应安置在隔离病房。疑似病例单间隔离。
医务人员执行标准预防，采取接触预防、飞沫预防措施，佩戴一次性乳胶手套、医用防护口罩、防护面屏或护目镜、一次性隔离衣等，同时做好手卫生。
对患者的分泌物、粪便及血液污染物按照《医疗机构消毒技术规范》进行严格消毒处理。
撰写|CDC疾控人
校稿|Gddra
编审|Hide/Bluesea
编辑设计|Alice
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