【预期用途】本试剂盒采用ELISA方法定性检测犬粪中包虫抗原。
【检测原理】如果待检样品中含有包虫抗原，就会与包被板上的包虫抗体及第二步加入的酶标
结合物特异性结合，间接结合在包被板上的酶标结合物与底物反应的显色状况即可反映出
样品中是否含有包虫抗原。
【储存条件及有效期】2~8℃避光保存，防止冷冻，有效期为12个月。
【适用仪器】
含450nm和630nm波长的酶标仪；37℃恒温设备；可调单道/多道微量移液器。
【样品要求】
1、本试剂适用于检测犬粪样品；
2、应采集新鲜的犬粪样品进行测试。若不能及时检测，应将粪样低温冻存，防止腐败或反复冻融。如犬粪难以溶解，应适当捣碎处理。
【检验方法】
1.洗涤液配制：用蒸馏水或去离子水将洗涤液10×（2号液）按1:10稀释（例如，取100mL洗涤液10×，加900mL蒸馏水或去离子水混合），充分混匀即为工作浓度洗涤液。
2.样品稀释液配制：用蒸馏水或去离子水将样品稀释液2×（5号液）按1:1稀释（如取100mL浓缩样品稀释液加100mL蒸馏水或去离子水），充分混匀即为工作浓度样品稀释液。
3.样品处理：犬粪样品需要预先低温（-70℃以下）冷冻7天以上，以灭活虫卵。称取1克犬粪,加入1mL工作浓度样品稀释液，充分搅拌混匀，静置10分钟，再3000rpm离心10分钟，取上清液待检。
4.加样反应：样品孔，每孔仅加入100μL待检样品；阴性对照2孔，每孔仅加入100μL阴性对照品；阳性对照2孔，每孔仅加入100μL阳性对照品。盖好封板膜，37℃避光反应30分钟。
5.洗板：甩去孔内液体，每孔注满工作浓度洗涤液洗板6次，每次均需静置1分钟；最后一次甩净，拍干。
6.加酶反应：每孔加酶结合物（1号液）100μL，盖好封板膜，37℃避光反应30分钟。甩去孔内液体，如上洗板，拍干。
7.显色反应：按所需用量，临用前取等体积底物（3号液）和显色剂（4号液）充分混匀后每孔加100μL，盖好封板膜，37℃避光反应10分钟。
8.终止反应：加终止液（6号液）50μL，用酶标仪双波长（450nm作为主波长，630nm作为参比波长）读取OD值。
【参考值】
1.Cut-off值（COV）=阴性对照平均OD值×2.1（阴性对照孔OD值＜0.15时按0.15计）。
2.有效性判定：
阴性对照孔OD值≤0.30（若大于0.30则实验无效）；
阳性对照孔OD值≥0.50（若小于0.50则实验无效）。
【检验结果的解释】
样品OD值≥COV，判为包虫抗原阳性；
样品OD值＜COV，判为包虫抗原阴性。
【检验方法的局限性】本试剂盒仅供筛查，不作为确诊依据。
【注意事项】
1.试剂盒各组份从冷藏环境中取出时，必须平衡至室温后，方可开封启用。未使用完的试剂组份应及时放回2~8℃密封保存。
2.加试剂前应将试剂轻摇、混匀。
3.孵育时必须用封板膜密封板孔，封板膜不可以重复使用。
4.不同批次试剂盒的试剂组份或说明书不可混用。瓶盖每次使用后要盖紧，各瓶之间瓶盖不可混用。
5.用弃的试剂盒及样品都应按污染物妥善处理。试剂盒内终止液有腐蚀性，须小心使用。