1.实验室布局核酸检测实验室的布局是预防污染的根本,合理布局可以大大降低污染的概率。一般情况分为四个区分别为试剂准备区,标本制备区、核酸扩增区和产物分析区。对于不需要电泳的荧光定量PCR,核酸扩增区和产物分析区可以合并。每个区应独立通风,可控制空气流动方向。(图片来自《实时荧
一、标准品和对照品的概念对照品指用于鉴别、检查、含量测定和校正检定仪器性能的标准物质。标准品指用于生物检定、抗生素或生物药品中含量或效价测定的标准物质,以效价单位(U)表示。国家标准品及生物参考品系指用于鉴别、检查含量或效价测定的标准物质,其制备与标定应符合:“生物
1.需要用户自己准备的耗材、仪器和试剂a.具有FAM和VIC荧光通道的荧光定量PCR仪。b.DNase-free、RNase-free的吸头、离心管、荧光定量PCR用96孔板或384孔板、PCR板封板膜。c.生物安全柜。d.RNA提取试剂盒。2.样本准备a.本试剂盒适用样本类型:上呼吸道标本(包括
常规PCR中,在扩增反应结束之后,我们一般通过凝胶电泳的方法对扩增产物进行定性的分析,无法对PCR扩增反应进行实时检测,也无法对起始模板准确定量,而很多情况下,我们所感兴趣的是起始模板量,如转基因动植物中插入某种外源基因的拷贝数或者病人中某种病毒DNA/RNA的精确copy数等,如此,荧光定量PCR
荧光定量PCR耗材是特异性靶基因检测与定量的一体化平台。将PCR热循环,荧光检测和各种应用分析软件结合在一起,可以动态观察PCR每一循环各反应管中PCR扩增产物逐渐增加的情况。PCR实验结束后可以马上得到定量结果,无需凝胶电泳分析,无需纯化PCR产物,无需进行任何实验操作。荧光定量PCR
样品到达域值水平所经历的循环数称为Ct值(限制点的循环数)。域值应设定在使指数期的扩增效率为最大,这样可以获得最准确,可重复性的数据。如果同时扩增的还有标有相应浓度的标准品,线性回归分析将产生一条标准曲线,可以用来计算未知样品的浓度。
致病微生物系列致泻大肠埃希氏菌鉴定剂盒(PCR法)产品说明致泻大肠埃希氏菌鉴定剂盒参照《GB4789.6—2016食品安全国家标准食品微生物学检验致泻大肠埃希氏菌检验》进行设计,可针对食品样品中的致泻大肠埃希氏菌特异核酸片段进行扩增,通过电泳判断样品的鉴定结果。该
致病微生物系列致泻大肠埃希氏菌鉴定剂盒(PCR法)产品说明致泻大肠埃希氏菌鉴定剂盒参照《GB4789.6—2016食品安全国家标准食品微生物学检验致泻大肠埃希氏菌检验》进行设计,可针对食品样品中的致泻大肠埃希氏菌特异核酸片段进行扩增,通过电泳判断样品的鉴定结果。该产品检出限为10^3cfu/
实时荧光PCR定量仪是一种用于临床医学领域的分析仪器,于2015年4月30日启用。技术指标9个数量级的线性范围;可以检测2-μL反应体积单一报告荧光TaqMan实验中仅10个起始拷贝数的模板,其可置信度高达99.7%。主要功能基于相对定量分析的基因表达分析以标准曲线为基础的病
说明物种鉴定系列中的过敏原鉴定试剂,可针对食品中过敏原成分的特异核酸片段进行扩增,通过实时扩增曲线判定结果。本产品用于食品及其原料中过敏原虾成分的检测,可于一个反应中同时检测虾与北极虾,检出限为0.01%。(需注意:FAM通道的检测引物为虾的检测引物,对海蟹、虾/蟹爬、虎头蟹、赤甲蟹有非特异性扩增。
AgilentGC色谱柱应用范围及与其他公司GC色谱柱对照表应用Agilent固定相组成极性温度范围(等温/程序升温)相似固定相键合相胺类、烃类、杀虫剂、多氯联苯类(PCBS)、酚类、硫化物、调料和香料、酚类HP-1HP-1MS二甲基聚硅氧烷非极性a:-60~325/350b:-60~30
实验材料限制性内切核酸酶反转录酶热稳定DNA聚合酶dCTP靶核酸试剂、试剂盒扩增缓冲液dNTP贮存液胎盘RNase抑制剂仪器、耗材琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶屏蔽型枪头离心管正向排液式移液器PCR仪实验步骤一、材料1.缓冲液与溶液10X扩增缓冲液4种dNTP贮存液(20
在普通PCR仪的基础上增加一个荧光信号采集系统和计算机分析处理系统,就成了荧光定量PCR仪。其PCR扩增原理和普通PCR仪扩增原理相同,只是PCR扩增时加入的引物是利用同位素、荧光素等进行标记,使用引物和荧光探针同时与模板特异性结合扩增。扩增的结果通过荧光信号采集系统实时采集信号连接输送到计算机分析
荧光定量PCR仪技术原理将标记有荧光素的Taqman探针与模板DNA混合后,完成高温变性,低温复性,适温延伸的热循环,并遵守聚合酶链反应规律,与模板DNA互补配对的Taqman探针被切断,荧光素游离于反应体系中,在特定光激发下发出荧光,随着循环次数的增加,被扩增的目的基因片段呈指数规律增长,通过实时
荧光定量PCR仪技术原理将标记有荧光素的Taqman探针与模板DNA混合后,完成高温变性,低温复性,适温延伸的热循环,并遵守聚合酶链反应规律,与模板DNA互补配对的Taqman探针被切断,荧光素游离于反应体系中,在特定光激发下发出荧光,随着循环次数的增加,被扩增的目的基因片段呈指数规律增长,通过实
PCR市场分为三个领域:生命科学研究,食品和农业,医疗诊断。生命科学研究市场增长迅速。有调查显示PCR市场全球有8%的增长趋势。其中:qPCR占有总PCR市场的64%。1、主要是目标DNA定量和基因表达2、针对传染病,产前诊断,食品中的病原菌的筛选,转基因检测的qPCR试剂盒市场增长热模块系统
时荧光定量PCR技术即是在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号实时监测整个PCR进程,zui后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR避免了传统PCR以终产物检测定量产生的偏差,提高实验的重复性。该技术已被广泛用于检测细胞mRNA表达量的变化;比较不同组织的mRNA
DNA有着双螺旋结构,当温度达到95摄氏度时,双链的DNA会分解成为单链状态,而在温度到达72摄氏度左右时,DNA聚合酶会沿着磷酸到五碳糖的方向进行合成。聚合酶链反应PCR就是通过不断地调节温度,以数量级的速度增加DNA数量的方法。而实时荧光定量PCR是指,在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信
国内最先进的荧光定量PCR检测系统,是国际上最新研制的一种核酸定量技术,该技术在PCR反应系统中引入了荧光标记探针,具有高灵敏性、高特异性、和高精确性的特点。目前已被应用于病原体测定、肿瘤基因检测、免疫分析、基因表达、突变和多态性研究等多个领域。荧光定量PCR(简称FQ-PCR)由美国PE公司199
通过实时荧光定量PCR技术实现对miRNA靶向物mRNAs的相对定量分析1导言小RNA(miRNAs)是一种内源性非编码蛋白的小分子RNA,它们是许多基础的细胞过程中基因表达的主要调节因子,这些过程包括细胞增殖、细胞分化以及细胞凋亡等。miRNA在肿瘤生长过程中也发挥着重要作用。一般来说,miRN
所谓实时荧光定量PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。检测方法1.SYBRGreenⅠ法:在PCR反应体系中,加入过量SYBR荧光染料,SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后,发射荧光信
荧光定量PCR是1996年由美国AppliedBiosystems公司推出的一种新定量试验技术,它是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针,对PCR产物进行标记跟踪,实时在线监控反应过程,结合相应的软件可以对产物进行分析,计算待测样品模板的初始浓度。荧光定量PCR原理PCR扩增时在加入一对引物的
荧光定量PCR是1996年由美国AppliedBiosystems公司推出的一种新定量试验技能,它是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针,对PCR产品进行标记盯梢,实时在线监控反应过程,结合相应的软件能够对产品进行分析,计算待测样品模板的初始浓度。荧光定量PCR原理PCR扩增时在参加一对引物的
基线:基线是早期循环的噪点水平,通常在第3和第15循环之间测量,这是因为在此期间还检测不到扩增产物引起的荧光值增加。用于计算基线的循环数量是可以改变的,如果使用高模板量或者靶标基因的表达水平高则循环数量需要减少。设置基线需要查看线性度扩增曲线的荧光数据。设置基线,使得扩增曲线的增长所开始的循环圈数大
所谓实时荧光定量PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,zui后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法.1.在荧光定量PCR技术中,有一个很重要的概念——Ct值.C代表Cycle,t代表threshold,Ct值的含义是:每个反应管内的荧光信号到
实时荧光定量PCR技术于1996年由美国AppliedBiosystems公司推出,由于该技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃,而且与常规PCR相比,它具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点。实时荧光定量PCR实时荧光定量PCR技术于1996年由美国AppliedBi
所谓实时荧光定量PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。在荧光定量PCR技术中,有一个很重要的概念--Ct值。C代表Cycle,t代表threshold,Ct值的含义是:每个反应管内的荧光信号到达设
将标记有荧光素的Taqman探针与模板DNA混合后,完成高温变性,低温复性,适温延伸的热循环,并遵守聚合酶链反应规律,与模板DNA互补配对的Taqman探针被切断,荧光素游离于反应体系中,在特定光激发下发出荧光,随着循环次数的增加,被扩增的目的基因片段呈指数规律增长,通过实时检测与之对应的随扩增
在普通PCR仪的基础上增加一个荧光信号采集系统和计算机分析处理系统,就成了荧光定量PCR仪。其PCR扩增原理和普通PCR仪扩增原理相同,只是PCR扩增时加入的引物是利用同位素、荧光素等进行标记,使用引物和荧光探针同时与模板特异性结合扩增。扩增的结果通过荧光信号采集系统实时采集信号连接输送到计算机