挥发性盐基氮(TVB-N)动物性食品由于酶和细菌的作用,在过程中,使蛋白质分解而产生氨以及胺类等碱性含氮物质。此类物质具有挥发性,其含量越,表明氨基酸被破坏的越多,别是蛋氨酸和酪氨酸,因此营养价值大受影响。
挥发性盐基氮(TVB-N)动物性食品由于酶和细菌的作用,过程中,使蛋白质分解而产生氨以及胺类等碱性含氮物质。此类物质具有挥发性,其含量越,表明氨基酸被破坏的越多,别是蛋氨酸和酪氨酸,因此营养价值大受影响。
挥发性盐基氮(TVB-N)的测定
1.半微量定氮法
(1)原理:蛋白质在酶和细菌的作用下分解后产生碱性含氮物质,有氨、伯胺、仲胺等,此类物质具有挥发性,可在碱性溶液中被蒸馏出来,用标准酸滴定,计算含量。
(2)试剂
①氧化镁混悬液②2%硼酸溶液(吸收液)③0.2%甲基红乙醇液④0.1%亚甲蓝水溶液
临用时将③④等量混合为混合示液⑤0.0100N盐酸标准溶液或0.0100N硫酸标准溶液
(3)仪器
①半微量定氮装置:Markhan氏式②微量滴定管:zui小分度0.01ml
(4)操作方法
①样液的制备:将样品除去脂肪、骨头及筋腱后,切碎搅匀,称取10g于锥形瓶中,加100ml水,不时振摇,浸渍30min后过滤,滤液置于冰箱中备用。
②测定:预将盛有10ml吸收液并加有5-6滴混合示液的锥形瓶置于冷凝管下端,并使其下端插入锥形瓶内吸收的液面下,吸取5ml上述样品滤液于蒸馏器反应室内,加5ml1%氧化镁混悬液,迅速盖塞,并加水以防漏气,通入蒸汽,待蒸汽充满蒸馏器内时即关闭蒸汽出口管,由冷并行管出现*滴冷凝水开始计时,蒸馏5min即停止,吸收液用0.0100N盐酸标准溶液或0.0100N硫酸标准溶液滴定,终点呈蓝紫色。同时做试剂试验。
(5)计算
(V1-V2)×N1×14
X1=-------------------------×100
m1×5/100
式中:X1--样品中挥发性盐基氮的含量,mg/100g
V1--测定用样液消耗盐酸或硫酸标准溶液体积,ml
V2--试剂消耗盐酸或硫酸标准溶液体积,ml
N1--盐酸或硫酸标准溶液的摩尔浓度,mol/L
m1--样量,g
14--1N盐酸或硫酸标准溶液1ml相当氮的毫克数
2.微量扩散法
(1)原理:挥发性含氮物质在碱性溶液中释出,在扩散皿中于37℃时挥发后吸收于吸收液中,用标准酸滴定,计算含量。
①饱和碳酸钾溶液:称取50g碳酸钾,加50ml水,微加热助溶,使用时取上清液。
②水溶性胶:称取10g阿拉伯胶,加10ml水,再加5ml甘油及5g无水碳酸钾(或无水碳酸钠),研匀。
③吸收液:混合示液、0.0100N盐酸或硫酸标准溶液,与半微量定氮法相同。
①扩散皿(标准型):玻璃质,内外室总直径61mm,内室直径35mm;外室深度10mm,内室深度5mm;外室壁存3mm,内室壁存2.5mm,回壁纱厚玻璃盖,如图1-1所示,其他型号亦可用。
②微量滴定管:zui小分度0.01ml。
①将水溶性胶涂于扩散皿的边缘,在皿中央内室加入1ml吸收液及1滴混合示液。在皿外室侧加入1.00ml按半微量定氮法制备的样液,另侧加入1ml饱和碳酸钾溶液,注意勿使两滴接触,立即盖好;密封后将皿于桌面上轻轻转动,使样液与碱液混合。
②将扩散皿置于37℃温箱内放置2h,揭去盖,用0.01N盐酸标准溶液或硫酸标准溶液滴定,终点呈蓝紫色。同时做试剂试验。