1、流动相的选择,有机溶剂必须是色谱级,水必须是超纯水或二次蒸馏水。
2、流动相用0.45μm孔径的滤膜过滤(水和有机相所用的滤膜不同,有机相用
F膜,水相用水膜),超声脱气后置于储液瓶中。
3、根据待检测样品的需要更换合适的色谱柱。
4、样品溶液亦必须用0.45μm的微孔滤膜过滤后才能进样。
二、开关机顺序
1、开机顺序:先打开泵、自动进样器、柱温箱、检测器电源,再打开系统控制器的电源,点击电脑中的Lc-solution工作站联机,连上后能听到两次“嘀”的声音。
2、关机顺序:与开机顺序相反,即先关闭Lc-solution工作站→系统控制器→泵、自动进样器、柱温箱、检测器。
3、待设备自检结束后,打开仪器对输液泵及自动进样器进行必要的Purge操作,排出相应流路中的气泡,使新鲜溶剂在流路中得以置换;检查输液泵在动作前的压力显示值,必要时对此压力值进行调零。
三、LC-solution操作界面的进入及系统的开启
1、双击桌面上Lc-solution图标,选择屏幕左侧“操作”项并单击,在弹出的窗口中双击操作仪器所对应的图标,弹出窗口后输入用户名ID及密码,按“确定”进入仪器实时分析界面。
3、分析方法的保存:选择文件→另存方法文件为→选择保存路径→取名保存文件。该方法即作为当前运行的方法。
4、打开仪器上的排空阀(逆时针方向旋转180°),点击仪器面板上“purge”
按钮开始清洗5个流路3分钟。
5、系统的启动:点击“仪器开/关”键开启系统(此时泵开始工作)
四、进样准备及单次进样分析
1、将样品瓶放入自动进样器中
2、观察基线及柱压,待基线平直(-5~30mv),压力稳定(0.5Mpa)时方可进样。
3、点击助手栏中“单次分析”键,出现采样对话框。在对话框中输入“样品名称”,“样品信息”,“方法文件名”,“数据文件名”,“样品瓶号”,“样品架号”,“进样量”等样品参数。
4、填完后点击“确定”键,仪器开始自动进样操作。
五、批处理分析
1、点击批处理分析图标,点击助手栏中的“向导”。编辑方式为新建或添加,方法文件默认为当前方法,可根据需要选择相应方法。
2、根据提示逐步输入“开始样品编号”、“进样体积”→“样品组数”→标准样品“数据文件路径、名称”、“校正级别数”、“重复进样次数”未知样品的信息。填写后“完成”。
3、保存批处理文件:文件→批处理文件另存为→路径、名称→保存。
4、启动批处理:仪器处于“就绪”状态后点击助手栏中的开始批处理,开始运行。
六、数据文件的查看及定量分析(外标法为例)
1、点击助手栏中的“再解析”键,点击“PDA数据分析”打开数据处理窗口。
4、另存方法文件为→对话框选择“是”→选择保存路径和名称→点击“确定”。
5、关闭当前数据文件并保存。
6、单击左侧助手栏中的“LC数据分析图标”→在数据浏览器中找到要计算的数据文件并“打开”
7、文件→加载方法参数→选择以保存的方法文件,打开→对话框中选择“是”,计算完毕。
七、数据文件中报告预览和打印
1、报告模板的制作:点击Top返回上级引导操作栏,助手栏中点击“再解析”
—“PDA数据分析”—“数据报告”进入报告界面。
2、调入报告格式文件,用鼠标将报告格式文件拖拽到右侧报告栏内即可。
3、报告格式的制定和修改,可以通过点击“样品信息”、“方法信息”、“LC/PDA色谱图”、“LC/PDA校正曲线”、“LC/PDA峰表”“LC/PDA结果”等内容图标,拖拽鼠标到报告中确定位置,即可依次加入相应的统计信息。
4、报告模板保存:文件—另存报告格式文件—Lc-solution路径—文件名—保存。
5、数据的打印:在文件收索器中选择欲打印的数据文件,拖拽至报告模板中,
然后点击助手栏中的打印按钮即可。
九、实验结束
1、实验结束,用甲醇冲洗泵30min(若实验时用酸或缓冲盐做流动相时,先用
纯水先冲洗泵60min,然后用甲醇冲洗泵30min)。
2、点击“仪器开/关”键,停泵,待泵的压力下降到0.5Mpa以下,按关机顺序
关闭仪器电源。
3、清洗工具,打扫实验室,填写《大型精密仪器设备使用记录表》。