2、过敏性紫癫性肾炎模型（简称紫癫肾模型）过敏性紫癫性肾炎是坏死性小血管炎免疫性疾病，特征为皮肤紫癫,出血性胃肠炎以及肾脏损害。该模型对于研究紫癫发生发展过程具有重要的作用。该模型常用含卵白蛋白与弗氏完全佐剂的乳化液对大鼠进行腹腔注射造模。
3、血管认知障碍模型）血管性认知功能障碍(vascular+cognitive+impairment,VCI)是由各种脑血管病导致的从轻度认知障碍到痴呆的一大类综合征。该模型对研究认知障碍具有重要意义。采用手术造成椎动脉永久闭塞及夹闭颈总动脉建立模型。
4、大鼠骨损伤模型构建骨缺损动物模型的制作要从多方面考虑。首先应根据研究经费及实验目的等综合情况选择合适的动物种类和骨缺损的缺损部位；其次根据动物种类的不同，截取不同长度的骨块，以成功制作骨缺损模型。通过在股骨钻孔以及在缺损部位填充材料进行构建模型。
5、慢性阻塞性肺病(COPD)模型慢性阻塞倒市病(COPD)是指以气流受限为特征的疾病，是有害颗粒或有害气体对肺部作用而引起的一种异常炎性反应。该病以气道，尤其是小气道阻塞为主要特征，并引起肺通气功能的下降，气流阻塞进行性发展。使用烟熏以及脂多糖滴注构建模型。
6、动脉粥样硬化模型动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是冠心病、脑梗死、外周血管病的主要原因。脂质代谢障碍为动脉粥样硬化的病变基础，其特点是受累动脉病变从内膜开始，一般先有脂质和复合糖类积聚、出血及血栓形成，进而纤维组织增生及钙质沉着，并有动脉中层的逐渐蜕变和钙化，导致动脉壁增厚变硬、血管腔狭窄。使用球囊损伤腹主动脉以及使用高脂饲料喂养构建模型。
7、术后认知功能障碍(POCD)模型老年人手术后出现中枢神经系统并发症，表现为精神错乱、焦虑、人格的改变以及记忆受损。这种手术后人格、社交能力及认知能力和技巧的变化称为手术后认知功能障碍(POCD),另有认为POCD是表现为手术后记忆力和集中力下降的智力功能的退化。通常使用尾静脉注射抑制剂联合手术切除部分肝脏构建该模型。
9、卵巢癌腹腔转移模型卵巢癌是卵巢肿瘤的一种恶性肿瘤，是指生长在卵巢上的恶性肿瘤,其中90%~95%为卵巢原发性的癌，另外5%~10%为其它部位原发的癌转移到卵巢。该模型对研究卵巢癌的转移具有重要的作用。主要使用卵巢癌细胞株进行腹腔移植构建模型。
10、盲肠结扎法(CLP)构建脓毒症模型脓毒症(sepsis)是指由感染引起的全身炎症反应综合征(systemicinflammatoryresponsesyndrome,SIRS),临床上证实有细菌存在或有高度可疑感染灶。该模型用于研究脓毒症对机体各组织器官的影响具有重要作用。主要采用CLP法进行手术构建模型。
11、胃食管反流动物模型胃食管反流是指胃内容物，包括从十二指肠流入胃的胆盐和胰酶等反流入食管，可分为生理性反流和病理性反流两种。病理性反流是由于食管下括约肌的功能障碍和与其功能有关的组织结构异常，以致下食管括约肌(LES)压力低下而出现的反流，引起一系列临床症状和并发症，即为胃食管反流病。胃食管反流病是由多种因素造成的消化道动力障碍性疾病，是抗反流防御机制下降和反流物对食管黏膜的攻击作用的结果。动物模型研究对阐述此病的发病机制有非常大的帮助，通过胃食管测压、食管pH监测、胃肠激素测定等扌佥则手段，系统研究胃食管反流形成的主要因素，病理生理、病理解剖演变及胃食管反流的可逆性，为胃食管反流的防治提供了有价值的理论。
12、大小鼠脑立体定位注射
在脑部动物实验模型中，为了将药物送至目的脑区的相应位置，达到药物治疗或损毁的目的，需要使用脑立体定位技术,我们根据研究目的和大小鼠的种类、体重，分别选择相对应的脑立体定位图谱，确定目标核团的坐标，并以此坐标进行注射给药。正式实验前还需进行荧光或有色染料预实验以验证定位是否准确。常用于帕金森动物模型、阿尔茨海默症动物模型等的制备。
13、癫痫动物模型参照大鼠脑立体定向解剖图谱，通过脑立体定位仪确定动物脑部的目标核团，按照已知坐标对其进行埋入刺激电极并固定，测定放电阈值后，进行一定周期的电点燃实验，通过脑电图和大鼠癫痫发作行为学分级判定模型制备成功。
14、肌少症动物模型
肌少症是影响老年人群健康的重要因素，建立肌少症动物模型是开展各项研究的保障，目前肌少症模型方案主要有药物注射法、物理关节固定、加速衰老动物(SAMP6、SAMP8)和手术法，药物注射法对大小鼠给与地塞米松或肉毒毒素，给药一定周期后肌肉质量降低和功能减弱。物理关节固定包括后肢悬吊和关节固定法两种，都是通过减少活动量来造成肌肉的萎缩和衰减，关于这两种造模方法的研究报道仍较少。加速衰老动物SAMP8小鼠是建立肌少症的理想模型。手术法通过摘除雌性大鼠卵巢来造成雌激素缺乏引起骨质疏松，造成骨骼肌的代谢异常来引起肌肉质量和功能的减退，通过检测抓力和腓肠肌的质量来判定造模成功。
15、脊髓缺血再灌注损伤(spinalcordischemiareperfusioninjury,SCII)在脊柱外科疾病中，脊髓损伤是最为常见的严重疾病之一，脊髓缺血再灌注损伤是导致脊髓功能不可逆损伤的一个主要因素，可导致脊髓功能长期的不可逆性损害，临床表现为急性或迟发性的肢体瘫痪,或可导致死亡。结常用的SCI造模方法主要包括夹闭法、栓塞法、电凝灼闭法等。夹闭法是脊髓缺血再灌注动物造模最常用的一种方法，选择夹闭的血管也比较多，主要包括夹闭腹主动脉、腰动脉、胸主动脉及脊髓背侧中央静脉等。造模通过后肢行为学BBB运动评分和组织病理学检测来判定造模成功。
——细胞实验
Transwell侵袭实验Transwell侵袭实验采用的Matrigel是从小鼠EHS肉瘤中提取的基质成分，模拟体内肿瘤细胞穿过基质胶的过程。具有侵袭能力的细胞在趋化剂如血清诱导下可穿过多孔滤膜，侵袭细胞经染色后,在显微镜下观察和计数。可反映细胞的侵袭能力。
慢病毒、质粒转染目的基因带有荧光蛋白基因,转入到细胞后细胞可合成荧光蛋白，可在荧光显微镜下观察到，观察荧光细胞数目可间接反映转染效率。
吖啶橙染色吖啶橙是最经典的极灵敏的荧光染料，它可对细胞中的DNA和RNA同时染色而显示不同颜色的荧光。其激发峰为492nm,荧光发射峰530nm(DNA)、640(RNA),它与双链DNA的结合方式是嵌入双链之间，而与单链DNA和RNA则由静电吸引堆积在其磷酸根上。在蓝光(502nm)激发下，细胞核发亮绿色荧光(约530nm),核仁和胞质RNA发橘红色荧光(>580nm)。吖啶橙的阳离子也可以结合在蛋白质、多糖和膜上而发荧光，但细胞固定阻抑了这种结合，从而主要显示DNA、RNA两种核酸的荧光。
细胞划痕
当细胞长到融合成单层状态时，在融合的单层细胞上人为用枪头或硬物制造一个空白区域,称为"划痕"，划痕边缘的细胞会逐渐进入空白区域使"划痕"愈合，在一定程度上模拟了体内细胞迁移的过程，根据细胞生长至中央划痕区的程度，以此判断细胞的生长迁移能力。
原代细胞培养从人/小鼠等特异模式动物的细胞从机体中取出，分离出的细胞，此时的细胞保持原有细胞的基本性质，如果是正常细胞，仍然保留二倍体数。但实际上，通常把第一代至第十代以内的培养细胞统称为原代细胞培养。最常用的原代培养有组织块培养和分散细胞培养。
流式细胞术流式细胞术(FlowCytometry是一种在功能水平上对单细胞或其他生物粒子进行定量分析和分选的检测手段，具有速度快、精度高、准确性好等优点，成为当代最先进的细胞定量分析技术。流式细胞术可检测细胞的膜电位、膜通透性、细胞内粒子浓度、细胞周期、细胞表面蛋白表达、细胞凋亡、细胞分选等多项内容。
Matrigel管腔形成血管生长过程是肿瘤形成的关键步骤。无论原发性肿瘤还是继发性肿瘤，一旦生长直径超过1-2mm,都会有血管生成,这是由于肿瘤细胞自身可分泌多种生长因子，诱导血管生成。多数恶倒中瘤的血管生成密集且生长迅速，因此，血管生成在肿瘤的发展转移过程中起到重要作用，体外的Matrigel胶管腔形成实验能很好的模拟肿瘤的血管生长过程，并且可以探寻药物对这一过程的影响。
油红O染色油红O属于偶氮染料，是很强的脂溶剂和染脂剂，与甘油三酯结合呈小脂滴状。脂溶性染料能溶于组织和细胞中的脂类，它在旨类中的溶解度比在溶剂中大。当组织切片或细胞置染液时，染料溶于组织内的脂质(如脂滴)中，使组织内的脂滴呈橘红色。
——分子及蛋白检测
实时荧光定量PCR实时荧光定量PCR(Real-timeQuantitativePCRDetectingSystem)技术是指在PCR反应体系中加入可与DNA产物特异性结合的荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最终通过相对定量或绝对定量的方法确定各个样本的本底表达量。PCR检测常用的两种方法：染料法和TaqMan探针法。
样本收集及保存条件：(1)新鲜组织:收集0.1g新鲜组织，然后加入1ml的Trizol,放入液氮速源转入-80°C冰箱，之后液氮或者干冰运输至公司送检.(2)细胞样本：应将培养基吸出弃掉，用PBS洗涤两次后，吸奔PBS。然后培养瓶底面积每20cm2加1mlTRIzol,细胞刮板挂或吹打使细胞脱落，吹至拉丝状，再放入液氮速冻后转入-80℃冰箱，之后液氮或者干冰运输至公司送检.(3)全血：大于等于2ml全血加入EDTA或肝素抗凝，4h内进行淋巴细胞分离，再放入液氮速冻后转入-80℃冰箱，之后液氮或者干冰运输至公司送检.(4)体液：12000rpm/min离心10-20min,取沉淀，再放入液氮速冻后转入-80°C冰箱，之后液氮或者干冰运输至公司送检.RNA甲基化
RNA甲基化(Methylation)指发生在RNA分子上不同位置的甲基化修饰现象,常见的RNA转录后修饰方式有6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m6A)和5-甲基胞嘧啶(C5-methylcytidine,m5C)。研究发现m6A修饰在调控基因表达、剪接、RNA编辑、RNA稳定性、控制mRNA寿命和降解、介导环状RNA翻译等方面扮演重要角色。
甲基化测序技术原理，MeRIP-seq测序文库制备过程首先从样本细胞组织中分离出RNA,常采用Poly（T）寡核苷酸提取出带Poly（A）的RNA去除rRNA。然后将提取出的RNA随机打断。需要对一个对照样本（Control）进行测序,对甲基化修饰样本进行测序。首先将打断的RNA片段分成两份，一份用于制备Control样本的cDNA文库，另T分采用抗m6A抗体与被打断的RNA进行孵育，抓取带有m6A修饰的片段,用于制备甲基化修饰样本的cDNA文库。
WesternBlot实验蛋白质印迹法（免疫印迹实验）即WesternBlot,它是分子生物学、生物化学和免疫谓传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。
样本收集及保存条件：(1）新鲜组织:收集0.1g新鲜组织，可加入蛋白裂解液后（可直接放入液氮速冻），放入液氮速冻后转入-80°c冰箱，之后液氮或者干冰运输至公司送检。(2）细胞样本：应将培养基吸出弃掉，用PBS洗涤两次后,吸弃PBS.贴壁细胞应加入胰酶消化液（部分细胞需特殊处理，可联系本公司），之后1500rpm离心3min,弃去上清；反复3次，弃去上清.再放入液氮速冻后转入-80°冰箱，之后液氮或者干冰运输至公司送检.悬浮细胞应将细胞及培养液一起收集到15ml或者50ml离心管中，1500rpm离心3min,弃去上清；加入PBS轻轻吹打，1500rpm离心3min,弃去上清,再放入液氮速冻后转入-80C冰箱,之后液氮或者干冰运输至公司送检.
免疫组化（IHC）
免疫组化（IHC染色）抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素、酶、金属离子、同位素）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位、定性及相对定量。
样本收集及保存条件：根据客户后续观察目的取材，常温置于固定液内保存及运输（需注意固定液的量最好是组织的10倍以上，样本需完全浸泡于固定液内并防止样本贴壁固定不良，大标本最好使用大的标本瓶/袋运输,建议在大标本上按取材包埋要求做多条平行切口，以防标本中心固定不透彻。运输过程中防止固定液渗漏）。免疫荧光（IF）免疫荧光（IF）免疫学的基本反应是抗原-抗体反应。由于抗原抗体反应具有高度的特异性，所以当抗原抗体发生反应时，只要知道其中的一个因素，就可以查出另一个因素。免疫荧光技术就是将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体（或抗原）上，与其相应的抗原（或抗体）结合后，在荧光显微镜下呈现一种特异性荧光反应。
样本收集及保存条件：冰冻切片：将样本放入液氮速冻，后将样本采用液氮或者干冰运输至公司送检。TRAP染色抗酒石酸酸性磷酸酶染色法(TartrateResistantAcidPhosphatase,TRAP),Trap染色是用于检测骨组织、骨细胞中特征物质的染色，使破骨细胞呈红色，背景呈绿色或蓝色。实验原理：抗酒石酸酸性磷酸酶染色液以蔡酚AS-BI为底物，在酸性pH下被酸性磷酸酶水解释放出磷酸和蔡酚，萘酚与重氮盐偶联生成有色产物，定位于细胞质中，若细胞内的ACP有抗酒石酸的活性，则呈阳性反应。
免疫共沉淀(Co-IP)免疫共沉淀是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法，是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。其原理是：当细胞在非变性条件下被裂解时，完整细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质间的相互作用被保留了下来。如果用蛋白质X的抗体免疫沉淀X,那么与X在体内结合的蛋白质Y也能沉淀下来。目前多用精制的proreinA预先结合固化在argarose的beads上，使之与含有抗原的溶液及抗体反应后，beads上的proreinA就能吸附抗原达到精制的目的。这种方法常用于测定两种目标蛋白质是否在体内结合；也可用于确定一种特定蛋白质的新的作用搭档。
RNA结合蛋白免疫沉淀RIP(RNAImmunoprecipitation,RNA结合蛋白免疫沉淀)是研究细胞内RNA与蛋白结合情况的技术，是了解转录后调控网络的有力工具。这种技术运用针对目标蛋白的抗体把相应的RNA-蛋白复合物沉淀下来，然后经过分离纯化就可以对结合在复合物上的RNA进行分析。RIP-Seq将RIP技术与高通量测序相结合，能够高通量地检测与特定蛋白结合的RNA,从而解析全转录组范围内的目标蛋白-RNA相互作用网络。
RNAPullDownRNAPullDown技术是用体外转录法标记生物素RNA探针，然后与胞浆蛋白提取液孵育,形成RNA-蛋白质复合物。该复合物可与链霉亲和素标记的磁珠结合，从而与孵育液中的其他成分分离。复合物洗脱后，通过WesternBlot检测特定的RNA结合蛋白是否与RNA相互作用,质谱实验检测特定的RNA结合蛋白鉴定蛋白质类型。
质粒表达载体构建质粒表达载体构建就是重组DNA分子，是在DNA连接酶的作用下，有Mg2+、ATP存在的连接缓冲系统中，将分别经酶切的载体分子与外源DNA分子进行连接。总之，质粒作用是将一段属于或者不属于这个物种的基因片段引入细胞/个体环境中。并进行后续研究。质粒构建种类包括siRNA、minics.inhibitor.基因过表达质粒构建。
样本收集及保存条件：
构建完成菌液应保存于-80°c冻存.
病毒表达载体构建病毒表达载体构建分为：慢病毒、腺病毒。病毒表达载体包含了包装、转染、稳定整合所需要的遗传信息。对于一些较难转染的细胞，如原代细胞、干细胞、不分化的细胞等，能大大提高目的基因转导效率，而且目的基因整合到宿主细胞基因组的几率大大增加。
建完成病毒应保存于-80°c冻存.
甲基化特异性PCR
甲基化特异性PCR(methylation-specificPCR,MS-PCR)是一种特异位点甲基化检测技术，使用亚硫酸氢钠处理基因组DNA，未甲基化的胞嘧啶变成嘧啶，而甲基化的胞嘧啶不变。因此从理论上讲，用不同的引物做PCR,即可检测出这种差异,从而确定基因有无CpG岛甲基化。根据目的基因修饰前后的改变，就可以相应设计M和U引物，有时我们需要设计两轮引物。扩增产物用DNA琼脂糖凝胶电泳，凝胶扫描观察分析结果。
——生化检测
1、普通生化指标
2、ROS含量检测
改良番红O-固绿染色法
样本收集及保存条件：根据客户后续观察目的取材，常温置于固定液内保存及运输（需注意固定液的量最好是组织的10倍以上，样本需完全浸泡于固定液内并防止样本贴壁固定不良，大标本最好使用大的标本瓶/袋运输，建议在大标本上按取材包埋要求做多条平行切口，以防标本中心固定不透彻.运输过程中防止固定液渗漏）。尼氏染色尼氏染色法是德国病理学家F.Nissl（1860-1919）于1892年创立的。是通过碱性染料染色，发现神经元胞体中的尼氏体。在尼氏染色中尼氏体清晰可辨，胞核、核仁也非常清晰，而且很容易区分轴突和树突，收到了既可辨认器官又可同时观察细胞质特殊结构的效果。尼氏染色中尼氏体受染后呈块状（形如虎斑）或颗粒状.核周围尼氏体颗粒较大，近边缘处较小而细长，如在生理情况下，尼氏体大而数量多，反映神经细胞合成蛋白质的功能较强，在神经元受损时，尼氏体的数量可减少甚至消失。
样本收集及保存条件：冰冻切片：将样本放入液氮速冻，后将样本采用液氮或者干冰运输至公司送检。茜素红染色茜素红S(AlizarinRedS)钙染色法是一种旨在通过鳌和技术，使钙离子和茜素红S产生复合物，来分析固定处理的细胞样本中橘红色钙沉积现象的权威而经典的技术方法。主要适用于动物原生代或培养细胞的钙沉积和钙化结节检测。广泛用于骨细胞或组织病理生理的研究。产品为即用型，操作简捷，性能稳定,显色清晰。茜素红S属一种蒽醌(Anthraquinone)类的彳姓物,是茜素磺酸钠盐，它能与钙盐以鳌和方式形成复合物，用以识别组织细胞的钙盐成分。钙盐变化是骨细胞增殖分化和骨组织成骨潜能的标志之一。通过茜红素染色，产生橘红色沉积。
Masson染色Masson三色染色又称马松染色，是结缔组织染色中最经典的一种方法，是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。Masson染色后肌纤维呈红色，胶原纤维呈绿色或蓝色，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
自噬小体观察细胞自噬是一个基于溶酶体的胞内降解过程。当细胞处于饥饿状态或各种应激条件下，细胞自噬将被激活，胞内组分被自噬小体运输到溶酶体进行降解，从而提供特殊环境下细胞生存所需要的营养和能量。
染色体核型染色体核型分析是以分裂中期染色体为研究对象，根据染色体的长度、着丝点位置、长短臀比例、随体的有无等特征，并借助显带技术对染色体进行分析、比较、排序和编号，根据染色体结构和数目的变异情况来进行诊断。核型分析可以为细胞遗传分类、物种间亲缘的关系以及染色体数目和结构变异的研究提供重要依据。
——测序分析组学类检测
样本收集及保存条件：(1)细胞：细胞预处理后，将装有细胞沉淀的离心管迅速扣紧盖子，迅速放入液氮中速冻(≥10min),然后转移至-80°C保存，干冰低温寄送，避免反复冻融。(2)组织：样本放入液氮中冷却样本15min,用准备好的铝箔或冷冻保存管装载包裹组织,迅速投入液氮或转入-80°C冰箱保存,干冰低温寄送，避免反复冻融。(3)粪便、肠道内容物：收集到新鲜粪便或肠道内容物样本后，添加一滴质量体积比为1/100(w/v)的叠氮化钠，分装样本200mg/管，然后立即用液氮速冻处理15min，保存至-80°C冰箱,足量干冰低温运送。(4)尿液：晨起中段尿(临床)或晨间1小时尿(动物)直接分装到离心管中，每管1ml,添加质量体积为0.5/1000(w/v)的警氮化钠，-80℃冻存寄送。
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