乳酸菌发酵原液，主要由植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌等乳酸菌混合培养而成，有效微生物20亿/mL，阴凉避光处保存，保质期12个月。
1.1.2试剂盒
禽流感H9N1抗体(AIV-H9N1Ab)检测试剂盒、鸡新城疫抗体(NDVAh)检测试剂盒购自上海劲马科技生物有限公司；超氧化物歧化酶（SOD）测试盒(WST-1法)、丙二醛(MDA)测定试剂盒(TBA法)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总抗氧化能力(T-AOC)测试盒购自南京建成生物工程研究所。
1.1.3仪器设备
MK3酶标仪；UV-2600i紫外可见光分光光度计。
1.2试验动物与处理
选取288只37周龄健康的海兰蛋鸡，随机分为4组，每组设6个重复，每重复12羽蛋鸡。第1组为对照组，饲喂基础日粮(表1)；第2、3、4组为试验组，分别饲喂含5%乳酸菌发酵饲料+95%基础日粮、10%乳酸菌发酵饲料+90%基础日粮和15%乳酸菌发酵饲料+85%基础日粮的混合日粮。预试期7天，试验期60天。
注:复合预混料为每千克日粮提供铜8.00mg，铁60.00mg，锰60.60mg，锌80.00mg，硒030mg，碘0.48mg，维生索A8000IU，维生索D32000IU，维生索E40，维生索K33.45mg，维生索B10.8mg，维生索B23.7Smg，泛酸5.40mg，烟酸20.00mg，叶酸0.45mg，生物索0.10mg。
1.3饲养管理
试验鸡自由采食和饮水。每天光照16小时，采用人工光照和自然光照相结合。采用蛋鸡常规饲养管理和常规免疫。
1.4乳酸菌发酵饲料的制作
将基础日粮与乳酸菌发酵液按照一定比例混合均匀，压实，装人发酵袋内、密封，在环境温度为20℃的条件下厌氧发酵15天。开袋后有乳酸香味即可使用。
1.5检测指标与方法
1.5.1血液抗氧化指标及免疫抗体检测试验至30、60天，每重复随机抽取1只鸡，每组6只鸡，翅静脉采血5mL，肝素抗凝，3000r/min离心10min后收集血浆，分装，-20℃冷冻保存，备用。
用酶联免疫吸附法测定蛋鸡血浆AIV-H9N1Ab、NDVAb。比色法测定血浆SOD活性、MDA、GSH-Px、T-AOC含量。
1.5.2脏器指数的测定
试验至60天，每重复随机抽取1只鸡，每组6只鸡，然后将鸡宰杀取其肝脏、心脏、脾脏，分别称重，计算脏器指数。
脏器指数=脏器重(g)/体重(kg)。
1.5.3肠壁厚度测定试验至60天，每重复随机抽取1只鸡，分别从U字型十二直肠的底部和空肠中央部截取相同长度的十二直肠和空肠，分别用游标卡尺测量其厚度。
1.6数据处理与统计分析
试验数据采用SAS9.20软件进行单因素方差分析，用Duncan氏法进行多重比较。试验结果用“平均值士标准差”表示。
结果
2.1乳酸菌发酵饲料对蛋鸡血桨抗氧化能力的影响
试验至30天，第4组蛋鸡血浆T-AOC显著高于对照组，SOD活性极显著高于对照组及第2组(P<0.01)；MDA的含量极显著低于对照组(P<0.01)。第3、4组GSH-Px含量显著高于对照组(P<0.01)。
试验至60天，第4组蛋鸡血浆T-AOC显著高于对照组和第2组(P<0.05)，第4组蛋鸡血浆SOD活性极显著高于对照(P<0.01)，第2、3组蛋鸡血浆SOD活性显著高于对照组(P<0.05)，试验组蛋鸡血浆MDA的含量极显著低于对照组(P<0.01)，第4组显著低于第2组(P<0.05)。第3、4组GSH-Px含量显著高于对照组(P<0.05)(表2)。
差异极显著(P<0.01)；下同。
2.2乳酸菌发酵饲料对蛋鸡血桨AIV-H9N1及NDV杭体水平的影响
试验至30天，第2、4组蛋鸡血浆AIV-H9N1抗体水平极显著高于对照组及第3组(P<0.01)；试验至60d，第2、3组蛋鸡血浆AIV-H9N1抗体水平极显著高于对照组(P<0.01)。
试验至30天，第2~4组蛋鸡血浆NDV抗体水平极显著高于对照组，第4组极显著高于第2、3组(P<0.01)；试验至60天，第2、3组蛋鸡血浆NDV抗体水平极显著高于对照组(P<0.01)，第4组显著高于对照组(P<0.05)(表3)。
2.3乳酸菌发酵饲料对蛋鸡脏器指数的影响
由表4可见，第2、4组蛋鸡的心脏指数显著高于对照组及第3组(P<0.05)；试验组的肝脏指数显著高于对照组(P<0.05)；第4组的脾脏指数显著高于对照组及第2组(P<0.05)。
2.4乳酸菌发酵饲料对蛋鸡十二指肠和空肠厚度的影响
试验至60天，第2~4组蛋鸡十二指肠弯曲部厚度和空肠中央部厚度与对照组差异不显著，(P>0.05)(表5)。
讨论
3.1乳酸菌发酵饲料对蛋鸡杭氧化能力的影响
3.2乳酸菌发酵饲料对蛋鸡禽流感和新城疫免疫杭体水平的影响
将植物乳杆菌或嗜酸乳杆菌添加饮水或饲料中，可提高家禽的免疫功能。报道，给肉鸡的饮水中加人植物乳杆菌可显著提高肉鸡血液IgG和新城疫免疫抗体水平。报道，给肉鸡的饮水中加人植物乳杆菌可显著提高肉鸡血液IgA水平。在饲料中添加植物乳杆菌，提高了肉鸡血液IgA、IgG、IFN-y、IL-2和IL-6水平。给雏鸡灌服植物乳杆菌液，可显著提高雏鸡血液中新城疫免疫抗体效价。用嗜酸乳杆菌培养液给雏鸡饮水，显著提高了血清IgG和新城疫疫苗免疫抗体水平。给肉鸡饲喂添加植物乳杆菌L-137的饲料，显著提高了肉鸡脾脏IL-12β、IFN-β和IFN-y的基因表达水平。本试验结果表明，在蛋鸡日粮中饲喂乳酸菌发酵饲料均能提高禽流感H9N1抗体水平，试验至30天，第2、4组极显著高于对照组，试验至60天，试验组极显著或显著高于对照组。在整个试验期内试验组新城疫抗体水平极显著或极显著高于对照组。可见，给蛋鸡饲喂植物乳杆菌和嗜酸乳杆菌发酵饲料可提高蛋鸡疫苗免疫抗体水平，提高蛋鸡的抗病力，值得推广应用。
3.3乳酸菌发酵饲料对蛋鸡脏器指数的影响
本试验发现，用5%~15%乳酸菌发酵饲料替换基础日粮，蛋鸡肝脏指数显著低于基础日粮组，与已有报道不一致。在饲料中添加植物乳杆菌，对肉鸡肝脏指数没有显著影响。报道，在育成期蛋鸡饲料中添加1.0x108CFU/g约氏乳杆菌，对肝脏指数没有显著的影响。可能与本试验用乳酸菌发酵饲料替换基础日粮，导致试验组饲料能量水平低于对照组有关。也可能与植物乳杆菌或嗜酸乳杆菌及其代谢产物影响了肝脏脂肪代谢有关。给大鼠灌胃1.05x109、2.10x109、4.20x109cfu/(kg·d)的乳酸菌悬液，其肝脏TG显著低于肥胖组大鼠(阳性对照)，高剂量组大鼠的肝体比显著降低。关于乳酸菌影响动物脂肪代谢的菌株筛选、有效剂量、作用机制有待进一步研究。
结论
蛋鸡饲粮中添加植物乳杆菌和嗜酸乳杆菌发酵饲料，可提高蛋鸡抗氧化能力和免疫功能，以添加15%最佳。
本产品所用的EM复合有益微生物菌种是经过提纯复壮高浓度菌种，配以针对性的复合菌种专业培养基，能够生产出高浓度约50公斤的EM活菌原液，每公斤成本几毛钱。
【原料组成】酵母菌、芽孢杆菌、乳酸菌等，葡萄糖与载体等。
【产品成分分析保证值】酵母菌、芽孢杆菌、乳酸菌复合益生菌合计≥200亿cfu/g，水分＜9.0%。净含量200g/包。
EM菌是一种多功能的复合益生菌，目前几乎在世界上的所有国家进行推广使用，可广泛应用于水产畜牧业、环保、种植业等领域。主要作用简单介绍如下：
1.在种植上制作生物防虫液,防治虫害还能促长，减少种植蔬果的细菌与真菌病害；
2.生物菌肥制作，生产自然的有机果蔬产品；
3.改善环境卫生，下水道、臭水池、垃圾发酵、厕所除臭等环保领域使用量大。除异臭臭味，净水质，清洁空气，改善环境；
4.提高鱼虾禽畜的健康水平，净化水质控制有害病菌，节省药物开支；
5.养殖上能够降低料耗提高肉料比，节省饲料降低养殖成本；
6.发酵分解饲料中的有机物，提供适口性与提高高效代谢营养组分；
7.排毒清肠，提高肉、蛋、奶等产品品质，提升经济效益；
8.发酵饲料，各种饲料、农产品加工下脚料、食品加工糟渣通过发酵后变成优质饲料降低饲料成本。
【操作方法】
【使用方法】
生产完成的EM活菌使用方法、效果与大部分市场上销售的EM菌类产品基本上无明显差异，但由于自制的EM菌液成本低、活性高，不需要再用红糖激活等即可直接使用，方便且成本低，因此可以适当提高使用量能够达到更好的效果。
1.动物饮水或拌料：按照每吨饮水或饲料中添加1公斤以上的使用量添加，最高使用量不超过5公斤。
2.鱼塘泼洒：每亩使用约5公斤（选择不下雨的晴天使用，使用后注意增氧）；小水体养殖龟鳖、蛙类等水产动物，根据情况每2-7天泼洒一次，每100平方米面积使用0.5-1公斤。
3.制作发酵饲料或青贮饲料：根据不同物料每吨使用5-10公斤，制作时添加10%的玉米粉或其它能量饲料一起发酵效果更好（制作青贮饲料不需要添加）。
4.环境除臭、下水道异味、养殖场（栏舍内与粪污堆放处）、粪水池、厕所等，稀释30倍喷洒，喷洒到动物身体上、人体上无害。
5.制作有机肥：每吨堆肥中运用5公斤以上，水肥制作每吨添加2公斤以上。
6.浇灌农作物时每吨水中添加1公斤能够促进植物的健康水平；喷洒植物叶面每100公斤水中添加2公斤能够促进作物的光合作用和健康水平（可以与叶面肥一起使用）。
广西助农畜牧科技有限公司有7个专业现代生态养殖技术实战型团队，为全国养殖场进行非洲猪瘟防控技术、现代循环生态养殖场的规划、设计、建设、整改等服务；养殖场环保问题低成本解决方案（养殖场恶臭、氨气，苍蝇、污水、粪污资源化、病死动物无害化处理）与专业配套产品。帮助政府部门完成现代生态养殖、粪污资源化、病死动物无害化处理、粮改饲、秸秆综合利用、牧草产业等达标工作、培训工作（免费且有专业资料等），针对您当地制定专业方案，做出示范样板后确定效果再进行推广。
广西助农公司有着20余年的生物发酵饲料经验，能够针对你的养殖场做出最适合的模式，我们的发酵技术不仅设施投资简单（仅需塑料袋或塑料容器等即可），且发酵成功率很高。最关键是制作出来的发酵饲料品质比一般更好（得益于先进的酶菌结合发酵剂与经验总结），能够为你生产出低成本、养殖环保无抗优质的动物产品出来，大量成功案例可以验证。提供上门服务（快速解决家禽养殖上的疾病、环保、肉品质等问题）。