本发明属于复苏液制备方法领域,具体涉及一种应用于宠物失血休克急救的复苏液及其制备方法。
背景技术:
输血是补充动物血液或某一成分的一种安全有效的挽救生命疗法。成年犬的血液有80~90ml/kg,猫的血液有80~90ml/kg,当撞伤或手术发生急性失血达全血量1/5时,可出现血压降低,心跳加快。当失血达1/3时,将危机生命,此时及时输血是挽救生命的最有效方法。输血不仅能补充血容量,而且增多的红细胞能增加携氧量,改善心肌和脑的机能。目前国际上比较公认的是,和人类相似,猫的血型有A型、B型及AB型三种血型。狗不但有血型,而且可分为7种,分别是CEA-1(A)-CEA-8(G)共8个因子。其中A因子的抗原性最强,是临诊输血时主要考虑的因子,否则会导致受血狗体内的红细胞大量溶血,迅速休克。临床上对宠物输血不仅需要交叉配血试验,而且兽医人员必须掌握适应症和禁忌症,对于供血宠物进行严格筛选和采血,同时对于输血量和速度都有严格要求,如狗一次最大输血量为其全血量的10%~20%。输血速度,急性大出血时,可按100毫升血用5~6分钟输入的速度,除此外,以缓慢输入为宜。同时存在着发热、过敏、溶血、循环负荷过重、低钙血症以及血凝病等不良反应。
国外一般是由动物福利保护机构来建血库,美国、澳大利亚等发达国家已有动物血库,是以中央血库的形式建立。在我国尚未出现类似血库,由宠物医院建立血库暂时不太现实,配型和检测都需要进口设备,成本太高。血液的保存也是一大难题,同时建立大型动物血库则需要找到长期可靠的血源,还涉及饲养供血动物、检疫、善终等多个环节,所以暂时无法实现。
因此制备一种能够供应能长期保留、随时运用的急救复苏液供宠物运用,无需查看血型是不是匹配,也没有感染病毒的危险,并且成本低廉,可以解决宠物输血急救的难题。
俄罗斯麦德佰欧法姆有限公司的申请专利中基于戊二醛聚合血红蛋白的血液代用品(CN102026654A),但组分单一,仅单一供氧,对于扩充血容量作用较少。
技术实现要素:
本发明的目的是为了解决现有的血液代用品组分单一,仅单一供氧,对于扩充血容量作用较少的问题,而提供一种应用于宠物失血休克急救的复苏液及其制备方法。
本发明首先提供一种应用于宠物失血休克急救的复苏液的制备方法,该方法包括:
步骤一:将牛血红蛋白溶液和戊二醛溶液反应,离心,得到戊二醛交联后的血红蛋白粒子;
步骤二:将步骤一得到的戊二醛交联后的血红蛋白粒子与注射液混合,得到应用于宠物失血休克急救的复苏液;
所述的注射液为HES、HES2000或生理盐水。
优选的是,所述的牛血红蛋白溶液的浓度为1-40mg/ml。
优选的是,所述的戊二醛溶液的浓度为0.025-0.25%。
优选的是,所述的牛血红蛋白溶液和戊二醛溶液的摩尔比为(1-10):1。
优选的是,所述的戊二醛交联后的血红蛋白粒子与注射液的质量比为1:1-1:10。
本发明还提供上述制备方法得到的应用于宠物失血休克急救的复苏液。
本发明的有益效果
本发明首先提供一种应用于宠物失血休克急救的复苏液的制备方法,该方法先将牛血红蛋白溶液和戊二醛溶液反应,离心,得到戊二醛交联后的血红蛋白粒子;然后将得到的戊二醛交联后的血红蛋白粒子与注射液混合,得到应用于宠物失血休克急救的复苏液;所述的注射液为HES、HES2000或生理盐水。本发明的制备方法简单、原料易得,制备得到的复苏液能够在体内可逆地结合和释放氧并且同时扩充血容量。
附图说明
图1为本发明实施例1复苏液的气体转换能力图;
图2为本发明实施例1复苏液和代血浆对失血性休克大鼠模型复苏效果图;
图3为本发明实施例1复苏液和代血浆对失血性休克大鼠模型复苏生存曲线图。
具体实施方式
按照本发明,先分别制备牛血红蛋白溶液和戊二醛溶液,所述的牛血红蛋白溶液的浓度优选为1-40mg/ml;所述的戊二醛溶液的浓度优选为0.025-0.25%。
按照本发明,将上述配制好的牛血红蛋白溶液和戊二醛溶液混合,进行反应,将反应物进行离心,得到戊二醛交联后的血红蛋白粒子;
按照本发明,将戊二醛交联后的血红蛋白粒子与注射液混合,将配制后的溶液在一氧化碳保护下进行脱氧态转换,转换后进行过滤除菌消毒,常温真空条件下保存,得到应用于宠物失血休克急救的复苏液;
所述的注射液为HES(羟乙基淀粉氯化钠注射液)、HES2000(羟乙基淀粉氯化钠2000注射液)或生理盐水。所述的戊二醛交联后的血红蛋白粒子与注射液的质量比优选为1:(1-10),更优选为1:4。
下面结合具体实施例对本发明做进一步详细的描述,实施例中涉及到原料均采用商购获得。
实施例1
将牛血红蛋白溶液(浓度为30mg/ml)和戊二醛溶液(浓度为0.01%)按照摩尔比4:1混合,在室温下进行反应12h,将反应物进行在2000rpm离心10min,得到戊二醛交联后的血红蛋白粒子;
将戊二醛交联后的血红蛋白粒子与HES按照质量比1:4混合,将配制后的溶液在一氧化碳保护下进行脱氧态转换,转换后进行过滤除菌消毒,常温真空条件下保存,得到应用于宠物失血休克急救的复苏液。
图1为本发明实施例1复苏液的气体转换能力图,从图1可以看出,该复苏液能够携带氧气和释放氧气,具备氧气的结合和释放能力。
实施例2
将戊二醛交联后的血红蛋白粒子与HES2000按照质量比1:4混合,将配制后的溶液在一氧化碳保护下进行脱氧态转换,转换后进行过滤除菌消毒,常温真空条件下保存,得到应用于宠物失血休克急救的复苏液。
对休克大鼠进行实施例2制备的复苏液,输入本发明的复苏液后,平均动脉压(MP)在放血降至极值,随液体灌输血量恢复,血压有所升高,65%的大鼠存活超过2h,说明本发明的复苏液可以有效复苏休克大鼠。
实施例3
将戊二醛交联后的血红蛋白粒子与生理盐水按照质量比1:4混合,将配制后的溶液在一氧化碳保护下进行脱氧态转换,转换后进行过滤除菌消毒,常温真空条件下保存,得到应用于宠物失血休克急救的复苏液。
对休克大鼠进行实施例3制备的复苏液,输入本发明的复苏液后,平均动脉压(MP)在放血降至极值,随液体灌输血量恢复,血压有所升高,50%的大鼠存活超过1h,说明本发明的复苏液可以有效复苏休克大鼠。
实施例4
将牛血红蛋白溶液(浓度为30mg/ml)和戊二醛溶液(浓度为0.01%)按照摩尔比1:1混合,在室温下进行反应8h,将反应物进行在2000rpm离心5min,得到戊二醛交联后的血红蛋白粒子;
将戊二醛交联后的血红蛋白粒子与HES按照质量比1:1混合,将配制后的溶液在一氧化碳保护下进行脱氧态转换,转换后进行过滤除菌消毒,常温真空条件下保存,得到应用于宠物失血休克急救的复苏液。
对休克大鼠进行实施例4制备的复苏液,输入本发明的复苏液后,平均动脉压(MP)在放血降至极值,随液体灌输血量恢复,血压有所升高,60%的大鼠存活超过1h,说明本发明的复苏液可以有效复苏休克大鼠。
实施例5
将牛血红蛋白溶液(浓度为30mg/ml)和戊二醛溶液(浓度为0.01%)按照摩尔比10:1混合,在室温下进行反应14h,将反应物进行在2000rpm离心15min,得到戊二醛交联后的血红蛋白粒子;
将戊二醛交联后的血红蛋白粒子与HES按照质量比1:10混合,将配制后的溶液在一氧化碳保护下进行脱氧态转换,转换后进行过滤除菌消毒,常温真空条件下保存,得到应用于宠物失血休克急救的复苏液。
对休克大鼠进行实施例5制备的复苏液,输入本发明的复苏液后,平均动脉压(MP)在放血降至极值,随液体灌输血量恢复,血压有所升高,65%的大鼠存活超过1h,说明本发明的复苏液可以有效复苏休克大鼠。