原创发酵菌人微生物知识库2024-05-1822:55北京
在微生物学实验操作过程中，在微生物实验工作中，控制或防止各类微生物的污染及其干扰的一系列操作方法和有关措施。
无菌操作技术主要包括两个方面：创造无菌操作环境和在操作和培养过程中防止一切其他微生物的侵入的措施，也就是无菌操作技术。
二、无菌操作原则
1.区分无菌区和非无菌区，操作前戴好口罩、手套和工作服；
2.放入超净工作台里的物品，必须经过灭菌，不能摆放太挤；
3.使用完，一定要将无关物品全部取出来，紫外照射后关闭；
4.操作要在酒精灯旁边操作；
5.保证接种针冷却后再转移目标菌；
6.灼烧接种针上多余的菌种，以免污染环境。
三、无菌操作环境
2.接种针冷却
配制好固体或液体培养基后，利用高压蒸汽灭菌锅进行灭菌，经过灭菌后培养基里无任何微生物，在超过经工作台内，用接种针等将目标菌种接种到培养基中的过程叫无菌操作。
简单来说，在无菌条件下，将目标菌种转接到无菌培养基上的过程叫无菌操作。
①取菌种：取出目标菌种，融化后，备用；
②接种针灭菌：灼烧接种针进行灭菌；
③接种针冷却：将接种针移至酒精灯旁边冷却；
④蘸取菌种：甘油管用75%酒精消毒，待酒精挥发完全，在酒精灯火焰略微灭菌（防止烤糊），然后用接种环蘸取一环菌种；
⑤划线：取已经备好的固体平板，边转动平板边用酒精灯火焰灭菌，打开平板（靠口朝酒精灯），用上述接种环在平板上划线，先在一侧连续划线3-4次，边转动平板边用酒精灯灼烧接种环，冷却后，用接种环穿过第一次划线部分继续划线3-4次，同样方法进行第三次划线，或第四次划线（根据菌液浓度和菌种类型确定划线次数），灼烧接种环；
①取菌种：取出目标菌种平板；
（3）液体接种
五、注意事项
1.所有试验都必须在无菌条件下进行，在打扫卫生、实验室消毒过程中，一定要做好个人防护。
2.试验过程中，一定要正确使用酒精灯，避免着火。
3.区分灭菌物品和未灭菌物品，以免混乱，影响试验结果。
4.试验结束一定要将无关物品从超净工作台中取出，该灭菌的物品一定要灭菌后再处理，避免交叉污染。
5.采用菌落沉降法定期检查实验室情况。
6.试验过程中，尽量减少人员流动。
7.试验过程中，避免手部接触试管口、三角瓶等，以免造成污染。
8.试验过程中，如果出现意外，比如说着火，别着急，拿上湿抹布覆盖即可。