猫细小病毒抗原(CPVAg)ELISA试剂盒使用说明书

南京森贝伽现货供应,质量保证,*,试剂盒森贝伽。

实验原理:

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫法(ELISA)测定标本中猫细小病毒抗原(CPV-Ag)。用纯化的猫细小病毒抗体包被微孔板,制成固相抗体,可与样品中细小病毒抗原(CPV-Ag)相结合,经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP标记的细小病毒抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),与CUTOFF值相比较,从而判定标本中猫细小病毒抗原(CPV-Ag)的存在与否。

试剂盒组成:

试剂盒组成

48孔配置

96孔配置

保存

说明书

1份

封板膜

2片(48)

2片(96)

密封袋

1个

酶标包被板

1×48

1×96

2-8℃保存

阴性对照

0.5ml×1瓶

阳性对照

酶标试剂

3ml×1瓶

6ml×1瓶

样品稀释液

显色剂A液

显色剂B液

终止液

浓缩洗涤液

(20ml×20倍)×1瓶

(20ml×30倍)×1瓶

样本处理及要求:

1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。

2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。

3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

5.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

7.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤:

结果判定:

试验有效性:阳性对照孔平均值≥1.00;阴性对照平均值≤0.10

临界值(CUTOFF)计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.15

阴性判定:样品OD值<临界值(CUTOFF)者为猫细小病毒抗原(CPV-Ag)阴性

阳性判定:样品OD值≥临界值(CUTOFF)者为猫细小病毒抗原(CPV-Ag)阳性

注意事项

1.操作严格按照说明书进行,本试剂不同批号组分不得混用。

2.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

3.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

5.底物请避光保存。

6.试验结果判定必须以酶标仪读数为准,使用双波长检测时,参考波长为630nm

7.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为2M的硫酸,使用时必须注意安全。

THE END
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